Способ получения экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ФЛЕГМОНЫ ПОДЧЕЛЮСТНОЙ ОБЛАСТИ(71) Заявитель Учреждение образования Белорусский государственный медицинский университет(72) Авторы Походенько-Чудакова Ирина Олеговна Казакова Юлия Михайловна Кабанова Арина Александровна(73) Патентообладатель Учреждение образования Белорусский государственный медицинский университет(56) ДУРНОВО Е.А. и др. Биомедицинский журнал. - 2004. - Т. 5. - Ст. 33. - С. 130-131. ФУРМАН И.В. Экспериментально-клиническое обоснование применения перфторана в комплексном лечении больных с одонтогенными флегмонами челюстно-лицевой области Автореф. дис.М., 2004. - С. 7. ГАЙВОРОНСКАЯ Т.В. Стоматология. 2008. - Т. 87. -1. - С. 18-21.(57) Способ получения экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области, отличающийся тем, что кролику вводят в подчелюстную область смесь, содержащую 2 мл крови кролика и 2 мл гнойного экссудата, который получен от человека, страдающего острым одонтогенным гнойным периоститом, при первичной хирургической обработке острого одонтогенного гнойного периостита, и на седьмые сутки констатируют формирование флегмоны. Изобретение относится к медицине, разделу челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии. Известен способ получения модели гнойно-воспалительного процесса мягких тканей в эксперименте 1. Способ заключается в том, что экспериментальному животному - белой крысе линиис массой тела 2002,0 г - после фиксации особи в специальном штативе под местной анестезией в области наружной поверхности бедра удаляют волосяной покров. Затем на депилированном участке внутримышечно вводят 0,5 мл 10 -ного раствора кальция хлорида и 0,3 мл взвеси гнойного экссудата, в котором вегетирует золотистый стафилококк. Через 48 ч на месте введения образуется инфильтрат с плотным основанием и очагом флюктуации в зоне инъекции. Преимуществом данного способа создания экспериментальной модели гнойновоспалительного процесса мягких тканей является то, что 1) для получения модели используются легко воспроизводимые лабораторные животные - белые крысы линии , обеспечивающие необходимое число однопометных особей, что позволяет контролировать чистоту эксперимента 18275 1 2014.06.30 2) воспроизведение модели не требует значительных временных и материальных затрат 3) полученная модель позволяет проводить клинические и патоморфологические исследования в динамике развития гнойно-воспалительного процесса, протекающего в мягких тканях, а также оценивать эффективность применяемых лечебных комплексов. Недостатки способа заключаются в том, что 1) экспериментальная модель гнойно-воспалительного процесса мягких тканей создается не в челюстно-лицевой области (в области наружной поверхности бедра, а не в области головы и шеи лабораторного животного). Два указанных региона в значительной мере отличаются, васкуляризацией, иннервацией и путями распространения гнойно-воспалительного процесса. Указанная модель не в полной мере соответствует реальным клиническим условиям при развитии и течении разлитого гнойно-воспалительного процесса в условиях клиники 2) клиническая картина получаемой модели в большей мере соответствует диагнозу абсцесс мягких тканей, так как инфильтрат с плотным основанием и очагом флюктуации,как правило, имеет четко обозначенные границы 2 3) малый размер самого животного и, следовательно, малый размер органов и тканей области головы и шеи затрудняют не только оперативное вмешательство - первичную хирургическую обработку (ПХО) гнойного очага, но изготовление препарата для патоморфологического исследования, что отражается на результатах исследования, приводя к невысокой точности 4) технически сложно осуществить наблюдения за динамикой жизненно-важных лабораторных показателей, определяемых в сыворотке крови, в связи с малым объемом циркулирующей крови. Наиболее близким (принятым за прототип) является способ создания экспериментальной модели гнойно-воспалительного процесса мягких тканей подчелюстной области, при котором экспериментальному животному - белой крысе линиис массой тела 2002,0 г - после фиксации особи в специальном штативе в подчелюстную область вводят 0,5 мл музейного штамма. Через трое суток на месте введения образуется инфильтрат с плотным основанием и очагом флюктуации 3. Общим признаком для заявляемого способа и прототипа является то, что получение модели осуществляется внутримышечным введением музейного штаммав подчелюстную область экспериментального животного. Преимуществом данного способа создания экспериментальной модели гнойновоспалительного процесса мягких тканей в подчелюстной области является то, что 1) экспериментальная модель гнойно-воспалительного процесса мягких тканей создается в подчелюстной области, в полной мере соответствует реальным клиническим условиям при развитии, течении и