Консорциум микроорганизмов “DEVOUROIL” Rhodococcus sp., Rhodococcus erythropolis, Rhodococcus maris, Pseudomonas stutzeri, Candida sp., используемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнений нефтепродуктами

изобретение ОТНОСИТСЯ К МИКРООНОАОГНИ, ЭКОАОГНИ И МОЖЕТ бЫТЬ НСПОА ЗОВЭНО ПРЭКТИЧССКН В АЮбОЙ ЭКОСНСТВМС ААЯ ОЧИСТКИ ВОДЫ И ПОЧВЫ ОТ ЗЗГРЯр нения нефтью или нефтепродуктами.В зависимости от состава клеточной стенки, микроорганизмы можно ус ловно разделить на две группы липофильные н гидрофильные микроорганизмыпри наличии двухфазной системы типа водатуглеводород или вс данефть первые (липофильные) концентрируются в углеводородной (нефтяног фазе, вторые (гидрофильные) В водной. ы .Аипофильные микроорганизмы могут развиваться непосредственно в нед тяной пленке, что существенно ускоряет процесс очистки от нефтяного 1 рязнения. Однако,.частично компоненты нефти растворяются В воде и это рязнение ликвидируется липофильной микрофлорой уже существенно медленнее.В отличие от липофильных, гидрофильные .микроорганизмы способны утилизации только растворенных в воде соединений.Растворимость нефти в воде низка поэтому при использовании гидрс фильнои бактериальной культуры, процессочистки от нефтяного загрязнен идет лишь в зоне контакта углеводорода с водой. Скорость процесса в зтс случае лимитируется скоростью диффузии компонента загрязнителя и площадь контакта. при толщине нефтяной пленки более 1 мм время очистки недопустим возрастает.Известны биопрепараты Эколан (рекламная информация, разработчи нпо Бурение, ВННикРнефть), Биоприн (олеворин ту 1279895-122292) ПУТИАОЙА (А.С. СССР М 1076446, 1982, А.С СССР Ы 1428809, 1988), ИСПОАЬ зуемые для,очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений.Все биопрепараты созданы на основе монокультур бактерий того ил иного типа. Соответственно, каждому из этих биопрепаратов в равной степе ни присущи определенные недостатки.во-первых, в их состав входят одни гидрофильные микроорганизмы утиАИЗИруЮЩИС ТОАЬКО растворенные В ВОДЕ СОЕДИНЕНИЯ. ъвовторых, биопрепараты работают в узком диапазоне рн н способны ак тивно окислять углеводороды только в пресной воде.Втретьих, окислению подвергаются углеводороды с длиной цепи до 12, а более тяжелые нефтяные компоненты остаются неутилизнрованными.Задача изорбретения создание консорциума микроорганизно Веуоиго 11 активно окисляющего нефтепродукты как В зоне контакта с во дои, так и непосредственно в нефтяной пленке, способного утилизировать шн рокий диапазон углеводородов нефти как в пресной, так и в заселенной эко системе. .поставленнаязадача решается тем, что в состав консорциума микроор ганизмов Вечоцго 11 входят как липофильные, так и гидрофильные микроорга низмы.при использовании веуоиго 11 устраняются все указанные недостатш применения при нефтяном загрязнении биопрепаратов на основе монокульту того или иного типа. - д .тВ состав консорциума Вечоиго 11 входят бактериальные и дрожжевы клетки. Бактерии представлены как липофильными (кпооососсиз 5 р. 3 б 72 къоаососсив щаг 15, 367-5 кьооососсцз егуЬЬгоро 11 в, 367-6). так и гидро Юфнльными (гзеиоошопаз зЪиЪ 2 ег 1, 367-1) культурамидрожжевые клетки предс тавлены в нем штаммом Сапо 1 оа 5 р. 367-3. Композиция выделена из пластовых вод нефтяного месторождения. Составконсорциума стабилен во времени, т.