Способ моделирования бактериальной язвы роговицы у кролика

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЯЗВЫ РОГОВИЦЫ У КРОЛИКА(71) Заявитель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(72) Авторы Волкович Татьяна Казимировна Самсонова Инна Васильевна(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(57) Способ моделирования бактериальной язвы роговицы у кролика в эксперименте, отличающийся тем, что выполняют послойную трепанацию роговицы трепаном диаметром 5 мм в пределах 1/3 глубины стромы, после чего вводят в конъюнктивальный мешок бактериив виде суспензии в стерильном физиологическом растворе. Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано для создания экспериментальной модели бактериального кератита, изучения вопросов патогенеза воспалительного процесса роговицы и разработке новых подходов консервативного и хирургического лечения. В литературе описан способ создания модели бактериальной язвы роговицы путем интрастромального введения 20 мкл бактериальной суспензии с помощью иглы 30-гейдж 1. Однако предлагаемый способ не позволяет стандартизировать модель, так как при интрастромальном введении сложно контролировать глубину проникновения иглы и равномерное распространение суспензии между роговичными пластинами, а течение заболевания клинически не соответствует развитию воспалительного процесса у человека. Задачей изобретения является разработка способа, позволяющего смоделировать бактериальную язву роговицы, которая по клиническим и морфологическим признакам приближалась бы к таковой у человека. Техническим результатом предлагаемого изобретения является получение бактериальной язвы с вовлечением в воспалительный процесс эпителия и стромы роговицы, перилимбальной сосудистой сети, радужки и цилиарного тела, по клиническому течению приближающейся к таковой у человека. Данная задача достигается выполнением послойной трепанации роговицы и инфицированием ее бактериальной суспензией. Способ осуществляется следующим образом. 16186 1 2012.08.30 Кроликам для общей анестезии внутривенно вводят нембутал 30 мг/кг массы тела. Для местной анестезии в конъюнктивальную полость инстиллируют 2 -ный раствор лидокаина. Веки разводят векорасширителем. В оптической зоне роговицы выполняют послойную трепанацию роговицы трепаном 5 мм до 1/3 толщины стромы. Далее поврежденную роговицу инфицируют путем инстилляции в конъюнктивальный мешок бактериальной суспензии лабораторного штамма 6538-р (ГНИИ им. Тарасевича, г. Москва). Живую культуру предварительно разводят стерильным физиологическим раствором до 3 Ед , что соответствует 9 млрд микробных тел на 1 см 3. Для заражения поврежденной поверхности роговицы используют 1 мл бактериальной суспензии. Экспериментальная модель отработана на 25 кроликах. Клиническое наблюдение проводили ежедневно. Фоторегистрацию объективного осмотра выполняли с помощью цифровой фотокамеры . На 1-е, 3-и, 7-е, 14-е и 30-е сутки после повреждения и инфицирования роговицы животных выводили из эксперимента путем введения летальной дозы нембутала, извлекали глазные яблоки для последующего гистологического исследования. Гистологические препараты окрашивали гематоксилин-эозином и по методу Ван Гизон. Микроскопию выполняли при увеличении 100, 200, 400 и 1000. Клинически заболевание протекало одинаково у всех экспериментальных животных и характеризовалось стадийностью изменений от воспалительных, дистрофических и язвенно-воспалительных в ранние (1, 3, 7 сутки) сроки до склеротических в более поздние (14,30 сутки). Клинические признаки бактериальной язвы (сужение глазной щели, гиперемия и отек век, обильное гнойное отделяемое, выраженная смешанная гиперемия конъюнктивы и небольшой ее хемоз (больше в нижнем сегменте), отек роговицы, более выраженный вокруг воспалительного очага, язвенный дефект в оптической зоне с инфильтрированными краями, рыхлым дном, заполненным детритом, помутнение влаги передней камеры,гипопион 1-2 мм, отек радужки) и их изменение в динамике коррелировали с морфологическими проявлениями (воспалительная инфильтрация, дистрофические, некробиотические и некротические изменения, пролиферация, склероз). Таким образом, предлагаемый способ позволяет создать экспериментальную модель бактериальной язвы, по клиническому течению и гистологическим изменениям приближающейся к таковой у человека. Данная модель может быть использована для дальнейшего изучения вопросов патогенеза воспалительного процесса в роговице и разработке новых подходов консервативного и хирургического лечения. Источники информации 1./ Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.