Способ моделирования ожога печени при лапароскопической холецистэктомии

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОЖОГА ПЕЧЕНИ ПРИ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКОЙ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ(71) Заявитель Государственное высшее учебное учреждение Гродненский государственный медицинский университет(73) Патентообладатель Государственное высшее учебное учреждение Гродненский государственный медицинский университет(57) Способ моделирования ожога печени при лапароскопической холецистэктомии, включающий формирование у экспериментальных животных интраоперационного ожога печени монополярной электрокоагуляцией, отличающийся тем, что ожог наносят на этапе отделения желчного пузыря от ложа и гемостазе ложа монополярной электрокоагуляцией с рабочей частотой, выходной мощностью, площадью электрода, используемыми при лапароскопической холецистэктомии. Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно экспериментальной хирургии и может использоваться для апробирования и оценки эффективности методов лечения и профилактики ожога печени. В настоящее время существует необходимость в макро- и микроскопическом, гистохимическом и клиническом изучении ожога печени монополярной коагуляцией при отделении пузыря от его ложа и гемостазе ложа при лапароскопической холецистэктомии. Это возможно только в эксперименте на животных. Однако применение лапароскопической аппаратуры по своим параметрам на животных невозможно из-за несоответствия размеров. Наиболее близким к заявляемому является способ моделирования повреждения печени электроножом в режиме резания 1. Животным под общим обезболиванием производят краевую резекцию участка печени. Микроскопическое изучение печени производят на 1, 3, 4, 5, 7, 9-12, 18, 24, 30-е сутки после операции. Недостатком известного способа является его неинформативность в отношении изучения ожога печени при лапароскопической холецистэктомии. Задача изобретения - создание информативной модели, позволяющей изучить процессы, происходящие в месте ожога печени при отделении желчного пузыря от ложа и гемостазе ложа при лапароскопической холецистэктомии. Поставленная задача достигается путем удаления желчного пузыря у экспериментального животного монополярной коагуляцией в режиме, применяемом при лапароскопической холецистэктомии. При этом не производится резекция целого участка печени, как в прототипе, что позволяет изучать процессы, происходящие именно в области ложа желчного пузыря, где, как известно, ткань печени имеет структурные отличия от других участков. Кроме того, при удалении желчного пузыря монополярной коагуляцией в режиме, применяемом при ЛХЭ, ожог печени экспериментального животного (кролика) соответствует ожогу, получае 4690 1 мому при проведении ЛХЭ у человека, в то время как в прототипе ожог печени производится в режиме резания, который значительно интенсивнее, и кроме того, в прототипе травма печени получается намного значительнее. Все это позволяет возможным считать предлагаемую модель информативной для изучения процессов, происходящих в месте ожога печени при ЛХЭ. Способ осуществляют следующим образом. Под внутривенным наркозом (Гексенал 50 мг/кг) после премедикации (Димедрол 1- 1 мл внутримышечно) производят верхне-срединную лапаротомию, осуществляют гемостаз. Пузырную артерию и пузырный проток выделяют, лигируют капроном, пересекают. Для этого используют аппарат для высокочастотной хирургии ЭН-53 М. Характеристики используемого режима взяты из паспорта прибора, используемый режим соответствует режиму работы электрохирургического блока фирмы , применяемого в клинике при лапароскопической холецистэктомии. Морфологическое и гистохимическое исследование производят на 3, 5, 7 и 30 сутки в связи с тем, что на 3-и сутки после повреждения печени процессы альтерации достигают максимума за счет того, что к первичной альтерации присоединяется вторичная (ишемия поврежденной зоны и прилежащих участков за счет стазов и тромбозов микрососудистого русла, активация ПОЛ, выход протеолитических ферментов из поврежденных гепатоцитов) на 5-е и 7-е сутки отслеживают динамику репаративных процессов на 30-е сутки отслеживают завершающий этап регенерации поврежденного участка печени. Приводим пример, подтверждающий возможность использования предлагаемого способа. Пример 1. 