Средство для подавления размножения вируса простого герпеса I типа в культуре клеток

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СРЕДСТВО ДЛЯ ПОДАВЛЕНИЯ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИРУСА ПРОСТОГО ГЕРПЕСАТИПА В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК(71) Заявители Учреждение Белорусского государственного университета Научно-исследовательский институт физико-химических проблем Государственное учреждение Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(72) Авторы Бореко Евгений Иванович Павлова Наталья Ильинична Повалишев Владимир Николаевич Полозов Генрих Иванович Савинова Ольга Владимировна Шадыро Олег Иосифович(73) Патентообладатели Учреждение Белорусского государственного университета Научно-исследовательский институт физико-химических проблем Государственное учреждение Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Министерства здравоохранения Республики Беларусь в качестве средства для подавления размножения вируса простого герпесатипа в культуре клеток. Изобретение относится к медицине, в частности к вирусологии, и может быть использовано при подавлении размножения вирусов герпеса. Известны противогерпетические свойства препарата 4,6-ди-трет-бутил-2-фениламинофенола 1 Задачей изобретения является расширение ассортимента средств, обладающих противовирусным действием. Поставленная задача достигается применением для подавления размножения вирусов герпеса ранее известного соединения 5-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-она Заявляемое соединение 5-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-он описано в литературе 3. Авторами обнаружены неочевидные свойства, позволившие применить его в качестве соединения для подавления размножения вирусов герпеса. Свойство заявляемого соединения подтверждается примером. При проведении испытаний с вирусом герпеса простоготипа (ВГП-1, штамм 1 С) используют линию клеток рабдомиосаркомы человека . Монослойную культуру клеток , выращенную во флаконах, отмывают от ростовой среды, инфицируют 0,01-0,001 ТЦД 50/клетка вирусом путем нанесения на клетки разведения вируссодержащей суспензии в объеме 0,1 мл на 1 ч при 37 С. Затем жидкость удаляют и клетки покрывают средой поддержки (среда 199), содержащей различные концентрации исследуемых веществ. После 48 ч инкубации при 37 С регистрируют морфологические изменения монослоя клеток(цитопатическое действие (ЦПД) вируса, увеличение 80). Находят минимальную концентрацию соединений, подавляющую развитие ЦПД вируса на 50(ЕС 50). Критерием противовирусного действия считают наличие различий в сравнении с контролем вируса. Максимальную переносимую концентрацию (МПК) изучаемого вещества определяют как его максимальную концентрацию с отсутствием морфологических изменений неинфицированных клетокпосле 48 ч инкубации. Отношение МПК/ЕС 50 показывает диапазон нетоксических концентраций с антивирусным действием (таблица). 12612 1 2009.12.30 Противовирусные свойства заявляемого вещества Разность с Концентрация заявляемого Титр вируса ,ЕС 50,контролем,вещества, мкг/млТЦИД 50/мл мкг/млТЦИД 50/мл 12,5 3 2 6,2 3 2 1,48 3,1 3,00,26 1,21 1,6 3,840,28 0,37 0 4,210,13 Как видно, 5-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-он обладает вирусингибирующими свойствами в отношении вируса герпеса простого в достаточно широком диапазоне концентраций, не токсичных для культуры клеток. Максимально достигаемое снижение титра вируса в сравнении с контролем при этом превышает 2 ТЦД 50/мл (99 ). Таким образом, заявляемое решение позволяет решить поставленную задачу. Применение 5-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-она приводит к выраженному ингибированию репродукции вируса герпеса простого и высокой эффективности при экспериментальной герпетической инфекции лабораторных животных. Заявляемое решение может быть использовано в лабораторной практике для ингибирования репродукции вируса герпеса простого и редукции вызываемых им заболеваний в настоящий момент. Для использования 5-гидрокси-1,3-бензоксатиол-2-она в качестве субстанции нового противовирусного лекарственного средства требуется разработка лекарственной формы, проведение лабораторных и клинических испытаний эффективности и безвредности. Источники информации 1. Патент 6594, МПК 61 31/05,61 31/22. 2. Патент 6506, МПК 61 31/16, 31/22. 3. , -5,32-. . . ., 1968. - . 33. -12. - 4426-4431. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3