Способ коррекции оксидантного стресса в остром периоде ишемического инсульта

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ОКСИДАНТНОГО СТРЕССА В ОСТРОМ ПЕРИОДЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр неврологии и нейрохирургии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(72) Авторы Нечипуренко Наталия Ивановна Щербина Наталья Юрьевна Сидорович Эмилия Константиновна Хомиченко Татьяна Васильевна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр неврологии и нейрохирургии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(56) МЕЗЕН Н.И. // Медицинский журнал. 2006. -3. - С. 63-65. СУСЛИНА З.А. и др. // Неврологический журнал. - 2007. - Т. 12. -4. - С. 4-8. ЩЕРБИНА Н.Ю. // Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия медицинских наук. - 2008. -3. - С. 85-90.(57) Способ коррекции оксидантного стресса в остром периоде ишемического инсульта,включающий введение пациенту антиоксидантного препарата, отличающийся тем, что в качестве антиоксидантного препарата используют 20-25 -ный раствор сульфата магния,10 мл которого разводят физиологическим раствором и вводят внутривенно капельно ежедневно в течение 10-12 дней. Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может найти применение при лечении больных в остром периоде ишемического инсульта (ИИ). Ишемический инсульт является гетерогенным заболеванием с комплексной патофизиологией. Основными этапами ишемического патобиохимического каскада являются истощение внутриклеточных депо АТФ, глутаматная эксайтотоксичность, активациярецепторов, приводящая к увеличению внутриклеточной концентрации ионов кальция,гиперпродукция свободных радикалов, приводящая к развитию оксидантного стресса 1. Под оксидантным стрессом понимается нарушение равновесия между образованием свободных радикалов и активностью антиоксидантных систем организма, которое выражается в увеличении уровня прооксидантных маркеров и/или снижении факторов антиоксидантной защиты 2, 3, 4. Поскольку при восстановлении кровотока в ишемизированных тканях мозга образуется значительно большее количество свободных радикалов, чем при ишемии, антиоксидантная защита всегда будет важной составляющей терапии инсульта 5. Антиоксидантные стратегии лечения заключаются в 1) ингибировании гиперпродукции свободных радикалов,2) уборке свободных радикалов,3) увеличении разрушения свободных радикалов и их токсичных продуктов посредством активации антиоксидантных механизмов, в частности, с использованием веществмиметиков эндогенных антиоксидантных ферментов 5. 16256 1 2012.08.30 Соответственно, антиоксидантным эффектом при оценке действия лекарства будут являться следующие критерии увеличение факторов антиоксидантной защиты и/или снижение уровня повышенных прооксидантных маркеров, отражающих содержание свободных радикалов, либо ингибирование роста прооксидантных маркеров. Особо следует указать на значимость активации антиоксидантного фермента глутатионпероксидазы (ГП) при инсульте. В экспериментальных исследованиях на модели фокальной ишемии головного мозга у крыс было показано, что ГП защищала головной мозг в значительно большей степени, нежели другие основные ферменты антиоксидантной системы - супероксиддисмутаза и каталаза или их комбинация 6. У мышей с повышенной экспрессией ГП существенно уменьшались размеры очага инфаркта и отек мозга после моделирования фокальной ишемии/реперфузии по сравнению с диким типом животных 2, 7, 8. И наоборот, у мышей, лишенных гена ГП, наблюдалось увеличение размера очага инфаркта головного мозга 6, 9. При моделированииишемии на срезах гиппокампа крыс увеличение уровня свободных радикалов происходило только при ингибировании ГП 10. У больных острым инсультом увеличение активности ГП коррелировало с оценкой неврологического статуса по шкале при поступлении и через 7 дней после инсульта (чем выше активность ГП, тем меньше неврологический дефицит) 11, 12. О значимости этого фермента при инсульте свидетельствуют продолжающиеся клинические испытанияфазы эбселена ( ), синтетического миметика ГП, улучшающего клинический исход при инсульте //. ./. Несмотря на достаточно широкое применение антиоксидантов, эффект их воздействия зависит от обширности и тяжести поражения