Способ повышения жизнеспособности частично дегенерированных эмбрионов крупного рогатого скота при криоконсервировании

01 1/02 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЧАСТИЧНО ДЕГЕНЕРИРОВАННЫХ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ КРИОКОНСЕРВИРОВАНИИ(71) Заявитель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Будевич Александр Иванович Павленя Александр Константинович Козел Александр Анатольевич(73) Патентообладатель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(57) Способ повышения жизнеспособности частично дегенерированных эмбрионов крупного рогатого скота при криоконсервировании, включающий криоконсервирование эмбрионов удовлетворительного качества и условно пригодных к эмбриопересадке в стандартной питательной среде с криопротектором, в которую дополнительно вводят тиамин в количестве 0,13-0,16 мкг/мл среды.(56)2142701 , 1990. Эрнст Л.К. и др. Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных. - М. ВО Агропромиздат, 1989. - С. 250-253. Прокофьев М.И. Регуляция размножения сельскохозяйственных животных. - Л. Наука, 1983. - С. 217-218.1486468, 1977. Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства. - Горки, 1996. - С. 132133.987941 1, 2000. Изобретение относится к животноводству, в частности к технологии трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных. Известен способ трансплантации, при котором помещенные в агар эмбрионы замораживают в среде ФБС, содержащей 20 фетальной сыворотки теленка и 10 раствора глицерина. Насыщение эмбрионов глицерином проводят трехступенчато при комнатной температуре (3,3 6,6 и 10 ) с выдержкой в каждом растворе по 10 мин. Эмбрионы в агаре после проводки переносят в пробирки размером 550 мм с содержанием замораживающей среды 0,3 мл и охлаждают со скоростью 1 С в мин до -4-5 С, вызывают искусственную кристаллизацию и после этого охлаждают со скоростью 0,3 С в мин до -35 С и затем переносят в жидкий азот. Оттаивают быстро в водяной бане при температуре 37 С. Оттаян 6133 1 ные эмбрионы помещают в среду с 10 -ным раствором глицерина. Удаляют криопротектор в 4 этапа (10, 7,5 5 и 2,5 ) по 10 мин в каждом растворе. После удаления криопротектора жизнеспособность эмбрионов определяют по морфологическим признакам 1. Однако выживаемость эмбрионов после замораживания и оттаивания, а также процент стельных реципиентов после эмбриотрансплантации остается низким. Задача изобретения - повышение выхода жизнеспособных эмбрионов с минимальными затратами труда. Сущность изобретения. Способ повышения жизнеспособности частично дегенерированных эмбрионов крупного рогатого скота при криоконсервировании, включающий криоконсервирование эмбрионов удовлетворительного качества и условно пригодных к эмбриопересадке в стандартной питательной среде с криопротектором, в которую дополнительно вводят тиамин в количестве 0,13-0,16 мкг/мл среды. Способ осуществляют следующим образом. В стандартную питательную среду с криоконсервантом помещают условно пригодные к пересадке эмбрионы, вносят тиамин в дозе 0,13-0,16 мкг/мл среды, замораживают, хранят и оттаивают. После чего по общепринятой методике проводят окончательную оценку биологических качеств эмбрионов. Пример. Для проверки эффективности способа был проведен научно-хозяйственный опыт по повышению жизнеспособности эмбрионов крупного рогатого скота чернопестрой породы. Извлечение, поиск и оценку качества зародышей, полученных от коровдоноров, осуществляли согласно общепринятым методикам в лаборатории. Было отобрано 64 эмбриона удовлетворительного качества, которые помещали в стандартную питательную среду Дюльбекко с 10 -ным раствором глицерина, куда дополнительно вводили 0,13-0,16 мкг тиамина на каждый мл криоконсерванта. Одновременно 67 аналогичных зародышей брали для контроля, замораживали в той же среде, но без тиамина. Криоконсервирование осуществляли на программном замораживателе ЭМБИ-К и хранили в течение 1 месяца. Результаты опыта приведены в таблице. Опытные эмбрионы Контроль Показатели БластоМорулы Бластоцисты Всего Морулы Всего цисты Оценено эмбрионов, шт. 28 36 64 31 36 67 Сохранность,9-32,1 9-52,8 28-43,8 4-12,9 7-19,4 11-16,4 Данные таблицы свидетельствуют о том, что при замораживании дегенерированных эмбрионов в стандартной среде их биологические качества после оттаивания довольно низкие, т.е. сохранность равна в среднем 16,4 . Добавление в криоконсервируемую среду тиамина позволило увеличить сохранность эмбрионов до 43,8 . При этом количество пригодных к пересадке бластоцист было выше на 33,4 по сравнению с контролем. Таким образом, использование предложенного способа позволяет увеличить количество пригодных к эмбриотрансплантации зародышей наиболее ценных в племенном отношении коров-доноров. Источники информации 1. Эрнст Л.К. и др. Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных. - М. ВО Агропромиздат, 1989. - С. 250-253. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.