Способ повышения жизнестойкости икры рыб

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЖИЗНЕСТОЙКОСТИ ИКРЫ РЫБ(71) Заявитель Республиканское дочернее унитарное предприятие Институт рыбного хозяйства Республиканского унитарного предприятия Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству(72) Авторы Хрипач Владимир Александрович Завадская Маргарита Ивановна Таразевич Елена Васильевна Семенов Андрей Петрович Сазанов Вадим Борисович Алексеева Алла Александровна Антончик Алексей Владимирович Дударенко Людмила Сергеевна Жабинский Владимир Николаевич(73) Патентообладатель Республиканское дочернее унитарное предприятие Институт рыбного хозяйства Республиканского унитарного предприятия Научнопрактический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству(57) Способ повышения жизнестойкости икры рыб, при котором оплодотворенную и обесклеенную икру после загрузки в аппарат для инкубации обрабатывают раствором 24-эпибрассинолида в концентрации 10-7 мг/л при 6,8-7,0 и температуре 20-24 С на протяжении 40-50 мин при постоянном перемешивании, затем в инкубационном аппарате устанавливают водообмен 4-5 л/мин и продолжают инкубацию. Изобретение относится к рыбоводству, а именно к способам повышения жизнестойкости икры рыб и, как следствие этого, повышения выхода личинок, и может быть использовано при искусственном рыборазведении. Известен способ повышения жизнестойкости икры и личинок рыб, предусматривающий обработку икры раствором биологически активного вещества, например витамином В 12 в количестве 0,4-1,0 мг/л воды, при этом обработку икры ведут однократно в течение 2-6 часов 1. Этот способ имеет недостаток, заключающийся в том, что необходимо сравнительно длительно - 2-6 часов - обрабатывать икру. Известен способ повышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб, заключающийся в выдерживании оплодотворенной икры в водном растворе биологически активных 13037 1 2010.04.30 веществ, например смеси -каротина, -токоферола, убихинона 10, пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно, при концентрации их в растворе 10-8-10-14 моля и в соотношении (0,2-2)(0,4-0,5)(0,5-2,5)(0,8-3)(0,6-1,5)(0,75-5,5), при этом выдерживание икры осуществляют в течение 10-60 мин 2. К недостаткам описанного способа относится сравнительно высокий процент выхода уродливых личинок при небольшом отклонении от заявленных соотношений биологически активных веществ, т.к. точного дозирования химических и биологически активных веществ в условиях рыбхозов достичь трудно, хотя этот способ короче по времени, чем предыдущий. Этот недостаток устранен в способе повышения жизнестойкости икры рыб путем обработки икры 24-эпибрассинолидом в концентрации 10-4-10-7 мг/л, когда вместе со спермой 24-эпибрассинолид попадал в емкости с икрой, где проводилось осеменение в течение 3 мин. Повторно раствор добавляли в суспензию ила, во время обесклеивания. Оплодотворение и обесклеивание проводилось по стандартной для осетровых технологии. Икру инкубировали в аппаратах Осетр по стандартной технологии 3. Этому способу также присущ недостаток, заключающийся в том, что обработка проводится слишком короткое время, что может привести к недостаточной эффективности действия, а увеличение этого периода невозможно, так как икра рыб (а особенно растительноядных) начинает задыхаться без достаточного объема воды. К тому же впитывающая способность икринок в этот период невелика, что может привести к несоблюдению точной дозировки. Задачей настоящего изобретения является повышение жизнестойкости икры рыб и,как следствие этого, повышение выхода личинок. Поставленная задача достигается тем, что в способе повышения жизнестойкости икры рыб, при котором оплодотворенную и обесклеенную икру после загрузки в аппарат для инкубации обрабатывают раствором 24-эпибрассинолида в концентрации 10-7 мг/л при 6,8-7,0 и температуре 20-24 С на протяжении 40-50 мин при постоянном перемешивании, затем в инкубационном аппарате устанавливают водообмен 4-5 л/мин и продолжают инкубацию. 24-Эпибрассинолид, применяемый в прототипе, идентичен с химической точки зрения 24-эпибрассинолиду, применяемому в заявленном изобретении. Вещество, имеющее природное происхождение, получено путем химического синтеза в ГНУ Институт биоорганической химии НАН Беларуси (единственном производителе 24-эпибрассинолида в странах СНГ). 24-Эпибрассинолид является пространственным изомером (эпимером) природного фитогормона эпибрассинолида, и цифрой 24 указано положение заместителя при атоме углерода - С-24, по которому имеет место изомерия, отличающая 24-эпибрассинолид в заявленном изобретении от 24-эпибрассинолида, используемого в прототипе. Использование 24-эпибрассинолида в отличие от 24-эпибрассинолида, применяемого в прототипе, позволяет повышать жизнестойкость икры рыб и, как следствие этого, повышать выход личинок и может применяться при искусственном рыборазведении. Соблюдение 6,8-7,0 позволяет поддерживать наибольшую активность действующего вещества - 24-эпибрассинолида. Постоянное перемешивание икры на протяжении периода обработки - 40-50 мин обеспечивает поддержание икры в состоянии на плаву и, как следствие этого, нормальное ее дыхание (в случае оседания икры на дно развивающиеся икринки начинают задыхаться и погибать), после чего устанавливают водообмен в инкубационном аппарате 4-5 л/мин, который совместно с температурой среды инкубации 2024 С обеспечивает повышение жизнестойкости икры рыб. 13037 1 2010.04.30 Совокупность заявляемых признаков позволяет добиться повышения жизнестойкости икры рыб по сравнению с контролем на 36 . Пример Готовят базовый раствор 24-эпибрассинолида с концентрацией 0,1 мг/мл (100 мг/л) растворением 10 мг 24-эпибрассинолида в 100 мл спирта этилового ректификованного(ГОСТ 18300-87). Приготовление рабочих растворови 24-эпибрассинолида представлено в табл. 1. Таблица 1 Номер получаемого раствора Рабочий растворРабочий раствор 1 мл раствора , содержащего 0,1 мг 24-эпибрассинолида, добавляют на каждые 10 л воды в инкубационном аппарате, получают концентрацию 0,01 мг/л (10-2 мг/л). 