Способ диагностики хронической гипергликемии

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОЙ ГИПЕРГЛИКЕМИИ(71) Заявители Государственное научное учреждение Институт физики им. Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси,Государственное учреждение Научноисследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии(73) Патентообладатели Государственное научное учреждение Институт физики им. Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси,Государственное учреждение Научно-исследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии(57) Способ диагностики хронической гипергликемии путем спектрофотометрического анализа крови, отличающийся тем, что измеряют спектры диффузного отражения и пропускания слоя цельной крови в диапазоне длин волн 600-1000 нм, рассчитывают коэффициенты поглощения крови К в указанном диапазоне длин волн по аналитическим формулам для многократно рассеянного света в слабопоглощающей среде, определяют относительные концентрации основных форм гемоглобина и его производных, по ним восстанавливают относительные коэффициенты поглощения крови К, вычисляют условный параметрпо формуле и при значениибольше 0,2 диагностируют наличие хронической гипергликемии. Изобретение относится к спектрофотометрии крови и может быть использовано для диагностики в медицине. Наиболее близким по технической сути является способ определения процентного содержания гликозилированного гемоглобина НвА 1 в образцах цельной крови. Способ основан на одновременном фотометрировании Нв и НвА 1 с в образцах цельной крови больных, а также в двух стандартных растворах с известным содержанием Нв и НвА 1 с. В состав реагентов стандартных растворов и тестируемых образцов добавляют адсорбент. После измерения величины оптической плотности стандартных растворов и тестируемых образцов лизатов цельной крови содержание НвА 1 рассчитывают по предлагаемой формуле. К недостаткам данного способа относится длительная стадия пробоподготовки образца (до 30 мин) - аналог 1. Другие аналоги определения гликозилированного гемоглобина неизвестны. Задача изобретения - упрощение способа и увеличение скорости определения гликозилированных соединений для диагностики и мониторинга сахарного диабета. Поставленная задача достигается тем, что спектрофотометрически измеряют коэффициенты диффузного отраженияи пропускания Т слоя цельной крови толщиной 1 в диапазоне 600-1000 нм, после чего по методике расчета для многократно рассеянного света в слабопоглощающей среде находят коэффициенты поглощения крови в указанном диапазоне длин волн, а затем, путем вычитания из экспериментально измеренного спектра поглощения образца крови теоретически восстановленного, находят условный параметри при значениибольше 0,2 диагностируют ретроспективно наличие хронической гипергликемии. Для измерения коэффициентов диффузного пропускания и отражения в интервале 600-1000 нм используют спектрофотометр, оснащенный фотометрическим шаром. По экспериментально измеренным данным находят физическую величину - коэффициент поглощения К, используя аналитические формулы для многократно рассеянного света в слабопоглощающей среде где 1 и А 2 - коэффициенты, которые учитывают полное внутреннее отражение на границе кровь-стекловоздух в переднюю и заднюю полусферы. В выбранном диапазоне длин волн (600-1000 нм) поглощение крови представляет собой сумму поглощений ее хромофоров. В первом приближении достаточно ограничиться наличием основных форм гемоглобина окси-, деокси-, метгемоглобина. По известным миллимолярным коэффициентам производных гемоглобина восстанавливают относительный ход теоретического спектра поглощения крови Кпо формуле К - коэффициент поглощения,где С - концентрация общего гемоглобина образца крови- относительные концентрации производных гемоглобина- миллимолярные коэффициенты производных гемоглобина 2 4845 1- число производных гемоглобина. Известно, что при сахарном диабете содержание гликозилированных соединений в крови, как ретроспективный показатель хронической гипергликемии, превышает свой нормальный уровень. Поэтому после вычитания из экспериментально полученного спектра поглощения К теоретически восстановленного К получаем условный параметр , который коррелирует в ИК-диапазоне с наличием в крови минорных фракций гемоглобина, а именно гликозилированных соединений( ) Прибольше 0,2 диагностируют ретроспективно наличие хронической гипергликемии. Этот параметр измерялся для больных сахарным диабетом, группы здоровых и больных другими заболеваниями, у которых сахарный диабет не диагностирован. Фигура демонстрирует правомочность предложенного способа с достоверностью 80 . Пример. Образец гепаринизированной венозной крови помещают в герметичную кювету толщиной более 0,2 см,которую устанавливают в кюветное отделение спектрофотометра, оснащенного фотометрическим шаром. Измеряют коэффициенты диффузного отражения и пропускания в спектральном диапазоне (600-1000 нм). По выше приведенным формулам рассчитывают спектр коэффициента поглощения крови К, который используют для нахождения относительных концентраций окси-, деокси-, мет- гемоглобина. Восстанавливают относительный ход теоретического спектра поглощения крови К. Затем рассчитывают параметр . Еслибольше 0,2, диагностируют наличие хронической гипергликемии. По сравнению с прототипом заявляемый способ обладает следующими преимуществами позволяет быстро (около 3 мин) диагностировать наличие хронической гипергликемии способ достаточно прост и не требует длительной пробоподготовки и применения химических реагентов. Источники информации 1. Патент 4649122 США, МПК 401 33/72, НКИ 436/67, 1987. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66. 3