Устройство для получения сыворотки крови

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт порошковой металлургии(72) Авторы Цедик Лариса Владимировна Ильющенко Александр Федорович Шевченок Дмитрий Александрович Казбанов Владимир Владимирович Кардаполова Маргарита Анатольевна Бобровская Александра Ивановна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт порошковой металлургии(57) Устройство для получения сыворотки крови, содержащее пластиковую пробирку с разделительными гранулами, отличающееся тем, что гранулы имеют диаметр 2-4 мм и выполнены из высокопористого гемосовместимого композиционного материала с открытой пористостью 80-95 и размером пор 30-300 мкм. Изобретение относится к медицинской диагностике, а именно к получению сыворотки крови для последующего анализа, и может быть использовано при иммунохимических,биохимических, бактериологических и др. исследованиях. 18623 1 2014.10.30 Клиническая лабораторная диагностика патологических состояний организма базируется на анализе изменений биохимического состава и реологических характеристик крови. Важнейшим условием для определения точного количества диагностически важных веществ в клинико-лабораторных исследованиях являются время и эффективность отделения сыворотки, получение которой осуществляют только после коагуляции (образования сгустка) анализируемой пробы крови. Для клинической лабораторной диагностики используют множество устройств забора крови (пробирок вакуумного и открытого типов),изготавливаемых из различных материалов - модифицированных и адаптированных для конкретного применения пластиков и стекол. С наилучшей стороны при лабораторных гематологических исследованиях зарекомендовали себя стеклянные пробирки, обеспечивающие минимальное время коагуляции и высокую степень разделения компонентов. Стеклянные пробирки по-прежнему остаются золотым стандартом и контролем гематологических исследований. Использование пластмассовых пробирок предпочтительнее, так как они имеют меньший вес, лучше подходят для автоматических лабораторных систем, удобны при утилизации и безопасны для медперсонала, не могут вызвать повреждения кожных покровов,устойчивы к механическим воздействиям, что существенно снижает риск заражения персонала лабораторий гемоконтактными инфекциями. Вместе с тем, гидрофобная поверхность пластмассовых пробирок способствует гемолизу форменных элементов крови, их адсорбции на стенках, что приводит к увеличению времени коагуляции и получению недостоверных результатов лабораторных исследований. Поэтому для повышения эффективности свойств при обработке и разделении крови на составляющие и получения достоверных результатов лабораторных исследований в состав пластиков вводят различные модифицирующие вещества, на стенки пробирок наносят сухие активаторы, коагулянты или антикоагулянты, используют пробирки с двойными стенками (для поддержки стабильности буферных растворов). Так, производятся пробирки с различными монолитными и пористыми активаторами свертывания (оксид кремния, тромбин и др.) 1-3. С целью снижения адгезии клеток крови в состав покрытий или разделительных гранул вводят поверхностно-активные вещества - ионогенные и неионогенные синтетические полимеры. Известны пробирки, покрытые внутри силиконом, содержащим активатор свертывания 4. Силикон снижает адгезию клеток крови на стенки пробирки, а активатор свертывания ускоряет процесс получения сыворотки крови. Важным компонентом пробирок для забора и обработки крови является наличие разделительных компонентов-наполнителей, которые обеспечивают требуемую функциональность и эффективность, формируя разделительный барьер между кровью и отделяемым продуктом. Разделительные компоненты выполняют в форме гелей и монолитных полимерных или композитных гранул (диаметром 1,5-3 мм). Известны пробирки, содержащие активатор свертывания и разделительные гели 5, 6, а также с активатором свертывания, нанесенным на пластиковые разделительные гранулы 7. Ни одна из перечисленных выше компаний точный состав и параметры пористой структуры активаторов свертывания не указывает. Снижение времени выделения и качества сыворотки крови из анализируемой пробы при использовании пластиковых пробирок остается актуальной проблемой для лабораторных исследований, от способа решения которой зависит достоверность полученных результатов. Задачей предлагаемого изобретения является снижение времени разделения и увеличение степени выхода сыворотки из анализируемой пробы. Указанная задача решается тем, что устройство для получения сыворотки крови содержит пластиковую пробирку с разделительными гранулами, причем гранулы имеют диаметр 24 мм, выполнены из высокопористого гемосовместимого композиционного материала с открытой пористостью 80-95 с размером пор 30-300 мкм. 2 18623 1 2014.10.30 Использование разделительных гранул из высокопористого материала с открытой пористостью позволяет крови свободно заполнять пористое пространство и способствует снижению времени коагуляции за счет увеличения площади контактной поверхности. Сущность изобретения поясняется фиг. 1, где показан общий вид устройства для лабораторно-гематологического исследования