Способ повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития при искусственном рыборазведении

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ РЫБ НА РАННИХ ЭТАПАХ РАЗВИТИЯ ПРИ ИСКУССТВЕННОМ РЫБОРАЗВЕДЕНИИ(71) Заявитель Республиканское дочернее унитарное предприятие Институт рыбного хозяйства Республиканского унитарного предприятия Научнопрактический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству(72) Авторы Хрипач Владимир Александрович Завадская Маргарита Ивановна Таразевич Елена Васильевна Семенов Андрей Петрович Сазанов Вадим Борисович Алексеева Алла Александровна Антончик Алексей Владимирович Дударенко Людмила Сергеевна Жабинский Владимир Николаевич(73) Патентообладатель Республиканское дочернее унитарное предприятие Институт рыбного хозяйства Республиканского унитарного предприятия Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству(57) Способ повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития при искусственном рыборазведении, отличающийся тем, что перед зарыблением бассейна личинки рыб по 67-200 тысяч помещают в 13-40 л воды, содержащей 10-7 мг/л 24-эпибрассинолида,при 6,8-7,0 и выдерживают 2-8 часов. Изобретение относится к рыбоводству, а именно к способам повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития, и как следствие этого повышение выхода сеголетков и может быть использовано при искусственном рыборазведении. Известен способ повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития, включающий выдерживание предличинок рыб в воде, содержащей биологически-активное соединение, до перехода на смешанное питание, причем в качестве биологически-активного соединения используют экстракт зоопланктона в концентрациях 3-50 мг/л 1. Этот способ требует времени и трудозатрат на выращивание зоопланктона, что требует дополнительных капиталловложений. Известен способ повышения жизнеспособности рыб на ранних стадиях развития, заключающийся в инкубации оплодотворенной икры в воде с биологически-активным со 16646 1 2012.12.30 единением, причем в качестве биологически-активного соединения используют водный раствор фосфорнокислого калия общей концентрацией 0,5-2,0 мг/л, при этом оплодотворенную икру выдерживают до начала стадии гаструляции, а личинок - до перехода их на активное питание 2. Однако этот способ сравнительно сложен. Известен способ повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития путем обработки икры и личинок раствором эпибрассинолида в концентрации его 10-7 мг/л в течение 3 мин 3. Этому способу также присущ недостаток, заключающийся в том, что обработка проводится слишком короткое время, что может привести к недостаточной эффективности действия действующего вещества. Задачей настоящего изобретения является повышение жизнеспособности рыб на ранних этапах развития и, как следствие, повышение выхода сеголетков. Поставленная задача достигается тем, что в способе повышения жизнеспособности рыб на ранних этапах развития при искусственном рыборазведении перед зарыблением бассейна личинки рыб по 67-200 тыс. помещают в 13-40 л воды, содержащей 10-7 мг/л 24 эпибрассинолида, при 6,8-7,0 и выдерживают 2-8 часов. Вышеприведенные показатели режимов способа являются оптимальными, а отклонения в ту или другую сторону приводят к ухудшению повышения жизнеспособности рыб. 24-Эпибрассинолид обладает высокой биологической активностью по сравнению с эпибрассинолидом за счет своей иной структуры и был впервые синтезирован в 1979 году,молекулярная формула 28486. Эпибрассинолид, применяемый в прототипе, идентичен с химической точки зрения 24-эпибрассинолиду, применяемому в заявленном изобретении. Вещество, имеющее природное происхождение, получено путем химического синтеза. 