мозга, состояния мозговой гемодинамики,наличия сопутствующих заболеваний, кроме того, различные антиоксиданты действуют на различные звенья про-антиоксидантной системы организма, поэтому применение антиоксидантов и их сочетания требует уточнения и детализации 13. Известен способ коррекции оксидантного стресса у больных в остром периоде ИИ при помощи антиоксиданта эмоксипина 14. Однако, по данным литературы, действие эмоксипина на про-антиоксидантную систему неоднозначно, в частности, при черепномозговой травме в эксперименте он вызывал увеличение уровня диеновых конъюгатов одного из показателей прооксидантных процессов в организме 15. Задачей изобретения является разработка более эффективного способа коррекции оксидантного стресса у больных с инфарктом мозга в остром периоде заболевания. С этой целью мы исследовали влияние введения сульфата магния на про-антиоксидантный баланс крови. На сегодняшний день сульфат магния может использоваться у пациентов с ишемическим инсультом как средство первичной нейропротекции, являющееся неконкурентным ингибиторомрецепторов, в качестве антиоксиданта его действие не исследовано 16, 14. Сущность изобретения заключается в том, что в способе коррекции оксидантного стресса в остром периоде ишемического инсульта, включающем введение пациенту антиоксидантного препарата, отличием является то, что в качестве антиоксиданта используют 20-25 -ный раствор сульфата магния, 10 мл которого вводят на физиологическом растворе внутривенно капельно ежедневно в течение 10-12 дней. Технический результат - повышение эффективности коррекции оксидантного стресса с ингибированием роста уровня прооксидантных маркеров и увеличением активности антиоксидантной системы в результате замены эмоксипина на сульфат магния. Изобретение используют следующим образом. Пациентам на фоне базисной терапии (БТ) инсульта, включающей мероприятия, направленные на поддержание жизненно важных функций организма нормализация кислотноосновного баланса, дыхания, сердечной деятельности, предотвращение отека головного мозга, антиагрегантную, антикоагулянтную терапию, ноотропы (пирацетам) и др., вводят 2 16256 1 2012.08.30 10 мл 20-25 -ного раствора сульфата магния внутривенно капельно на физиологическом растворе в течение 10-12 дней ежедневно. Эффективность использования изобретения подтверждается следующими исследованиями. На базе 3-го неврологического отделения 5 ГКБ нами было проведена оценка оксидантного стресса у 46 пациентов в остром периоде инфаркта мозга в системе каротидных артерий при лечении сульфатом магния и эмоксипином. Все больные получали базисную терапию (БТ) инсульта. Начиная с первого дня после дебюта инсульта и в течение последующих 10-12 дней 17 пациентов дополнительно к БТ ежедневно получали по 10 мл 25 ного либо 20 -ного раствора сульфата магния внутривенно капельно на физиологическом растворе, остальным 29 больным дополнительно к БТ ежедневно внутривенно вводили по 10 мл 1 -ного раствора эмоксипина. Кровь для исследования брали утром натощак из кубитальной вены в начале и конце лечения (1-2-е и 12-15-е сутки). В качестве маркеров оксидантного стресса в крови исследовали показатели перекисного окисления липидов(ПОЛ) - диеновые конъюгаты (ДК), малоновый диальдегид (МДА), о работе антиоксидантной системы судили по активности антиоксидантного фермента глутатионпероксидазы (ГП), прооксидантный сдвиг оценивали по прооксидантному индексу (ДК/ГП). Содержание ДК измеряли в плазме крови по поглощению в области 232-234 нм после разделения в гептан-изопропанольной смеси 17, уровень МДА определяли в сыворотке по реакции с тиобарбитуровой кислотой методом 18. Активность ГП измеряли в эритроцитах методом 19. Индекс ДК/ГП рассчитывали (концентрация ДК/активность ГП)100. Полученные данные обработаны с помощью статистической программы 6.0. Для оценки результатов лечения проводили анализ внутри каждой группы с помощью критерия Вилкоксона 20. Различия считали статистически значимыми при 0,05. Нами было оценено влияние различных способов лечения на динамику изменения про-антиоксидантных показателей в ходе этого лечения (в начале и конце терапии). Данные исследования состояния процессов ПОЛ и АОС крови у больных представлены в таблице. Показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы крови у больных с инфарктом мозга Критерий Показатель 1-2-е сутки 12-15-е сутки Вилкоксона Базисная терапияэмоксипин (29) 1,43 1,90 ДК, опт. ед/ мл 0,000(1,29-2,12) Примечание. Данные представлены в виде медианы (интервал между 25-75 процентилями),- различия статистически значимы у больных между 1-2-ми и 12-15-ми сутками по критерию Вилкоксона. 