Препарат для иммунокоррекции у животных

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ИММУНОКОРРЕКЦИИ У ЖИВОТНЫХ(71) Заявитель Зайцева Алеся Владимировна(72) Автор Зайцева Алеся Владимировна(73) Патентообладатель Зайцева Алеся Владимировна(57) Препарат для иммунокоррекции у животных, отличающийся тем, что содержит 1,0 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий в качестве иммуномодулятора и 2,0 -ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 кД при следующем соотношении компонентов, мас.2,0 -ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 кД 2,5-12,5 1,0 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий 87,5-97,5. Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии, а именно к способу получения иммуностимулятора из соматических антигенов сальмонеллезных или колибактериозных бактерий и хитозана. Известны способы получения биологически активных препаратов 1, 8. Широко известны способы получения иммуностимулирующих препаратов из компонентов бактериальных клеток детоксицированного липополисахарида из нейсерий 1 липополисахарид из биомассы авирулентного штамма .выделяют вводно-фенольной экстракцией при температуре 65 С по способу . , .8 и очищают гельфильтрацией на сефадексе -200 3 липополисахарид получают путем экстракции бактерий трихлоруксусной кислотой 5 липополисахарид из биомассы .штамма 475 выделяют по методу .. 7 и очищают путем трехкратного пересаждения и дальнейшего центрифугирования при 15000 д в течение 2 ч 6 соматический антиген из биомассы . - 4 полисахаридный антиген из сальмонелл 2 14663 1 2011.08.30 Наиболее близким техническим решением к предлагаемому изобретению является способ получения биологически активного препарата из сальмонелл 3. Согласно описанному методу биомассу сальмонелл обрабатывают ацетоном, а полисахаридный антиген экстрагируют аммиаком и смешивают с тиосульфатом натрия. Однако полученный препарат обладает высокой токсичностью и низкой биологической активностью. Задача изобретения - увеличение биологической активности целевого продукта и снижение его токсичности. Поставленная цель достигается тем, что 1 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий в соотношении 17-139 смешивают с 2 -ным раствором хитозана 20-100 . Сущность изобретения. Препарат для иммунокоррекции у животных, отличающийся тем, что содержит 1,0 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий в качестве иммуномодулятора и 2,0 -ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 при следующем соотношении компонентов, мас.2,0 -ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-1002,5-12,5 1,0 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий 87,5-97,5. Для оценки биологической активности препараты, изготовленные разными методами,в дозе 0,2 см 3 вводили подкожно белым мышам через 24 часа после их инфицирования культурой рожистых бактерий матрикса Конева. Для испытания каждого препарата использовали по 10 мышей. Контрольной группе мышей препарат не вводили. Учет выживаемости мышей осуществляли через 8 часов в течение 15 суток. Все испытуемые препараты при внутрибрюшинном введении в дозе 0,5 см белым мышам не вызывали заболеваемость и гибель животных в течение 10 суток наблюдения. Было установлено, что в контрольной группе все белые мыши погибали в течение 4-7 суток. Пример 1 (прототип) Сальмонеллезные бактерии выращивают на питательной среде, содержащей в качестве белковой основы водный и кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки,а в качестве стимулятора роста - щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови животных. Полученную биомассу бактерий отделяют от культуральной жидкости путем центрифугирования. Биомассу сальмонелл инкубируют в ацетоне в течение 24 часов при температуре 4 С и соотношении ингредиентов 13. Биомассу отделяют от ацетона, ресуспендируют в 1 -ном растворе аммиака. Щелочной гидролиз осуществляют при температуре 105 С в течение 60 минут. Экстракт центрифугируют, а в полученный гидролизат добавляют до 0,5 тиосульфата натрия. Через 10 суток после инфицирования рожистыми бактериями выживаемость мышей составила 50 . Пример 2 2,0 -ный раствор хитозана 80 смешивали с 1,0 -ным раствором О-соматических антигенов сальмонелл в соотношении 139. Выживаемость мышей составила 90 . Пример 3 2,0 -ный раствор хитозана 80 смешивали с 1,0 -ным раствором О-соматических антигенов сальмонелл в соотношении 135. Выживаемость мышей составила 90 . Пример 4 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но использовали 0,9 -ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл и 1,9 -ный раствор хитозана 80 . Выживаемость мышей составила 60 . Пример 5 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но использовали 1,0 -ный раствор О-соматических антигенов эшерихий. Выживаемость мышей составила 90 . 2 14663 1 2011.08.30 Пример 6 3,0 -ный раствор хитозана 80 смешивали с 2,0 -ным раствором О-соматических антигенов сальмонелл в соотношении 139. Выживаемость мышей составила 50 . Пример 7 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 использовали хитозан 100 . Выживаемость мышей составила 90 . Пример 8 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 использовали хитозан 20 . Выживаемость мышей составила 90 . Пример 9 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 использовали хитозан 15 . Выживаемость мышей составила 50 . Пример 10 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 использовали хитозан 120 . Выживаемость мышей составила 40 . Пример 11 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 17. Выживаемость мышей составила 90 . Пример 12 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 149. Выживаемость мышей составила 50 . Пример 13 Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 16. Выживаемость мышей составила 40 . Из представленных материалов видно, что для изготовления препарата 2 -ый раствор хитозана 20-100 и 1,0 -ый раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий следует смешивать в соотношении 17-139. Препарат защищает 90 животных, инфицированных рожистыми бактериями. Иммуномодулятор, приготовленный согласно параметрам, указанным в формуле изобретения, по биологической активности в 1,5-1,8 раза выше, чем препараты, изготовленные при других условиях. Источники информации 1. Лазарева Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. - М. Медицина, 1985. - С. 15. 2. Патент РБ 7787, МПК 61 35/74, 39/112, 2006. 3. Протективная активность детоксицированного липополисахаридасерогруппы А в опытах/ А.А. Дельвич и др. // Журнал микробиология. 1989. -5. - С. 70. 4. Татаренко Т.М. Проблемы особоопасных инфекций / Т.М. Татаренко, С.М. Дальвадяну, Е.Э. Бахрах. - Саратов, 1972. - Вып. 3 (25). - С. 93-98. 5..,. // . . - 1993. - . 144. - . 307-310. 6..,.,.. // . . . - 1985. - . 151. . 399-404. 7. // . . . - 1965. - . 5. - . 92-95. 8.., . // . . . - 1965. - . 5. - . 83-91. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3