24-Эпибрассинолид является пространственным изомером (эпимером) природного фитогормона эпибрассинолида, и цифрой 24 указано положение заместителя при атоме углерода - С-24, по которому имеет место изомерия, отличающая 24-эпибрассинолид в заявленном изобретении от эпибрассинолида, используемого в прототипе 4. Использование 24-эпибрассинолида в отличие от эпибрассинолида, применяемого в прототипе, позволяет получать его исскуственным путем независимо от природных источников и условий, повышать жизнеспособность рыб на ранних этапах развития и, как следствие, повышать выход сеголетков и может применяться при искусственном рыборазведении. Кроме того, использование заранее приготовленного 96 -ного спиртового раствора 24-эпибрассинолида позволяет добиваться точного дозирования действующего вещества. Соблюдение 6,8-7,0 позволяет поддерживать наибольшую активность действующего вещества - 24-эпибрассинолида. Выдерживание в течение 2-8 часов в 13-40 л воды, содержащей 10-7 мг/л 24-эпибрассинолида, при 6,8-7,0 позволяет добиться нахождения рыб в достаточном для их дыхания объеме воды оптимальное для жизнеспособности рыб и действия 24-эпибрассинолида время. Пример 1 Предлагаемый способ осуществляется следующим способом. Для обработки рыб на ранних этапах развития раствором 24-эпибрассинолида готовят 96 -ный спиртовой раствор с содержанием действующего вещества - 24-эпибрассинолида из расчета рабочей концентрации действующего вещества 10-7 мг/л в 20 л среды обработки (воды). Обработку проводили в период транспортировки рыб на ранних этапах развития к месту зарыбления в среде с 6,8-7,0 на протяжении 2-8 часов в емкостях с плотностью посадки 67-200 тыс. рыб на 13-40 л воды, в которую перед загрузкой добавляют 1-3 мл маточного раствора 24-эпибрассинолида при температуре среды обработки 22 С. 2 16646 1 2012.12.30 Готовят маточный раствор 24-эпибрассинолидас концентрацией 0,1 мг/мл (100 мг/л) растворением 10 мг 24-эпибрассинолида в 100 мл спирта этилового ректификованного(ГОСТ 18300-87). Приготовление исходного маточного раствора и его разбавление до нужной концентрации не является сложным и трудоемким, может быть выполнено квалифицированным лаборантом и обеспечивает точную дозировку препарата. Для приготовления растворов необходимой концентрации (10-2, 10-4, 10-7 мг/л) для обработки личинок во время транспортировки в транспортную емкость на каждые 10 л воды добавляют 1 мл раствора ,илисоответственно. Приготовление маточных растворов 24-эпибрассинолида (-) представлено в табл. 1. Таблица 1 Номер Количество и номер Содержание Количество получаемого разбавляемого 24-эпибрассино- растворителя (этираствора раствора, мл лида, мг ловый спирт), мл Маточный растворМаточный раствор 1 мл маточного раствора 0,1 мл маточного раствора После создания в емкости концентрации 10-2, 10-4 или 10-7 мг/л 24-эпибрассинолида емкость накачивают кислородом, герметично закупоривают и начинают транспортировку к месту высадки. Контрольные емкости транспортировали без добавления 24-эпибрассинолида. На месте зарыбления воду с личинками из опытных и контрольных емкостей переливали в разные бассейны. Исходя из суммарного объема обрабатываемой рыбы на ранних этапах развития и воды конечная концентрация действующего вещества (24-эпибрассинолид) в общем объеме составляла 10-7 мг/л. Для того чтобы 24-эпибрассинолид действовал оптимальносреды, в которой проводится обработка, должна быть 6,8-7,0, поэтому для доведениядо нужного при большемв среду перед обработкой добавляли 70 уксусную кислоту из расчета 0,5 мл на 10 л воды. При несоблюдении вышеозначенных концентрации и количества уксусной кислоты достижение необходимогоневозможно. Уксусная кислота, используемая в данном способе, наиболее оптимальна для биологических систем и сред,поскольку остальные, особенно неорганические, кислоты в большей или меньшей степени обладают токсическим эффектом. На одну обработку загружают не более 200 тыс. рыб. После создания рабочей концентрации (10-7 мг/л) 24-эпибрассинолида в среде обработки (вода) емкости накачивают кислородом и