распространении гнойно-воспалительного процесса указанной локализации 2) для получения модели используются легко воспроизводимые лабораторные животные - белые крысы линии , обеспечивающие необходимое число однопометных особей, что позволяет контролировать чистоту эксперимента 3) воспроизведение модели не требует значительных временных и материальных затрат 4) полученная модель позволяет проводить клинические и патоморфологические исследования в динамике развития гнойно-воспалительного процесса, протекающего в мягких тканях, а также оценивать эффективность применяемых лечебных комплексов. Недостатки способа-прототипа заключаются в том, что 1) вмешательство производят без обезболивания, что противоречит требованиям,предъявляемым к научному эксперименту с использованием животных 2) клиническая картина получаемой модели в большей мере соответствует диагнозу абсцесс мягких тканей, так как инфильтрат с плотным основанием и очагом флюктуации,как правило, имеет четко обозначенные границы 2 18275 1 2014.06.30 3) малый размер самого животного и, следовательно, малый размер органов и тканей области головы и шеи затрудняют не только оперативное вмешательство - первичную хирургическую обработку гнойного очага, но изготовление препарата для патоморфологического исследования, что отражается на результатах исследования, приводя к невысокой точности 4) технически сложно осуществить наблюдения за динамикой жизненно-важных лабораторных показателей, определяемых в сыворотке крови, в связи с малым объемом циркулирующей крови 5) технически сложно проводить комплексного лечения, включающего первичную хирургическую обработку гнойного очага, антибактериальную, противовоспалительную и дезинтоксикационную терапию, требующую катетеризации вен, при тяжелом состоянии особи. Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, заключается в создании экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области, локализация, симптомы, пути распространения, а также методы исследования и лечения при которой сходны с таковыми в реальных клинических условиях и позволяют экономично и наиболее гуманно получить разлитой гнойно-воспалительный процесс области головы и шеи упрощении способа, обеспечении возможности динамического изучения клинических и лабораторных показателей, характеризующих жизненно важные функции органов и систем организма экспериментального объекта, что объективизирует оценку эффективности исследуемых лечебных комплексов. Поставленная задача решается за счет того, что в способе получения экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области кролику вводят в подчелюстную область смесь, содержащую 2 мл крови кролика и 2 мл гнойного экссудата, который получен от человека, страдающего острым одонтогенным гнойным периоститом, при первичной хирургической обработке острого одонтогенного периостита, и на седьмые сутки констатируют формирование флегмоны. Способ выполняется следующим образом. Создание экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области, а также последующее комплексное лечение, включающее первичную хирургическую обработку гнойного очага, антибактериальную, противовоспалительную и дезинтоксикационную терапию, содержание животных, выведение их из эксперимента и забор материала, проводят в выделенном отдельном боксе, соответствующем всем правилам и нормам, удовлетворяющим условиям работы с условнопатогенными микроорганизмами, с соблюдением всех правил асептики и антисептики. Оперативное вмешательство по созданию экспериментальной модели флегмоны подчелюстной области осуществляют под внутривенным наркозом (в краевую вену уха медленно струйно вводят 2,5-3,5 мл 1 -ного раствора тиопентала-натрия) 4, 5. С выбранной стороны в поднижнечелюстной области экспериментального животного выбривают шерсть. С соблюдением всех правил асептики и антисептики из краевой вены уха экспериментального животного в стерильный одноразовый шприц забирают 2 мл крови, которую в стерильной пробирке смешивают с заранее приготовленными 2 мл гнойного экссудата, полученного в процессе первичной хирургической обработки острого одонтогенного гнойного периостита человека. Время заготовки гнойного экссудата для создания экспериментальной модели разлитого гнойно-воспалительного процесса мягких тканей подчелюстной области не превышало 24 ч до момента оперативного вмешательства, выполняемого с целью моделирования указанного патологического процесса. Полученную смесь в количестве 4 мл забирают в стерильный одноразовый шприц. Далее выполняют антисептическую обработку операционного поля. Пропальпировав нижний край нижней челюсти и передний край щечной мышцы, вкол иглы осуществляют в подчелюстной области с язычной стороны нижней челюсти на уровне переднего края щечной мышцы и 3 18275 1 2014.06.30 направляют инструмент вверх и кзади. При погружении иглы на 2,5-3 