Способ количественного колориметрического определения N-гидроксимочевины

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ -ГИДРОКСИМОЧЕВИНЫ(71) Заявитель Учреждение Белорусского государственного университета Научно-исследовательский институт физико-химических проблем(72) Авторы Красицкий Василий Анатольевич Андреева Татьяна Николаевна Григорьев Юрий Викторович Ивашкевич Олег Анатольевич(73) Патентообладатель Учреждение Белорусского государственного университета Научно-исследовательский институт физико-химических проблем(57) Способ количественного колориметрического определения -гидроксимочевины в водных растворах, включающий обработку анализируемого раствора водным раствором вещества, образующего с -гидроксимочевиной водорастворимое окрашенное соединение, измерение оптической плотности полученного раствора и определение концентрации -гидроксимочевины по ее величине, отличающийся тем, что для обработки используют водный солянокислый раствор молибдата аммония при следующем соотношении его компонентов, г/л молибдат аммония 40-50 соляная кислота концентрированная 200-240 вода остальное до 1 л. Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способу количественного колориметрического определения -гидроксимочевины (ГМ), являющейся биологически активным веществом, применяемым при производстве противоопухолевых лекарственных препаратов. Известны способы количественного колориметрического определения ГМ 1-3, включающие получение окрашенного комплекса с пикрилхлоридом, нитропруссидом, 8 гидроксихинолином, сульфатом меди, экстрагирование его органическими растворителями и измерение оптической плотности экстракта. Недостатком этих методов определения является неустойчивость во времени образующихся в ходе анализа окрашенных комплексных соединений ГМ и, как следствие, плохая воспроизводимость и точность результатов. Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к заявляемому является способ количественного колориметрического определения ГМ, описанный в 4. Способ заключается в приготовлении водных растворов ГМ и хлорида железаопределенной концентрации, смешением их непосредственно перед определением, измере 6179 1 нии оптической плотности и определении концентрации ГМ по заранее установленной зависимости концентрация ГМ - оптическая плотность. Недостатком известного способа количественного колориметрического определения ГМ является неустойчивость во времени образующихся в ходе анализа окрашенных соединений ГМ и, как следствие, плохая воспроизводимость и точность результатов(3,0 ). Кроме того, известный способ для получения более точных результатов требует использования свежеприготовленных растворов, что увеличивает его трудоемкость. Задачей заявляемого способа определения является повышение точности и воспроизводимости количественного колориметрического анализа -гидроксимочевины. Поставленная задача достигается тем, что в известном способе количественного колориметрического определения -гидроксимочевины в водных растворах, включающем обработку анализируемого раствора водным раствором вещества, образующего с гидроксимочевиной водорастворимое окрашенное соединение, измерение оптической плотности полученного раствора и определение концентрации -гидроксимочевины по ее величине, анализируемый раствор -гидроксимочевины обрабатывают водным солянокислым раствором молибдата аммония при следующем содержании компонентов (в г/л) молибдат аммония 40-50 г соляная кислота концентрированная 200-240 г вода остальное до 1 л. Изобретение иллюстрируется следующими примерами. Пример 1. Навеску исследуемого образца ГМ (10-30 мг), взятую с точностью до 0,00005 г, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл и добавляют 20 мл раствора А следующего состава молибдат аммония 40 г соляная кислота концентрированная 200 г вода остальное до 1 л. Содержимое колбы перемешивают до полного растворения исследуемого образца ГМ(при этом образуется раствор желтого цвета) и добавляют раствор А до метки. Колбу закрывают и перемешивают ее содержимое. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 427 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор А. Параллельно измеряют оптическую плотность приготовленного вышеуказанным способом раствора рабочего стандартного образца (РСО) ГМ. Содержание ГМв анализируемой пробе в пересчете на сухое вещество в процентах вычисляют по формуле 1 0100, 0 1 где 1 - оптическая плотность анализируемого раствора,0- оптическая плотность раствора РСО ГМ,0 -масса навески РСО ГМ, г,1 - масса навески исследуемого образца ГМ, г. Получают содержание ГМ в анализируемой пробе с точностью до 0,5 . Пример 2. Навеску исследуемого образца ГМ (10-30 мг), взятую с точностью до 0,00005 г, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл и добавляют 20 мл раствора А следующего состава молибдат аммония 50 г соляная кислота концентрированная 240 г вода остальное до 1 л. 2 6179 1 Содержимое колбы перемешивают до полного растворения исследуемого образца ГМ(при этом образуется раствор желтого цвета) и добавляют раствор А до метки. Колбу закрывают и перемешивают ее содержимое. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 427 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор А. Параллельно измеряют оптическую плотность приготовленного вышеуказанным способом раствора рабочего стандартного образца (РСО) ГМ. Содержание ГМв анализируемой пробе в пересчете на сухое вещество в процентах вычисляют по формуле, указанной в примере 1. Получают содержание ГМ в анализируемой пробе 0,5 . Пример 3. Навеску исследуемого образца ГМ (10-30 мг), взятую с точностью до 0,00005 г, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл и добавляют 20 мл раствора А следующего состава молибдат аммония 40 г соляная кислота концентрированная 200 г вода остальное до 1 л. Содержимое колбы перемешивают до полного растворения исследуемого образца ГМ(при этом образуется раствор желтого цвета) и добавляют раствор А до метки. Колбу закрывают и перемешивают ее содержимое. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 427 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор А. Содержание ГМ в анализируемой пробе определяют по калибровочному графику зависимости концентрация ГМ - оптическая плотность, построенному по данным анализа образца ГМ с известным содержанием основного вещества. Получают содержание ГМ в анализируемой пробе с точностью до 0,5 . Пример 4. Навеску исследуемого образца ГМ (10-30 мг), взятую с точностью до 0,00005 г, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл и добавляют 20 мл раствора А, выдержанного при комнатной температуре в течение 2-х месяцев, следующего состава молибдат аммония 40 г соляная кислота концентрированная 200 г вода остальное до 1 л. Содержимое колбы перемешивают до полного растворения исследуемого образца ГМ(при этом образуется раствор желтого цвета) и добавляют раствор А до метки. Колбу закрывают и перемешивают ее содержимое. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 427 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор А. Содержание ГМ в анализируемой пробе определяют по калибровочному графику зависимости концентрация ГМ - оптическая плотность, построенному по данным анализа образца ГМ с известным содержанием основного вещества. Получают содержание ГМ в анализируемой пробе с точностью до 0,5 . Как видно из приведенных данных, заявляемый способ позволяет повысить точность и воспроизводимость количественного колориметрического определения ГМ, менее трудоемок за счет сокращения стадий обработки и применения в ходе анализа растворов, устойчивых в течение длительного времени. Таким образом, использование заявляемого способа позволяет устранить существенный недостаток способа-прототипа - изменение во времени оптической плотности анализируемых растворов вследствие нестойкости образующихся комплексных соединений. Растворы, используемые в заявляемом способе, ус 3 6179 1 тойчивы в течение длительного времени (до 2 месяцев) и оптическая плотность контрольных растворов на их основе практически не изменяется. Источники информации 1., 1966. - . 16. - . 200-205. 2.., 1965. - . 46. - . 1-5. 3. . . . . 1. ., 1972. - . 9. - . 113-116. 4. . . ., 1970. -13. -3. - . 577-579. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4