герметично закупоривают и начинают транспортировку к месту высадки. В этот интервал времени происходит обработка. Такой временной интервал обработки(2-8 часов) выбран оптимальным, поскольку меньшее время действия вещества неэффективно, большее - приводит к резкому падению жизнеспособности рыб на ранних этапах развития. Выход сеголетков от трехсуточных заводских личинок составляет не менее 41-48 ,что на 15-17 выше нормативных требований. В качестве примера, показывающего эффективность данного способа, введены таблицы, отражающие влияние растворов 24-эпибрассинолида различных концентраций на повышение жизнестойкости личинок и выращенных из них сеголетков. Из-за очень маленького размера личинок растительноядных рыб и невозможности их подсчета после транспортировки об эффективности описанной обработки трехсуточных заводских личинок судят по выходу сеголетков, который составляет в среднем 45 для 3 16646 1 2012.12.30 белого амура и 44 для пестрого толстолобика, что в 2 раза превышает контрольные данные (табл. 2). Таблица 2 Влияние 24-эпибрассинолида на выживаемость сеголетков растительноядных рыб,выращенных из трехдневной личинки, обработанной в процессе транспортировки(Отд. Белоозерск, ОАО Опытный рыбхоз Селецвыростного пруда Пестрый толстолобик Посажено личинок,тыс. экз. 2 Как видно из табл. 2, выживаемость сеголетков в контроле для белого амура была немного выше 25 -ного норматива, для пестрого толстолобика - немного ниже. При обработке личинки 24-эпибрассинолидом во время транспортировки в концентрации 10-2 мг/л выживаемость пестрого толстолобика осталась на уровне контроля. В концентрации 10-7 мг/л 24-эпибрассинолид резко повысил выживаемость особей пестрого толстолобика до 36-72(в среднем не менее 44 ). Таким образом, прослеживается зависимость в исследованном интервале концентраций оптимальной концентрацией 24-эпибрассинолида для обработки личинок во время транспортировки является 10-7 мг/л. 4 16646 1 2012.12.30 Результаты гематологического исследования сеголетков (годовиков) белого амура и пестрого толстолобика, полученных из обработанных 24-эпибрассинолидом личинок,представлены в табл. 3. Таблица 3 Физиологические показатели сеголетков растительноядных рыб,обработанных 24-эпибрассинолидом Вид рыб Контроль 24-пибрассинолид, 10-7 мг/л Из табл. 3 видно, что у опытных рыб средняя масса и содержание общего белка несколько выше, чем в контроле, а содержание гемоглобина значительно выше. Следовательно, применение препарата способствует лучшей оснащенности крови дыхательным белком, содержащимся в эритроцитах. Количество гемоглобина служит важным диагностическим признаком, свидетельствующим о состоянии кроветворения и общем физиологическом состоянии. Содержание белка в пределах нормы (30-45 г/л) является благоприятным признаком, свидетельствующим о жизнестойкости организма, так как значительные потери белка могут привести к гибели рыбы. Как показывают данные табл. 2-3, обработка личинок растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида во время транспортировки способствовала значительному повышению их жизнестойкости в концентрации 10-7 мг/л. Положительное влияние 24 эпибрассинолида прослеживается при доращивании мальков до сеголетков. Преимущества предлагаемого способа повышения жизнестойкости растительноядных рыб на ранних стадиях развития очевидны. Способ незаменим при длительной транспортировке личинок к местам зарыбления. Способ отличается простотой, минимальным расходом препарата, обладающего экологической чистотой. Источники информации 1. А.с. ССС 1660645, МПК 501 61/00 // Бюл.25. - 07.07.91. 2. А.с.862874, МПК 301 61/00 // Бюл.34. - 15.09.81. 3. Егоров М.А. и др. // Рыбоводство и рыболовство. - 1998. -3-4. - С. 37-38 (прототип). 4. Хрипач В.А., Лахвич Ф.А., Жабинский В.Н. Брассиностероиды. - Мн. Наука и техника, 1993. - С. 159-166. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5