3 16256 1 2012.08.30 У пациентов группы, получавшей на фоне БТ эмоксипин, к 12-15-м суткам статистически значимо повышалось количество ДК и снижалось содержание МДА в крови(0,0000,032 соответственно). Уровень активности ГП эритроцитов у этих больных на протяжении курса лечения не изменялся. Прооксидантный индекс, отражающий про- и антиоксидантный баланс, статистически значимо возрастал (0,04), демонстрируя превалирование прооксидантных процессов над антиоксидантными. В группе, получавшей дополнительно к БТ сульфат магния, уровни ДК и МДА не изменялись к 12-15-м суткам после инсульта, а активность ГП увеличивалась (0,003). Отсутствие роста ДК, сопровождаемое повышением активности ГП, поддерживало про- и антиоксидантный баланс с тенденцией к преобладанию антиоксидантных процессов (некоторое снижение индекса ДК/ГП,0,11). Результаты исследования показали, что прием сульфата магния приводил к торможению роста ДК, индекса ДК/ГП, увеличивал активность ГП, что является признаком антиоксидантных сдвигов, по сравнению с группой пациентов, получавших базисную терапию плюс эмоксипин. Полученные данные позволяют предположить, что увеличение активности ГП препятствовало росту уровня ДК и тем самым не позволяло сдвигать про-антиоксидантный баланс в сторону превалирования прооксидантных процессов, что выражалось в отсутствии роста прооксидантного индекса ДК/ГП в данной группе. Таким образом, использование сульфата магния приводит к существенным антиоксидантным сдвигам в крови, выражавшимся в усилении активности ГП эритроцитов и ингибировании роста уровня ДК крови, индекса ДК/ГП, в отличие от пациентов, получавших эмоксипин. Это позволяет заключить, что коррекция оксидантного стресса сульфатом магния является более эффективной, нежели эмоксипином. Применение изобретения поясняется конкретными клиническими примерами. Клинический пример 1 Больная Н. 1949 г.р. (история болезни 3290/747) находилась в 3 неврологическом отделении 5-й клинической больницы с 22.05. по 12.06.02 г. с диагнозом инфаркт мозга в правом каротидном бассейне артерий, левосторонняя гемиплегия, острый период, атеросклероз сосудов головного мозга, артериальная гипертензия 3, риск 4, ИБС - атеросклеротический кардиосклероз Н-0, хр. пиелонефрит, обострение, ожирение 3 ст. Заболела остро, 22.05.02, когда на фоне повышения АД до кризовых цифр развился левосторонний гемипарез, отмечалась рвота. При поступлении жалобы не формулирует в связи с тяжестью состояния. Общее состояние тяжелое. В сознании, вяла, адинамична, заторможена. За молотком не следит,птоз ОД. Левосторонняя гемиплегия. Тонус в левых конечностях снижен. СПР СД. Патологических стопных рефлексов нет. МРТ головного мозга срединные структуры мозга не смещены, в проекции зрительного бугра справа в медиобазальных отделах височной области и ножки мозга справа определяется зона, гиперинтенсивная на Т 2 взвешенных изображениях. Заключение МРпризнаки ишемического инсульта в правом полушарии головного мозга. ЭКГ ритм синусовый 72 в мин, горизонтальное положение ЭОС. Показатели про- и антиоксидантной систем на 1-е сутки ДК - 1,62 опт.ед, МДА 5,67 нмоль/мл, ГП - 93,7 мкмоль мин-1 мл-1, ДК/ГП - 1,73 ед. Объективизация динамики неврологического статуса проведена по балльной шкале(Скандинавская) и составила до лечения 26 баллов. Лечение пирацетам, авамин, магнезия, оксамп, фуросемид, сармантол, гепарин, пентоксифеллин, эналоприл, ЛФК. За время лечения состояние с положительной динамикой наросла сила и объем движений в левых конечностях до 3 баллов. С поддержкой двигается в пределах палаты. Неврологический статус по Скандинавской шкале после лечения оценивается в 42 балла. Показатели про- и антиоксидантной систем на 13-е сутки ДК - 1,46 опт.ед, МДА 5,39 нмоль/мл, ГП - 110,0 мкмоль мин-1 мл-1, ДК/ГП - 1,33 ед. 4 16256 1 2012.08.30 Клинический пример 2 Больная Н. 1934 г.