е. не наблюдается вытеснения (утраты отдельных его составляющих, поскольку консорциу является устоичивым природным сообществом микроорганизмов, связанных мета иотицескими взаимоотношениями. .Соотношение различных микроорганизмов в препарате Вечопго 11 определяется тем, в каких условияхон будет применяться.Основная особенность препарата состоит в том, что микроорганизмы входящие В его состав, могут развиваться В широком диапазоне солености(О 0515), поэтому с заменой компонентов препарата неизбежно следует сни жение эффективности препарата, особенно при применении его В засоленныОПНСЗНИС ШТЗММРВ МИКРООРГЗНЙЗМОВ Н АРОЖЖВЙ, ВХОАЯЩНХ В СОСТЭВ КОНСОРЦИУМЗ.Штамм Рзецеошопав Ъп 12 ег 1 3671 вкм-в н 1972 В.ВЫАСАБН ИЗ ПАНСТОВЫХ ВОА БОНАЮЖСКОГО НСФТЯНОГО МВСТОРОЖАСННЯ.Колонии на МПА светлосерые, круглые, диаметром от 3 до 15 мм, почт плоские, в Центральной части приподняты. край волнистый, прозрачный. н картофельном агаре колонии светлодсерые, круглые, выпуклые с ровным краем центральная часть бежевого оттенка, бугристая. диаметр 1-3 мм., консистен Ция мягкая, легко снимаются с поверхности агара легко размазываются. Флуоресцентный пигмент не образуют. 3. Физиологические признаки. - .Хорошо растут на формиате, ацетате пропионате, бутирате и низкомо лекулярных спиртах (исключая метанол), метанол усваивают плохо. Ассимили руют глюкозу, В мальтозу, Варабинозу и Влактозу но накопление биомасс слабое, Гидролизуют крахмал. галотолерантны, способны к росту на минераль ной среде Раймоида (с 1 ацетата и 025 дрожжевого экстракта), содержаще до 15 ЫаС 1. Используют палканы-(д 4 д. ПолиДд бутират не накапливает ся. используют аммонииный и нитратный азот, нитрат денитрифицируют, азо не фиксируют.4. Хранение штамма. - . - Штамм сохраняется в коллекции в лиофилизированном состоянии. Ал сохранения штамма используют метод периодических пересевов (3-4 раза год) на МПА или картофельном агаре с 1 ЫаС 1. Ннкубирование после пересев ведут при температуре 28 С втеченис 3-5 днейзатем культуру хранят в хо лодильнике при температуре 4 С. - мы - бВЫАЕАСН ИЗ ПАЗСТОВЫХ ВОА БОНАЮЖСКОГО НСфТЯНОГО МВСТОРОЖАВНИЯ.Граммподожитедьные, неподвижные падочки. В односуточнои кудьтуре На минерадьнои среде Раимонда (с 1 ЫаС 1 1 ацетата иО,25 дрожжевого экстракта) короткие толстые падочки. При делении наблюдается характерное расподожение кдеток под угдом друг к другу. Размер клеток - 2,3 х х 0,6 мкм, с возрастом набдюдается укорачивание клеток.2. Кудьтурадьные признаки. Имеют Ч тип кдеточной стенки, содержат микодовые кнсдоты н фосфатидидзтанодамин.Кодонии на картофедьном агаре яркооранжевые, Кругдые диаметром 171,5 мм, выпукдые с ровным краем, бдестящие. консистенция мягкая, дегко снимаются с поверхности агара легко размазываются. Хорошо растут на агаризованнои среде Раймонда с ацетатом и гексадеканом в качестве органического субстрата. Гадотодерантны, способны к росту на минерадьно среде Раимонда (с 1 ацетата и О 25 дрожжевого экстракта), содержащей до 15 ЫаС 1. при содености свыше 5 набАюдается замедденное пигментиро ванне кодоний с развитием окраски от сдабо до яркооранжевой.Катадазоподожитедьные, некисдотоустойчивые, жедатин не разжижаю казеин не раздагают, крахмад не гидродизуют. Хорошо ассимидируют падка(С 1 дд 9, ацетат, бутират, гАюкозу ВмаАьтозу. Слабое развитие на пропи нате, формиате, зтаноде пропаноде, бутаноде. Не ассимидируют В-арабинои ВАактозу. Хорошо растут на дрожжевом экстракте. исподьзуют аммонийиый нитратный азот. - 4, хранение штамма.