Способ стимуляции поствакцинального противовирусного иммунитета к возбудителям инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи у теленка

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ПРОТИВОВИРУСНОГО ИММУНИТЕТА К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА, ПАРАГРИППА-3 И ВИРУСНОЙ ДИАРЕИ У ТЕЛЕНКА(71) Заявитель Учреждение образования Витебская ордена Знак Почета государственная академия ветеринарной медицины(72) Авторы Машеро Владимир Александрович Красочко Павел Петрович Пташок Александр Леонидович(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебская ордена Знак Почета государственная академия ветеринарной медицины(57) Способ стимуляции поствакцинального противовирусного иммунитета к возбудителям инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи у теленка, отличающийся тем, что после проведения вакцинации область щитовидной железы облучают полихроматическим поляризованным светом лампы Биоптрон по 8 минут утром и вечером в течение 10 дней. Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, в частности к способам стимуляции поствакцинального противовирусного иммунитета у телят. Известны способы специфической профилактики инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3 телят путем их иммунизации вирусвакциной против данных инфекций 2. Недостатком этого способа является недостаточная эффективность выработки поствакцинального иммунитета, обусловленная проведением иммунизации животных на фоне угнетения иммунной системы, вызванной стрессовыми явлениями, нарушениями белкового, минерального обменов, экологическими факторами. Известны также способы лечения острых респираторных вирусных инфекций у людей с использованием оптического излучения в синем диапазоне спектра 410-480 нм 3, 4. Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ стимуляции поствакцинального иммунитета у телят с помощью низкоинтенсивного лазерного излучения (при мощности 10 милливатт) в инфракрасном спектре 1. Недостатком данного способа является то, что лазерное излучение имеет очень узкий спектр излучения (монохроматический свет) и обладает высокой интенсивностью. 11354 1 2008.12.30 Задачей настоящего изобретения является разработка способа активизации поствакцинального противовирусного иммунитета у телят с использованием полихроматического поляризованного света, излучаемого лампой Биоптрон. Поставленная задача достигается тем, что для повышения иммунологической эффективности вакцины против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3 телят в качестве иммуностимулятора использован полихроматический поляризованный свет, излучаемый лампой Биоптрон, который применяли наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 8 минут облучения 2 раза в день утром и вечером в течение 10 дней. Полихроматический поляризованный свет, излучаемый лампой Биоптрон про производства(Швейцария), одновременно обладает свойствами солнечного и лазерного излучения, активизирует и стимулирует в клетках синтез белков,активизирует фагоцитоз, повышает хемотаксис. Биологическое действие полихроматического поляризованного света воздействие обусловлено активизацией двух светопоглощающих ферментных комплексов крови НАД-оксидазе и -оксидазе. В отличие от лазера свет прибора Биоптрон ни во временном, ни в пространственном отношении не синхронизирован, то есть пики волн, и, следовательно, интенсивность не суммируются и не вычитаются друг из друга. Таким образом, поток излучения воздействует на участок кожи с постоянной интенсивностью, а это означает, что световое излучение меньшей интенсивности 1, 4. Способ осуществляется следующим образом. Пример 1 Для отработки оптимального времени облучения полихроматическим поляризованным светом на 40 телятах черно-пестрой породы, 2 месячного возраста, которых разделили на 4 группы по 10 голов в группе. Телятам опытной группы 1 вводили культуральную вирусвакцину против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота в дозе 3 мл двукратно с интервалом 28 дней. Животным опытной группы 2 - ту же дозу вирусвакцины с облучением полихроматическим поляризованным светом, наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 4 минуты облучения, 2 раза в день, утром и вечером в течение 10 дней. Опытной группе 3 - ту же дозу вирусвакцины с облучением полихроматическим поляризованным светом, наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 8 минуты облучения, 2 раза в день, утром и вечером в течение 10 дней. Опытной группе 4 - ту же дозу вирусвакцины с облучением полихроматическим поляризованным светом, наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 10 минут облучения, 2 раза в день, утром и вечером в течение 10 дней. У всех животных, находящихся в