см вводят 4 мл смеси венозной крови животного и гнойного экссудата человека в соотношении (11). После операции кроликов помещают в отдельные клетки под наблюдение ветеринарного врача. В течение первых суток после операции животные начинают поедать привычную пищу, что указывает на незначительность действия травмирующего агента по отношению к их общему состоянию. Флегмона в подчелюстной области экспериментального животного формируется в течение 7 суток. О развившемся разлитом гнойно-воспалительном процессе (флегмоне подчелюстной области) судят по наличию классических признаков воспаления местной гипертермии в зоне формирования гнойно-воспалительного очага,отеке, значительном локальном повышение температуры, животное остро реагирует на пальпацию подчелюстной области. К седьмым суткам появляются симптомы интоксикации(имеет место значительное повышение температуры тела, учащенное дыхание и сердцебиение, животное отказывается от приема пищи). В подчелюстной области определялся разлитой инфильтрат, в центре которого имеется очаг флюктуации. В течение седьмых суток под общим внутривенным обезболиванием (в краевую вену уха медленно струйно вводят 7 мл 1 -ного раствора тиопентала-натрия) проводят первичную хирургическую обработку гнойного очага с дренированием раны. В процессе проведения ПХО гнойного очага из раны получают обильный гнойный экссудат с неприятным запахом. Все указанные признаки являются характерными симптомами, на основании которых можно поставить диагноз флегмона подчелюстной области. В послеоперационном периоде животным осуществляют ежедневные перевязки с обязательной сменой дренажей и инстилляцией гнойных ран растворами антисептиков. Проводят антибактериальную, противовоспалительную, дезинтоксикационную терапию. Обеспечивают парентеральное питание. Все указанное соответствует требованиям, предъявляемым к научному эксперименту с использованием животных. Таким образом, предлагаемый способ обладает рядом преимуществ 1) экспериментальная модель гнойно-воспалительного процесса мягких тканей подчелюстной области в полной мере соответствует реальным клиническим условиям при развитии, течении и распространении патологического процесса указанной локализации 2) по клиническим проявлениям экспериментальная модель гнойно-воспалительного процесса мягких тканей подчелюстной области в полной мере соответствует диагнозу флегмона (гнойное разлитое воспаление подкожно-жировой клетчатки, межмышечных и межфасциальных пространств) 3) позволяет получить 100 выход модели флегмоны подчелюстной области, обеспечивая возможность наиболее гуманного подхода к использованию лабораторных животных,значительно уменьшая число особей, задействованных в эксперименте, что соответствует требованиям, предъявляемым к научному эксперименту с использованием животных 4) дает возможность получить модель флегмоны подчелюстной области, позволяющую без технических затруднений проводить комплексное лечение, включающее первичную хирургическую обработку гнойного очага, антибактериальную, противовоспалительную и дезинтоксикационную терапию, требующую катетеризации вен, при тяжелом состоянии животного, что соответствует реальным условиям клинических ситуаций 5) позволяет получить модель флегмоны подчелюстной области, которая является оптимальной, в связи с достаточным размером органов головы и шеи кролика для осуществления забора материала и проведения патоморфологического исследования 6) позволяет получить модель флегмоны подчелюстной области, которая является оптимальной в связи с достаточным объемом циркулирующей крови, позволяющим осуществлять лабораторные исследования в динамике развития патологического процесса и его лечения 7) является экономически оправданным. 18275 1 2014.06.30 Источники информации 1. Тобоев Г.В. Клинико-морфологические характеристики регенераторной активности мягких тканей в лечении больных с воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области (клинико-экспериментальное исследование) Автореф. дис.д-ра мед. наук. ГОУ ВПО Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко Министерства здравоохранения и социального развития. - Воронеж, 2010. - 47 с. 2. Бернадский Ю.И. Основы челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии. - М. Мед. лит., 2000. - 416 с. 3. Дурново Е.А. и др. Исследование дезинтоксикационного действия перфторана на экспериментальной модели в комплексном лечении острых воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области // Биомедицинский журнал. - 2010. -5. - С. 130-131. 4. Фурман И.В. Экспериментально-клиническое обоснование применения перфторана в комплексном лечении больных с одонтогенными флегмонами челюстно-лицевой области Автореф. дис. - М., 2004. - С.7. 5. Гайворонская Т.В. Стоматология. - 2008. - Т. 87. -1. - С. 18-21. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5