Способ консервирования биоткани для протезирования клапанов сердца и сосудов

(51)01 1/02 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ БИОТКАНИ ДЛЯ ПРОТЕЗИРОВАНИЯ КЛАПАНОВ СЕРДЦА И СОСУДОВ(72) Авторы Чеснов Юрий Михайлович Швед Михаил Михайлович Станишевский Леонид Станиславович(57) Способ консервирования биоткани для протезирования клапанов сердца и сосудов,включающий обработку биоткани 5 раствором диглицидилового эфира этиленгликоля,отличающийся тем, что обработку проводят поэтапно, при этом сначала биоткань обрабатывают диэтиловым эфиром в течение 5-10 мин, затем помещают ее в 70 раствор этилового спирта и воздействуют ультразвуком с частотой 37 кГц в течение 5-10 мин, после чего биоткань помещают в смесь 5 растворов диглицидилового эфира этиленгликоля и диметилформамида, приготовленную на основе боратно-спиртового буфера с рН 9,0,выдерживают в течение 7-21 дня при температуре 20-38 С без доступа света и хранение осуществляют в 30 растворе диметилсульфоксида с рН 5,5, содержащем гепарин в концентрации 200 МЕ/мл, при этом перед каждым этапом обработки биоткань отмывают в дистиллированной воде или стерильном физиологическом растворе. Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии сердца и сосудов и может быть использовано при приготовлении биопротезов для протезирования и пластики клапанов сердца, сосудов, дефектов сердечных перегородок и перикарда. Наиболее близким к изобретению является способ консервирования биоткани, включающий обработку биоткани 5 раствором диглицидилового эфира этиленгликоля с последующей обработкой раствором гепарина с концентрацией не менее 100 МЕ/мл 1. Недостатком данного способа является высокая кальцификация и тромбогенность биопротезов. Задачей изобретения является улучшение функциональных показателей биопротезов. Эта задача решается путем достижения технического результата - подавления процессов кальцификации и тромбообразования на биоткани путем очищения ткани до создания девитализированной коллагеновой матрицы, повышения эффективности и степени фиксации коллагена, улучшения условий обработки, хранения и имплантации биопротезов. 8118 1 2006.06.30 Указанный технический результат достигается тем, что в способе консервирования биоткани для протезирования клапанов сердца и сосудов, включающем обработку биоткани 5 раствором диглицидилового эфира этиленгликоля, согласно изобретению, обработку проводят поэтапно, при этом сначала биоткань обрабатывают диэтиловым эфиром в течение 5-10 мин, затем помещают ее в 70 раствор этилового спирта и воздействуют ультразвуком с частотой 37 кГц в течение 5-10 мин, после чего биоткань помещают в смесь 5 растворов диглицидилового эфира этиленгликоля и диметилформамида,приготовленную на основе боратно-спиртового буфера с рН 9,0, выдерживают в течение 7-21 дня при температуре 20-38 С без доступа света и хранение осуществляют в 30 растворе диметилсульфоксида с рН 5,5, содержащем гепарин в концентрации 200 МЕ/мл,при этом перед каждым этапом обработки биоткань отмывают в дистиллированной воде или стерильном физиологическом растворе. Способ осуществляют следующим образом. Взятый от свежезабитых животных очищенный и отмытый от крови биоматериал (перикард, артерии, вены) обрабатывают диэтиловым эфиром в течение 5-10 мин, затем помещают в 70 раствор этилового спирта и подвергают ультразвуковой обработке с частотой 37 кГц в течение 5-10 мин. После чего помещают биоматериал в смесь 5 растворов диглицидилового эфира этиленгликоля и диметилформамида, приготовленную на основе боратно-спиртового буфера с рН 9,0, и выдерживают в течение 7-21 суток при температуре 20-38 С без доступа света и хранение осуществляют в 30 растворе диметилсульфоксида с рН 5,5, содержащем гепарин в концентрации 200 МЕ/мл, при этом перед каждым этапом обработки биоткань отмывают в дистиллированной воде или стерильном физиологическом растворе. Примеры выполнения способа. Пример 1 100 г биологической ткани (4-5 сегментов внутренней грудной артерии или пластины перикарда крупного рогатого скота), взятой от свежезабитых животных, очищенной и отмытой от крови, погружают в емкость со 100 диэтиловым эфиром на 10 мин, отмывают в дистиллированной воде, помещают в ванночку с 70 этиловым спиртом и подвергают воздействию ультразвука с частотой 37 кГц в течение 10 мин. После этого этапа все манипуляции осуществляют в асептических условиях. Биоматериал вновь отмывают стерильным физиологическим раствором и погружают в 200 мл консервирующего раствора,содержащего 5 раствор диглицидилового эфира этиленгликоля с 5 раствором диметилформамида на основе боратно-спиртового буфера с рН 9,0, при температуре 38 С, где биоткань консервировалась в течение 7 суток. Обработанный материал отмывают от фиксирующего раствора и переносят в 30 раствор диметилсульфоксида с рН 5,5, содержащий гепарин с концентрацией 200 МЕ/мл, где и хранят биоткань до имплантации. Пример 2 80 г створок аортальных клапанов, взятых от свежезабитых свиней, обработанных,очищенных от детрита, жировой и мышечной ткани и отмытых от крови, погружают в емкость с диэтиловым эфиром на 5 мин, отмывают в дистиллированной воде, помещают в ванночку с 70 этиловым спиртом и подвергают воздействию ультразвука с частотой 37 кГц в течение 5 мин. После этого этапа все манипуляции осуществляют в асептических условиях. Биоматериал вновь отмывают стерильным физиологическим раствором и погружают на 21 день в 200 мл консервирующего раствора 5 раствора диглицидилового эфира этиленгликоля с 5 раствором диметилформамида на основе боратно-спиртового буфера с рН 9,0 и температуре 20 С. Обработанный материал отмывают от фиксирующего раствора стерильным физиологическим раствором и переносят в транспортный 30 раствор диметилсульфоксида с рН 5,5, содержащий гепарин с концентрацией 200 МЕ/мл,где биоткань хранится до имплантации. 8118 1 2006.06.30 Эффективность данного способа получения чистой коллагеновой матрицы была исследована с помощью световой и электронной микроскопии. Было доказано, что биологическая ткань после обработки полностью сохраняет свою коллагеновую и эластическую структуру. Таким образом, этапная обработка материала эфиром, этанолом, ультразвуком позволяет создать чистую бесклеточную коллагеновую матрицу, практически не содержащую возможных источников - ядер кальцификации. Использование боратно-спиртового буфера с добавлением диметилформамида позволяет существенно повысить эффективность и стабильность сшивки коллагена и, соответственно, температуру денатурации до 82 С. Источники информации 1.2008767 1, 1994. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3