Способ повышения вирулентности стафилококков

12 13/00,1/20// 12 144 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ВИРУЛЕНТНОСТИ СТАФИЛОКОККОВ(71) Заявитель Государственное высшее учебное учреждение Гродненский государственный медицинский университет(72) Авторы Кажина Мария Владимировна Позняк Станислав Брониславович Овчинников Владимир Алексеевич Требухина Раиса Васильевна Ракуть Виталий Степанович(73) Патентообладатель Государственное высшее учебное учреждение Гродненский государственный медицинский университет(57) Способ повышения вирулентности стафилококков, заключающийся в том, что выделенные из больных стафилококкииоблучают трижды с интервалом в одну неделю ионизирующим излучением дозой 0,25 Гр.(56)93029701 1, 1996.95101414 1, 1997.2074256 1, 1997.1717630 1, 1992.5665581 , 1997. Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии (иммунологии,вакцинотерапии), и может быть использовано при аутовакцинотерапии больных хроническими воспалительными заболеваниями. Задача изобретения - создание способа, направленного на усиление иммуногенности стафилококковой аутовакцины. Поставленная задача решается путем усиления вирулентности стафилококков, которая достигается путем 3-кратного облучения с интервалом в одну неделю ионизирующим облучением дозой 0,25 Гр. Способ осуществляют следующим образом. У больных хроническими воспалительными заболеваниями внутренних половых органов стерильным тампоном производят забор отделяемого влагалища и цервикального канала и делают посев материала на специальные питательные среды. Колонии, проявляющие типичные для стафилококков культуральные и морфологические свойства, выделяют в чистой культуре, наращивают массу на скошенном мясопептонном агаре и делают смыв микробной взвеси по оптическому эталону 2 млрд. микробных тел в 1 мл. Микробную взвесь трижды с интервалом в неделю подвергают облучению на 5006 1 установке АГАТ-РМ (источник Со 60, мощность дозы 0,0106296 Гр/с). Разовая доза - 0,25 Гр. Общая доза - 0,75 Гр. Через 24 ч после облучения делают отсев на специальные пластинчатые среды (кровяной, желточно-солевой агары) для определения гемолизина,лецитиназной и плазмокоагулирующей активности. Чувствительность культурк антибиотикам определяют при помощи индикаторных дисков. Для количественной характеристики антибиотикорезистентности штаммов в каждой эконише был использован показатель МР-маркер резистентности - зона задержки роста в мм. Приводим пример, подтверждающий возможность использования предлагаемого способа. В табл. 1 представлена чувствительностьк антибиотикам до и после облучения их в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю 3-кратно. Общая доза облучения 0,75 Гр. Из табл. 1 видно, чтобез облучения наиболее чувствителен к левомицетину, неомицину и цефалексину. Зона задержки роста соответственно 28-21-20 мм. После 3-го облучения микроб снизил свою чувствительность к большинству из исследуемых антибиотиков. Полная резистентность развилась к левомицетину, ампициллину,карбенициллину и цефалексину. В табл. 2 представлена чувствительностьк антибиотикам до и после облучения их в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю 3-кратно. Общая доза облучения 0,75 Гр. Из табл. 2 видно, что укартина наблюдалась сходная с. Микроб приобрел полную резистентность к ампициллину,карбенициллину и цефалексину. В табл. 3 представлены факторы агрессии стафилококков после 3-кратного их облучения в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю. Из табл. 3 видно, что после 3-кратного облучения активировались факторы агрессии(гемолизин, лецитиназа, коагулаза) уи появились ранее отсутствующие у. Таким образом, заявляемый способ усиления вирулентности микробов для получения иммуногенной аутовакцины действительно является эффективным, доступным для выполнения в любом специализированном лечебном заведении, а также экономически целесообразным. 5006 1 Чувствительностьк антибиотикам до и после облучения их в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю 3-кратно. Общая доза облучения 0,75 Гр Воздействие Антибиотики и зоны задержки роста (мм) облучение Левомицет Стрептоми Доксицикл Карбеници Тетрациклин Неомицин Полимиксин Ампициллин Цефалексин ин цин ин ллин Без облучения(прототип) 28 16 18 21 11 14 15 14 20 1-е облучение 15 15 18 17 11 10 12 12 15 Без облучения 30 22 20 20 16 13 15 20 20 2-е облучение 0 15 11 20 16 0 13 0 0 Без облучения 25 17 16 20 11 12 16 15 20 3-е облучение 0 15 13 20 10 0 12 0 0 Таблица 2 Чувствительностьк антибиотикам до и после облучения их в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю 3-кратно. Общая доза облучения 0,75 Гр Воздействие Антибиотики и зоны задержки роста (мм) облучение Левомицет Стрептоми Доксицикл Карбеници Тетрациклин Неомицин Полимиксин Ампициллин Цефалексин ин цин ин ллин Без облучения 5006 1 Таблица 3 Факторы агрессии стафилококков после 3-кратного их облучения в дозах 0,25 Гр 1 раз в неделю Штаммы микроорганизмов Гемолизин Лецитиназа Плазмокоагулазабез облучения Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4