Способ ингибирования в эксперименте роста асцитной карциномы Эрлиха, привитой мыши

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ РОСТА АСЦИТНОЙ КАРЦИНОМЫ ЭРЛИХА, ПРИВИТОЙ МЫШИ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр эпидемиологии и микробиологии(72) Авторы Хмара Марк Ефимович Дракина Светлана Алексеевна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии(56)2343195 2, 2009.а 20080890, 2010. ЕА 4929 В 1, 2004. ИЛЬИНСКАЯ О.Н. и др. Молекулярная биология. - 2005. - Т. 39. -1. - С. 1-11. КРАСКОВСКИЙ Г.В. и др. Актуальные вопросы иммунологии и аллергологии. Материалысъезда Белорусского научного общества иммунологов и аллергологов. Белый ветер, 2000. - С. 179-181. ХМАРА М.Е. и др. Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии. Материалы Международной конференции. Минск, 2004. - С. 260. ХМАРА М.Е. Антивирусные и физикохимические свойства макромолекулярного комплекса, получаемого с помощью панкреатической рибонуклеазы из лизата инфицированных клеток. Автореферат диссертации. - М., 1985. - С. 7-11.(57) Способ ингибирования в эксперименте роста асцитной карциномы Эрлиха, привитой мыши, при котором проводят иммунизацию мыши супернатантом гидролизата опухолевых клеток, полученным разведением клеток асцитной карциномы Эрлиха средой Игла из расчета 600000-800000 кл./мл, гидролизом их панкреатической рибонуклеазой, взятой из расчета 3 мг/мл, при 95-100 С в течение 10-15 минут, охлаждением при комнатной температуре и центрифугированием при 10000 об/мин в течение 15 минут, при этом супернатант вводят внутрибрюшинно в количестве 0,5 мл через день в течение 30 суток, начиная со вторых суток после прививки указанной карциномы. Изобретение относится к иммунологии, медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения злокачественных опухолей у млекопитающих. Известен способ ингибирования роста опухоли у млекопитающего, включающий стадию введения млекопитающему эффективного количества ДНК-вакцины, вызывающей иммунную реакцию. ДНК-вакцина предназначена для активации иммунного ответа против раковых клеток и содержит конструкцию ДНК, операбельно кодирующую белок сурвивин и цитокин 21, встроенные в аттенуированный вектор 1. Недостатком известного способа является трудоемкость конструирования вакцины,связанная со сложными молекулярно-биологическими методиками, направленными на получение иммуноактивного генного продукта. 15970 1 2012.06.30 Задача изобретения - разработка эффективного способа ингибирования опухолевого роста с использованием доступного официального препарата путем иммунизации животных. Результат достигается в способе ингибирования в эксперименте роста асцитной карциномы Эрлиха, привитой мыши, при котором проводят иммунизацию мыши супернатантом гидролизата опухолевых клеток, полученным разведением клеток асцитной карциномы Эрлиха средой Игла из расчета 600000-800000 кл./мл, гидролизом их панкреатической рибонуклеазой, взятой из расчета 3 мг/мл, при 95-100 С в течение 10-15 минут, охлаждением при комнатной температуре и центрифугированием при 10000 об/мин в течение 15 минут,при этом супернатант вводят внутрибрюшинно в количестве 0,5 мл через день в течение 30 суток, начиная со вторых суток после прививки указанной карциномы. Панкреатическая рибонуклеаза является медицинским препаратом и используется для лечения вирусных заболеваний. Производитель Самсон-Мед, Санкт-Петербург. Супернатант гидролизата опухолевых клеток получают путем разведения асцитных клеток карциномы Эрлиха со средой Игла из расчета 600000-800000 клеток на 1 мл. Затем с целью гидролиза добавляют панкреатическую рибонуклеазу из расчета 3 мг фермента на 1 мл и подвергают термической обработке при температуре 95-100 С в течение 10-15 минут. Выдерживают при комнатной температуре до охлаждения и центрифугируют при 10000 об/мин в течение 15 минут. Супернатант отбирают в стерильных условиях и используют для иммунизации млекопитающих. Предлагаемый способ ингибирования опухолевых клеток проводят следующим образом. Асцитную карциному Эрлиха прививают мышам подкожно по 0,2 мл из расчета 3106 клеток на 1 мл. Через сутки мышам в опытной группе внутрибрюшинно вводят с целью иммунизации супернатант гидролизата в количестве 0,5 мл. Такую процедуру повторяют 14 раз в течение 30 дней (через день). В контрольной группе вместо супернатанта вводят среду Игла. На 31-й день мышей забивают, извлекают опухоли и взвешивают. Результаты представлены в таблице. Как видно из представленных данных, иммунизация при помощи супернатанта гидролизата, полученного из асцитной карциномы Эрлиха, существенно тормозит рост опухоли. Полученный в условиях высокотемпературного режима стерильный супернатант гидролизата в дальнейшем может быть применен в онкологических клиниках с целью стимуляции иммунного ответа на опухоли различной локализации. Характеристика опухолевого роста у мышей в опыте и контроле Вес опухоли в граммах Опыт (супернатант гидролизата) (7) Контроль (среда Игла) (7) 1,6 5,5 2,4 3,9 1,36 2,6 0 3,7 0 4,2 1,43 4,0 0,72 4,3 1,0720,11 4,0290,2- достоверность различий опыта и контроля Р 0,001. Источники информации 1. Патент РФ 2343195, МПК 12 15/12,61 48/00, 2009. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.