опыте, брали кровь до опыта, на 10, 20 и 40 день исследований, готовили сыворотку и определяли титр антител к вирусам инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота. В табл. 1 представлены данные по отработке оптимального времени облучения полихроматическим поляризованным светом, для стимуляции поствакцинального иммунитета,при вакцинации телят против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи. 11354 1 2008.12.30 Таблица 1 Результаты отработки времени облучения телят полихроматическим поляризованным светом Титры антител в РНГА (2) Сроки отбора проб Группа 2 Группа 3 Группа 4 Возбудитель крови (к-во дней Группа 1 (Вакцина(Вакцина(Вакцинас начала опыта) 4 минуты 8 минут 10 минут(Вакцина) облучения) облучения) облучения) Инфекционный До иммунизации 0 0 0 0 ринотрахеит 10 день 4,10,8 4,10,9 4,20,2 4,00,8 20 день 5,20,2 6,00,5 7,10,5 6,80,3 40 день 6,70,4 9,30,6 9,30,6 7,30,7 Вирусная диа- До иммунизации 0 0 0 0 рея 10 день 3,50,8 3,40,1 3,60,1 3,50,1 20 день 5,10,2 5,50,3 6,50,3 5,30,8 40 день 8,30,4 8,70,4 9,70,4 8,60,8 Парагрипп-3 До иммунизации 0 0 0 0 10 день 4,00,2 4,20,7 4,30,3 4,10,7 20 день 5,10,5 6,40,4 7,40,6 6,50,8 40 день 9,10,5 8,40,2 9,40,3 8,70,4 Из табл. 1 видно, что оптимальным временем облучения полихроматическим поляризованным светом для стимуляции поствакцинального иммунитета является 8 минут в течение 10 дней. Пример 2. Для изучения влияния полихроматического поляризованного света на формирование поствакцинального иммунитета против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи был проведен опыт на телятах. Было использовано 40 телят черно-пестрой породы, 2 месячного возраста, которых разделили на 4 группы, по 10 голов в группе. Телятам опытной группы 1 вводили культуральную вирусвакцину против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота в дозе 3 мл двукратно с интервалом 28 дней. Животным опытной группы 2 - ту же дозу вирусвакцины с облучением полихроматическим поляризованным светом, наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 8 минут облучения, 2 раза в день, утром и вечером в течение 10 дней. Опытной группе 3 - ту же дозу вирусвакцины с облучением низкоинтенсивным лазерным излучением (при мощности 10 милливатт) в инфракрасном спектре, наружно в области щитовидной железы, начиная с первой вакцинации по 5 минут облучения, 2 раза в день, утром и вечером в течение 10 дней. Опытная группа 4 - контроль (вместо вирусвакцины с облучением полихроматическим поляризованным светом вводили изотонический раствор натрия хлорида). У всех животных, находящихся в опыте брали кровь до опыта, на 10, 20 и 40 день исследований, готовили сыворотку и изучали основные показатели клеточного (количество лейкоцитов, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс) и гуморального иммунитета (бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови и титр противовирусных антител в РНГА). В табл. 2 представлены результаты динамики иммуногенеза у телят после иммунизации их чистой вирусвакциной и вирусвакциной со стимуляцией поствакцинального иммунитета и при введении животным физиологического раствора. 11354 1 2008.12.30 Таблица 2 Динамика иммуногенеза у телят, вакцинированных против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота Титры антител в РНГА (2) Сроки отбора Группа 2 Группа 3 проб крови (к-во(Физ. рас(Вакцина) опыта) облучения облучения твор) Биоптрон) НИЛИ) Инфекционный До иммунизации 0 0 0 0 ринотрахеит 10 день 4,10,8 4,20,2 4,10,9 0 20 день 5,20,2 7,10,5 5,80,4 0 40 день 6,70,4 9,30,6 7,50,8 0 Вирусная диа- До иммунизации 0 0 0 0 рея 10 день 3,50,8 3,60,1 3,50,9 0 20 день 5,10,2 6,50,3 5,30,5 0 40 день 8,30,4 9,70,4 8,40,8 0 Парагрипп-3 До иммунизации 0 0 0 0 10 день 4,00,2 4,30,3 4,20,1 0 20 день 5,10,5 7,40,6 5,50,7 0 40 день 9,10,5 9,40,3 9,20,5 0 Из представленных результатов видно, что титр антител уже на 20 день после вакцинации со стимуляцией облучением полихроматическим поляризованным светом составил к возбудителю инфекционного ринотрахеита - 7,1 2, вирусной диареи - 6,5 2, парагриппу - 3-7,4 2, к 40 дню соответственно 9,3 9,7 9,4 2, тогда как у вакцинированных одной вакциной к возбудителю инфекционного ринотрахеита - 5,2 2, вирусной диареи - 5,1 2, парагриппу - 3-5,1 2, к 40 дню соответственно 6,7 8,3 9,1 2, а вакцинированных с облучением низкоинтенсивным лазерным излучением (при мощности 10 милливатт) в инфракрасном спектре к возбудителю инфекционного ринотрахеита - 5,8 2,вирусной диареи - 5,3 2, парагриппу - 3-5,5 2, к 40 дню соответственно 7,5 8,4 9,2 2, что свидетельствует о более сильной активизации биосинтеза противовирусных антител при проведении вакцинации с облучением полихроматическим поляризованным светом. В табл. 3 представлена динамика изменения количества лейкоцитов в крови у телят. Таблица 3 Динамика изменения количества лейкоцитов в крови у телят, вакцинированных против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота со стимуляцией поствакцинального иммунитета Группа 2 Группа 3 Сроки отбора проб Группа 1(тыс.