штамм сохраняется в коддекции в Аиофидизированном состоянии. Адя сохранения штамма исподьзуют метод периодических пересевов (34 раза в год) на картофедьном агаре с 1 ЫаС 1. инкубирование посде пересева вен дут при температуре 28 С в течение 7-10 дней, затем кудьтуру хранят в хододидьиике при температуре 4 С.Штамм Епооососсиз таг 15 3675 ВКМ АС 1501 В.ВЫАСАЕН ИЗ ПАБСТОВЫХ ВОА БСНАЮЖСКОГО НЕФТЯНОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ.Граммподожитедьные, неподвижные, очень короткие с закругденными К 0 НЦаМН ПаАочки. В односуточной культуре на минерадьной среде Раимонда(с 1 ЫаС 1, 1 ацетата и 0,25 Арожжевого экстракта) преобдадают неразошедшиеся в ходе дедения кдетки с характерным расположением под УГАОМ Аруг К другу. Размер кдеток 1,3 х 0,8 мкм, с возрастом набдюдается их укорачивание.Имеют 1 У тип кдеточной стенки, содержат микодовые кисдоты и фосфатидндэтанодамин. .кодонии на картофедьном агаре яркооранжевые кругАые диаметром 11,5 мм, выпукдыс с ровным краем. бдестяшне. Консистенция мягкая, дегко снимаются с поверхности агара, Аегко размазываются. Хорошо растут на ЭГЗРНЗОВЭННОЙ среде Раймонда С ацетатом Н ГВКСЗАВКЗНОМ В КНЧССТВВ орга нического субстрата. ГаАотоАерантны способны к росту на минерадьной среде Раимонда (с 1 ацетата и 0.25 дрожжевого экстракта), содержащей до 20 ЫаС 1. при солености свыше 5 наблюдается замсдденное пиГМснТир 0 ванне кодонии с развитием окраски от сАабо до яркооранжевой.хорошо ассимндируют паАканы (СддСдд), ацетат, пропионат, бутират, этанод, бутанод, пропанол, гдюкозу. Сдабое развитие на формиате иметаноде. хорошо растут на дрожжевом экстракте. исподьзуют аммонииный иШтамм сохраняется в коддекции в Аиофиднзированном состоянии. ддя сохранения штамма исподьзуют метод периодических пересевов (34 раза в год) на картофедьном агаре с 1 ЫаС 1. инкубирование посде пересева ведут при температуре 28 С в течение г 10 дней, затем кудьтуру хранят в кододидьнике при температуре 4 С.Штамм ЕЬооососсп егуЬЬгоро 115, 3676 ВКМ АС 1502 В.Выделен из пдастовых вод Бондюжского нефтяного месторождения.Граммподожитедьные, неподвижные. при развитии хорошо заметны изменения вида кудьтуры типа коккпадочка-кокк.В односуточнои кудьтуре на мннерадьной среде Раймонда (с 1 ЫаС 1,1 ацетата и о,25 дрожжевого экстракта) прямые с закругденными концами падочки. При дедении набдюдается характерное расподожеиие под угдомукорачивание кдеток до 0,8 х 0,6 мкм.имеют 1 У тип кдеточной стенки, содержат микодовые кисдоты и фосфатидидзтанодамин.КоА 0 нии на картофедьном агаре бежевые, кругдые, диаметром до 5 мм, выпукдые с ровным краем, блестящие, сднзистые. консистенция мягкая,АВГК 0 снимаются с поверхности агара Аегко размазываются. хорошо растут на МПА, сусАоагаре и на агаризованной среде Раймонд с ацетатом и гексадеканом в качествеорганического субстрата. В жидких средах образуют обидьный сдизистый осадок.Хорошо ассимидируют п-адканы (СцдС 5 д), ацетат, бутиратзтаноА бутанол, гдюкозу, В-мадьтозу, ВАактозу. Сдабое развитие на пропиоиате,формиата, пропаноде, В-арабннозе. хорошо растут на дрожжевом экстракте. Гадотодерантны, способны ка росту на минерадьной среде Раймонда (с 1