1 мл раствора , содержащего 0,001 мг 24-эпибрассинолида, добавляют на каждые 10 л воды в инкубационном аппарате, получают концентрацию 0,0001 мг/л (10-4 мг/л). 1 мл раствора , содержащего 0,000001 мг 24-эпибрассинолида, добавляют на каждые 10 л воды в инкубационном аппарате, получают концентрацию 0,0000001 мг/л(10-7 мг/л). Обработку икры проводят приводы в аппарате 6,8-7,0 и температуре 20-24 С на протяжении 40-50 мин при постоянном перемешивании. В этот период происходит интенсивное набухание икры, и она активно впитывает воду и растворенный в ней 24-эпибрассинолид. Указанный временной интервал является оптимальным для достижения эффекта и предотвращения задыхания икры. Необходимо, чтобы содержание растворенного в воде кислорода не падало ниже 7 мг/л. Нейтральныйсреды необходим для предотвращения деструкции фитогормона и потери активности, что может произойти при смещениив сторону щелочного. В один аппарат загружают около 500 тыс. икринок. После выдержки икры в растворах с добавлением 24-эпибрассинолида аппараты подсоединяют к водоподаче и устанавливают нормальный технологический водообмен 4-5 л/мин. Результаты обработки икры растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида представлены в табл. 2-4. Икру, полученную от каждой самки, делили на две равные части, одну из которых обрабатывали раствором 24-эпибрассинолида заданной концентрации(опыт), вторая часть служила контролем. Как видно из табл. 2, во всех случаях обработка икры растворами 24-эпибрассинолида оказывала положительный эффект на выход оплодотворенной икры через два часа количество жизнеспособной оплодотворенной икры составляло 88-96 в сравнении с 52-64 в контроле. Значительно повышался также выход личинок, особенно для пестрого толстолобика 37-54 в сравнении с нормативом 25 . Концентрация 10-7 мг/л была наиболее эффективной. 3 13037 1 2010.04.30 Таблица 2 Влияние обработки икры растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида на ее оплодотворяемость и выход личинок Самки Выход личинок Концентрация Оплодотворение,рабочего раство от оплодотвотыс. экз ра, мг/л ренной икры опыт контроль Пестрый толстолобик 10-2 96 52 166 42,1 В табл. 3 представлены результаты подращивания личинок пестрого толстолобика,полученных из икры, обработанной растворами 24-эпибрассинолида различной концентрации. Подращивание проводили в течение 20-22 суток в 6 экспериментальных прудах рыбхоза Вилейка и в 5 экспериментальных прудах рыббазы Птичь Минского района. Как видно из табл. 3, при всех концентрациях 24-эпибрассинолида наблюдается положительный эффект выживаемость мальков, полученных из обработанной икры, повышается в сравнении с контролем на 10-16 в рыбхозе Вилейка и на 14-24 на рыббазе Птичь. Концентрация 10-7 мг/л была наиболее эффективной. Таблица 3 Влияние обработки икры растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида на выживаемость мальков при подращивании Место проведения ипруда Кол-во посаКонцентрация 24 женных лиэпибрассинолида,чинок, тыс. мг/л экз. Рыбхоз Вилейка 100 10-4 100 10-4 100 10-2 100 10-2 100 10-7 100 контроль Рыббаза Птичь 20 10-2 20 10-4 20 10-4 20 10-7 20 контроль 4 13037 1 2010.04.30 Подрощенных мальков посадили на дальнейшее выращивание на рыббазе Птичь в 4 выростных пруда. Результаты выращивания сеголетков представлены в табл. 4. Таблица 4 Влияние обработки икры растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида на выживаемость сеголетков при подращивании мальковпруда Как видно из табл. 4, при всех концентрациях растворов 24-эпибрассинолида наблюдается положительный эффект, и выживаемость сеголетков, полученных из обработанной икры, повышается на 25,2-36,9 в сравнении с контролем. Концентрация 10-7 мг/л была наиболее эффективной. Таким образом, как показывают данные табл. 2-4, обработка икры растительноядных рыб растворами 24-эпибрассинолида способствовала повышению оплодотворяемости икры и повышению жизнестойкости рыб на ранних стадиях развития в указанном широком интервале концентраций, однако концентрация 10-7 мг/л была наиболее эффективной. На практике с экономической точки зрения целесообразным является применение наименьшей концентрации 10-7 мг/л, так как требуется меньший расход препарата. Преимущество предлагаемого способа повышения оплодотворяемости икры растительноядных рыб, повышения выхода личинок и жизнестойкости личинок, мальков и сеголетков при подращивании в сравнении с известными способами заключается в простоте приемов обработки икры, в низких рабочих дозах, в экологической чистоте и безвредности препарата и его высокой эффективности. Источники информации 1. А.с.1243667, МПК 401 61/00. Опубл. 15.07.86 // Бюл.26. 2. А.с.789063, МПК 301 61/00. Опубл. 23.12.80 // Бюл.47. 3. Влияние эпина на выживаемость русского осетра // Рыбоводство и рыболовство. 3-4.- 1998.- . 37-38 (прототип). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5