мм 3) До иммунизации 7,80,59 7,241,25 8,01,11 7,90,59 10 день 8,50,88 9,940,66 8,340,58 7,70,59 20 день 9,00,52 10,80,34 10,70,3 7,80,59 40 день 8,20,34 9,50,27 9,50,3 8,10,59 Из табл. 3 видно, что в результате иммунизации со стимуляцией изменяется количество лейкоцитов в крови у телят. У обработанных телят отмечается лейкопения. Однако у телят, облученных полихроматическим поляризованным светом, лейкопения выражена в 4 11354 1 2008.12.30 меньшей степени по сравнению с применением низкоинтенсивным лазерным излучением(при мощности 10 милливатт) в инфракрасном спектре. Данные, представленные в табл. 4, свидетельствуют об активизации фагоцитоза, одного из основных показателей неспецифического гуморального иммунитета. Таблица 4 Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов у телят, вакцинированных против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота со стимуляцией поствакцинального иммунитета Сроки отбора Группа 2 Группа 3 проб крови(Вакцина) 5 минут облу- (Физ. раствор) с начала облучения чения НИЛИ) опыта) Биоптрон) До иммуниФагоцитар 3,170,22 3,020,2 3,450,36 3,220,22 зации ный индекс Фагоцитарное 64,03,43 62,42,58 61,62,58 66,03,43 число 10 день Фагоцитар 3,430,31 3,80,11 3,510,17 3,070,22 ный индекс Фагоцитарное 67,22,58 70,42,58 69,42,58 62,03,43 числоФагоцитар 3,460,25 3,80,21 4,111,3 3,330,22 ный индекс 20 день Фагоцитарное 71,21,72 73,60,86 72,00,71 68,03,43 число 40 день Фагоцитар 4,040,14 4,120,16 4,111,3 3,570,22 ный индекс Фагоцитарное 72,81,72 76,01,72 72,81,72 64,03,43 числоНаиболее высокими были показатели фагоцитарного числа и индекса у телят, вакцинированных с облучением полихроматическим поляризованным светом. Показатели фагоцитарного числа и индекса у телят, обработанных только вакциной и со стимуляцией НИЛИ, были примерно на одном уровне. Полученные данные по изучению динамики бактерицидной активности сыворотки крови (табл. 5) свидетельствуют о существенных изменениях этого звена иммунитета. Таблица 5 Динамика бактерицидной активности сыворотки крови у телят, вакцинированных против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота со стимуляцией поствакцинального иммунитета Группа 3 Группа 2 (ВакСроки отбора проб Группа 1( ) До иммунизации 48,712,1 47,94,03 45,61,07 48,712,1 Взятие крови через 50,010,7 55,513,4 52,61,07 49,94,03 10 дней Взятие крови через 61,81,07 60,05,36 58,71,07 46,712,1 20 дней Взятие крови через 55,46,8 59,313,1 54,81,07 45,94,03 40 дней 5 11354 1 2008.12.30 Особенно это характерно у животных, облученных полихроматическим поляризованным светом. Бактерицидная активность сыворотки крови достоверно изменялась до 20 дня после иммунизации. К 40 дню этот показатель был выше у телят, облученных полихроматическим поляризованным светом на 10 . Таблица 6 Динамика лизоцимной активности сыворотки крови у телят, вакцинированных против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота со стимуляцией поствакцинального иммунитета Сроки отбора проб крови (к-во дней с начала опыта) До иммунизации Взятие крови через 10 дней Взятие крови через 20 дней Взятие крови через 40 дней В табл. 6 представлены данные по динамике изменений лизоцимной активности сыворотки крови у телят, которые также свидетельствуют о существенных изменениях этого звена иммунитета. Особенно это характерно у животных, облученных полихроматическим поляризованным светом. Этот показатель иммунитета характерно изменялся на протяжении всего опыта. К 40 дню концентрация лизоцима в сыворотке крови у телят, облученных полихроматическим поляризованным светом, была на 20 больше. Таким образом, иммунизация телят одновременно с облучением полихроматическим поляризованным светом позволяет на 50-60 активизировать основные показатели поствакцинального иммунитета, что приводит к более напряженному противовирусному иммунитету. Источники информации 1. Козловский А.Н. Лазерная и магнитолазерная терапия в повышении резистентности и комплексном лечении телят, больных бронхопневмонией / Козловский А.Н. Автореф. дисс. канд. вет. наук 16.00.01 / УО ВГАВМ. - Витебск, 2004. - 22 с. 2. Красочко П.А., Зелютков Ю.Г., Красочко И.А. Вирусные пневмоэнтериты телят / П.А.Красочко, Ю.Г.Зелютков, И.А.Красочко. - Минск БИТ Хата, 1999. - С. 162. 3., СН- 8617 , . . - 1997. - .8-14. 4. Патент РФ 2260459 Способ лечения острых респираторных вирусных инфекций Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 6