р. (история болезни 1143/239) находилась в 3 неврологическом отделении 5-й клинической больницы с 23.02. по 22.03.00 г. с диагнозом ишемический инсульт в правом каротидном бассейне артерий, при атеросклерозе сосудов головного мозга, гипертонической болезни, мерцательной аритмии, острый период. Левосторонняя гемиплегия, глазодвигательные нарушения. Гипертоническая болезнь-2, ИБС - атеросклеротический кардиосклероз, пароксизмальная мерцательная аритмия, Н-1, нефроангиосклероз в стадии ХПН, хр. бронхит. Заболела остро вечером 23.02.00, когда на фоне интенсивной головной боли упала из-за развившегося левостороннего гемипареза. Потери сознания не было, отмечалась рвота. Состояние ближе к средней тяжести. Р - 82, ритмичный, АД - 180/120. Неврологический статус в сознании, адекватна. Зрачки ДС, реакции на свет ослаблены. Частичный парез взора влево. Сглажена левая носогубная складка. Девиация языка влево. Умеренно выражены рефлексы орального автоматизма. В левой ноге плегия, глубокий парез левой руки. Минимальные движения в левом предплечье (до 1,5 балла). Мышечный тонус слева повышен по пирамидному типу. СПР ДС. Рефлекс Бабинского слева. Левосторонняя гемигипестезия с утратой суставно-мышечного чувства. Менингеальных четких знаков нет. КТ головного мозга в правой височно-теменной области зона пониженной плотности с неровным, нечетким контуром. Срединные структуры не смещены. Базальные цистерны,желудочки мозга расширены. Перивентрикулярное снижение плотности белого вещества головного мозга за счет явления ликараиозиса. Заключение ишемический инсульт в бассейне средней мозговой артерии справа. ЭКГ ритм синусовый. Неполная блокада правой ножки пучка Гиса. Показатели про- и антиоксидантной систем на 2-е сутки ДК - 2,09 опт.ед, МДА 8,16 нмоль/мл, ГП - 114 мкмоль мин-1 мл-1, ДК/ГП - 1,83 ед. Объективизация динамики неврологического статуса проведена по балльной шкале(Скандинавская) и составила до лечения 18 баллов. Лечение аспирин, сустонит, кристепин, энам, дигоксин, эуфиллин, пирацетам,эмоксипин, нимотоп, пенициллин, массаж левых конечностей. В результате лечения состояние со значительной положительной динамикой. При выписке сохраняется частичный парез взора влево. Наросла сила в левых конечностях в руке до 3,5 балла), минимальные движения в левой ноге (1-1,5 балла). Мышечный тонус слева повышен по пирамидному типу. СПР СД. Легкая левосторонняя гемигипестезия. Суставно-мышечное чувство в левых конечностях не утрачено. Неврологический статус по Скандинавской шкале после лечения оценивается в 35 баллов. Показатели про- и антиоксидантной систем после лечения ДК - 2,31 опт.ед, МДА 6,78 нмоль/мл, ГП - 94,6 мкмоль мин-1 мл-1, ДК/ГП - 2,43 ед. Таким образом, проведенные заявителем научные исследования по сравнению действия сульфата магния и антиоксиданта эмоксипина, в настоящее время широко применяющегося при лечении инсульта, показали преимущества и большую антиоксидантную эффективность сульфата магния, что дает возможность врачу воспользоваться более эффективной тактикой лечения больных в остром периоде ишемического инсульта и является существенным моментом в применении данного изобретения. Источники информации 1. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. - М., 2001. 2./ , //. . - 2005. - . 38. - . 1433-1444. 5. // . . - 2004. - . 51. - . 3. - . 157-161. 12./ . // . . . - 2004. - . 11. - . 5. . 501-506. 13. Суслина З.А., Максимова М.Ю., Федорова Т.Н. // Неврологический журнал. - 2007.4. - С.4-9. 14. Лихачев С.А., Астапенко А.В., Сидорович Э.К. и др. Диагностика и лечение инсульта Рекомендации МЗ РБ. - 2008. 15. Мезен Н.И. // Белорус. мед. журн. - 2006. - Т. 3. -17. - С. 63-65. 16..,.,.. // . . . - 2000. - . 294. - . 1-26. 17. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. // Лаб. дело. - 1983. -3. - С. 33-36. 18. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. // Вопр. мед. хим. - 1987. - Т. 33. С. 118- 122. 19. Гаврилова А.Р., Хмара Н.Ф. // Лабор. дело. - 1986. -12. - С. 721-724. 20. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер с англ. / С. Гланц. - Москва Практика, 1999. - 459 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 6