10 беспородным кроликам (самцам и самкам), сходным по возрасту и весу (средний вес 3600 г) производят открытую холецистэктомию. Выделение желчного пузыря и гемостаз ложа производят аппаратом ЭН 57 М, используемый режим идентичен применяемому при лапароскопической холецистэктомии электрохирургическому блоку. Кроликов выводят из опыта на 3, 5, 7 и 30-е сутки. При макроскопическом исследовании ложе желчного пузыря спаяно со стенкой желудка, 12-перстной кишкой и большим сальником рыхлыми спайками. Участок ожога печени в области ложа желчного пузыря при снятии спаек желтовато-серого цвета,эластичной консистенции, видимая глубина повреждений до 15 мм. Для морфологического и гистохимического исследования забирали кусочки печени из ложа желчного пузыря и интактной печени. При микроскопическом исследовании на 3 сутки капсула печени в области проекции желчного пузыря покрыта фибринозным наложением. В области ожога капсула печени отечна с круглоклеточной умеренно выраженной инфильтрацией. Печеночная ткань в субкапсулярной зоне ложа в состоянии некроза представлена контурами печеночных балок, гепатоциты которых не содержат ядер. Имеются комплексы сохранившихся печеночных клеток по ходу триад и вокруг более крупных желчных протоков. Вдоль границы зоны некроза и печеночной ткани имеется умеренно выраженная круглоклеточная инфильтрация. Гепатоциты, расположенные на границе с зоной некроза, набухшие, часть их не содержит ядер, а другая часть гепатоцитов имеет бледноокрашенные округлые крупные ядра. Цитоплазма печеночных клеток пенистая вакуолизированная. При морфологическом исследовании на 5 сутки процесс претерпевает некоторые качественные изменения, которые выражаются образованием грануляционной ткани, расположенной в области ложа желчного пузыря и на границе зоны некроза с тканью печени. Грануляционная ткань представлена кровеносными капиллярами и клеточными элементами. Отмечается также активация как междольковой, так и внутридольковой соединительной ткани с началом формирования ложных долек печени в области некроза. На 7 сутки регенераторный процесс окончательно не завершен, так как у всех экспериментальных животных наблюдались очаги некроза печеночной ткани, однако грануляционная ткань более зрелая с наличием соединительно-тканных волокон. Таким образом, к 7 дню у экспериментальных животных наблюдается в месте повреждения незаконченный регенераторный процесс по типу субституции. На криостатных срезах проводят гистохимические реакции по выделению активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), глюкоза-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-Ф) и кислой фосфатазы КФ(Г). Проведенные исследования показали, что активность исследованных ферментов статистически достоверно изменяется в отдельных группах так, уровень СДГ снижается до 68 на 5 сутки по сравнению с интактной печенью, активность ЛДГ составляет на 5 и 7 сутки соответственно 79 и 83 от контроля. Активность Г-6-Ф увеличилась на 7-е сутки и достигает 115 . Активность КФ значительно снижена во всех группах и достигает на 3 сутки 42 , на 5-е - 41 , на 7-е - 70 от контроля. Из вышеизложенного видно, что ожог печени электрокоагуляцией при лапароскопической холецистэктомии изменяет метаболизм гепатоцитов в области оперативного вмешательства и отображает классические фазы воспалительного процесса. Таким образом, предлагаемая модель действительно позволяет изучать процессы, происходящие в месте ожога печени при отделении желчного пузыря от ложа и гемостазе ложа при лапароскопической холецистэктомии. Преимуществом предлагаемого способа по сравнению с прототипом является возможность оценить процессы, происходящие в печени после лапароскопической холецистэктомии. Кроме того, предлагаемый способ позволяет разработать и экспериментально оценить необходимые способы лечения и профилактики. 2 4690 1 Источники информации Галанкин В.Н. и др. Архив патологии. - 1979,5. - С. 49-55. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.