сыворотки крови, и фиг. 2, на которой показана структура разделительной гранулы из гемосовместимого высокопористого композиционного материала. Устройство, показанное на фиг. 1, содержит пластиковую пробирку 1 с крышкой 2 и разделительные гранулы 3 диаметром 2-4 мм, выполненные из высокопористого гемосовместимого композиционного материала, например оксидной керамики, с открытой пористостью 80-95 с размером пор 30-300 мкм (фиг. 2). Анализ производится следующим образом. Внутрь пробирки 1 заливают анализируемую пробу, после чего закрывают крышкой 2. Затем пробирку аккуратно встряхивают для перемешивания компонентов и выдерживают при комнатной температуре 15 мин. После этого производят центрифугирование при стандартных режимах 1500 об/мин, 20 мин, в результате чего разделительные гранулы 3 из высокопористого гемосовместимого композитного материала занимают равновесное положение и формируют четкий барьер между разделяемыми компонентами, обеспечивая получение большего количества сыворотки требуемого качества. Данное устройства позволяет повысить качество анализа и создать более эффективную тест-систему обработки крови для клинических лабораторных исследований. Изобретение иллюстрируется следующим примером. Для получения сыворотки использовали венозную кровь человека, взятую без антикоагулянтов. Анализируемую пробу объемом 2,5 мл помещали в пробирки и отстаивали при комнатной температуре (15-20 С) до начала формирования кровяного сгустка, определяемого визуально. Для отделения сгустка от стенок пробирки тонкой стеклянной палочкой проводили по внутренним стенкам пробирки (по кругу) и центрифугировали на стандартном лабораторном оборудовании (1500 об/мин) в течение 20 мин. Полученную сыворотку переливали в эппендорфы объемом 0,2-0,3 мл и визуально по насечкам определяли ее объем, полученный из анализируемой пробы. В работе определяли 1) время образования сгустка 2) объем полученной сыворотки 3) степень гемолиза в сыворотке (по уровню ЛДГ- активности лактатдегидрогеназы). Для проведения сравнительных исследований были использованы пластиковые пробирки, выпускаемые РПУП АКАДЕМФАРМ НПЦ Институт фармакологии и биохимии, и 2 6 с активатором свертывания, полимерные разделительные гранулы п 6 и разделительные гранулы к на основе высокопористого гемосовместимого композиционного материала с открытой пористостью 82-85 в соответствии с предлагаемым изобретением. Количество помещаемых в пробирки дозируемых по объему разделительных гранул было одинаково. Для проведения сравнительных исследований было сформировано 4 группы 1 п - пластиковые пробирки 1 с полимерными разделительными гранулами п(2,5 мл,1) 1 к - пластиковая пробирка 1 с композитными разделительными гранулами к(2,5 мл,1) 2 п - пластиковые пробирки 2 с полимерными разделительными гранулами п(2,5 мл,1) 2 к - пластиковая пробирка 2 с композитными разделительными гранулами к(2,5 мл,1). Результаты сравнительных исследований представлены в таблице. Результаты сравнительных исследований Время образования сгуст- Объем сыворотки,Степень гемолиза ка, мин мл в сыворотке,8 20 1,0 182,8 8 10 1,1 180,1 12 30 0,9 182,4 10 20 1,1 181,5 В пробирках 1 и 2 с полимерными (индекс п) и композитными (индекс к) разделительными гранулами время начала образования кровяного сгустка составляет от 8 10 до 12 30 мин от 8 10 до 8 20 мин для пробирок 1, от 10 20 до 12 30 мин для пробирок 2. При использовании композитных разделительных гранул к время начала образования уменьшается на 10- 2 10 мин по сравнению с применением полимерных гранул п. В пробирках 1 и 2 с полимерными (индекс п) и композитными (индекс к) разделительными гранулами объем полученной сыворотки составляет от 0,9 до 1,1 мл от 1,0 до 1,1 мл для пробирок 1, от 0,9 до 1,1 мл для пробирок 2. При использовании композитных разделительных гранул к объем полученной сыворотки в исследуемых группах увеличивается на 0,1-0,2 мл по сравнению с применением полимерных гранул п. В пробирках 1 и 2 с полимерными (индекс п) и композитными (индекс к) разделительными гранулами степень гемолиза в сыворотке составляет от 180,1 до 182,8 от 180,1 до 182,8 для пробирок 1, от 181,5 до 182,4 для пробирок 2. При использовании композитных разделительных гранул к степень гемолиза в сыворотке в исследуемых группах уменьшается на 0,9-2,7 по сравнению с применением полимерных гранул п. Источники информации 1. .Электронный ресурс. - Режим доступа//.-./ // Дата доступа 23.11.11. 2.Электронный ресурс. - Режим доступа ////-/-/.47. Дата доступа 23.11.11. 3.4579828, 1986. 4...366668 Электронный ресурс. Режим доступа ////.366668. Дата доступа 23.11.11. 5...367381 Электронный ресурс. Режим доступа ////.367381. Дата доступа 23.11.11. 6. -..Электронный ресурс. Режим доступа //////0409 2014 Дата доступа 23.11.11. 7. Каталог инновационных проектов и разработок организаций Национальной академии наук Беларуси. Раздел 6.42 Технология пленочного покрытия пробирок для сбора и обработки крови и организация их серийного производства для клинико-диагностических исследований Электронный ресурс. Режим доступа //.//.257. Дата доступа 22.11.11. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5