Способ стимуляции овуляции икры у самок линя Tinсa tinсa L., изъятых из разных экосистем, при проведении искусственного нереста

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ОВУЛЯЦИИ ИКРЫ У САМОК ЛИНЯ С С ., ИЗЪЯТЫХ ИЗ РАЗНЫХ ЭКОСИСТЕМ,ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ИСКУССТВЕННОГО НЕРЕСТА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси(72) Автор Слуквин Александр Михайлович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ стимуляции овуляции икры у самок линя., изъятых из разных водных экосистем, при проведении искусственного нереста, заключающийся в том, что самок выдерживают 3 дня при температуре воды 22-24 С, после чего осуществляют инъекцию суспензии карпового гипофиза, причем самкам, изъятым из пруда, инъекцию осуществляют в дозе 2 мг/кг массы тела, а через 24 часа - в дозе от 8 до 9 мг/кг массы тела, а самкам, изъятым из реки, озера или водохранилища, - однократно в дозе от 2 до 5 мг/кг массы тела. Изобретение относится к рыбоводству, в частности к биотехнологии проведения искусственного нереста различных видов рыб, и может быть использовано в инкубационных цехах рыбоводных и рыборазводных предприятий. Известен способ стимуляции овуляции икры у самок линя обыкновенного, предусматривающий однократную гормональную стимуляцию самок стероидным гормоном(синтетический аналог -) в дозе 5-20 микрограммов на 1 кг массы тела. Овуляция икры происходит при температуре воды 22-24 С за 24-30 часов 1. Этот способ имеет недостатки, заключающиеся в том, что для стимуляции овуляции икры применяется синтетический гормон, который вводится в широком диапазоне доз(минимальная и максимальные дозы отличаются в 4 раза), при котором можно допустить либо передозировку, либо недостаток гормона при введении, что может привести к тромбозу у самок или перезреванию икры. Кроме того, после инъекции гормона процесс овуляции икры в теле самок существенно растянут во времени, что требует частой проверки созревания самок, а, следовательно, к созданию стрессовой обстановки и травматизации 12340 1 2009.08.30 для рыб при отлове. Этот способ не учитывает особенности получения икры от самок, отловленных из разных водных экосистем. Существует также способ стимуляции овуляции икры у линя обыкновенного, предусматривающий однократную гормональную стимуляцию самок раствором стероидного гормонасинтетический аналог (-6) -в дозе 5 микрограммов на 1 кг массы тела. Овуляция икры происходит при температуре воды 22-23 С за 24-30 часов 2. Этот способ также имеет недостатки, заключающиеся в том, что используется чужеродный для рыб синтетический гормон, применяемый для млекопитающих, а процессы овуляции икры в теле самок существенно растянуты во времени, что требует частой проверки созревания самок и самцов, а, следовательно, к созданию стрессовой обстановки и травматизации для рыб, участвующих в искусственном нересте. Возможность передозировки или недостачи гормона также не исключена, что может привести к получению некачественных половых продуктов. При этом способе также не учитываются особенности получения икры от самок, отловленных из разных водных экосистем. Наиболее близким к предлагаемому способу является способ однократной гормональной стимуляции самок карповым гипофизом в дозе 2-5,0 мг на 1 кг массы тела, когда овуляция икры успешно проходит при температуре 22-24 С за 20 часов 3. Практика показала, что прототип способа стимуляции овуляции икры у самок линя имеет недостатки, заключающиеся в том, что на указанную дозу гипофиза хорошо реагируют только те самки линя, которые отловлены для проведения искусственного нереста из озер, рек и водохранилищ, и практически не реагируют самки линя из прудовых экосистем. Такая особенность прудовых самок линя связана, прежде всего, с большой пищевой конкуренцией линя с карпом в прудах при выращивании в поликультуре, а также с преобладанием в рационе искусственных кормов, существенно отличающихся от естественной пищи. На прудовых самок накладывает также негативный отпечаток и тот аспект, что период их зимовки в зимовальных прудах более растянут во времени (до пяти месяцев) в сравнении с популяциями линя из естественных водоемов (три месяца) и к тому же в зимовальных прудах, как правило, отсутствует естественная пища, которая в обилии присутствует и доступна для линя в естественных водоемах. Этим можно объяснить и тот факт, что навеска прудовых самок линя одинакового возраста ниже в сравнении с самками из рек, озер и водохранилищ, и у них менее выражены внешние половые признаки перед нерестом, чем у самок, взятых из естественных экосистем. Перечисленные недостатки прототипа и отсутствие дифференцированного подхода в получении икры от самок, отловленных из разных водных экосистем, может приводить к тромбозам у самок и перезреванию икры, а также к стрессу и травматизации самок при частых просмотрах рыб на зрелость икры. Задачей настоящего изобретения является повышение количества ( ) созревших самок из разных водных экосистем при проведении гормональных инъекций для получения качественной овулированной икры в необходимых количествах и в более ранние, чем при естественном нересте, сроки, а также предотвращение тромбоза у самок и перезревания овулированной икры при искусственном воспроизводстве линя. Поставленная задача достигается тем, что предложены эффективные дозы и кратность введения суспензии карпового гипофиза, вводимого самкам линя, отловленным из рек,озер, водохранилищ и прудов. Пример 1 Для стимуляции овуляции икры у речных самок линя были отловлены 4-5 годовики линя весом от 300 до 630 г. Самок выдерживали в инкубационном цехе в бассейнах 3 дня при температуре воды 22-24 С, а затем инъецировали суспензией карпового гипофиза в различных дозах. После инъецирования рыб рассаживали в разные бассейны, и через 20 часов был проведен контроль зрелости икры и на возможность ее отцеживания. 2 12340 1 2009.08.30 В табл. 1 представлены результаты инъекции суспензии карпового гипофиза в разных дозах самкам речного линя. Таблица 1 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок речного линя Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 0 (физиологический рас 8 0 0 твор) 1 8 1 12,5 2 8 4 50,0 3 8 4 50,0 4 8 5 62,5 5 8 6 75,0 6 8 3 37,5 7 8 2 25,0 8 8 1 12,5 9 8 1 12,5 Оптимальная доза суспензии карпового гипофиза для самок речного линя, позволяющая максимально индуцировать овуляцию икры и получать качественную икру, находится в диапазоне от 2 до 5 мг/кг массы рыбы. Пример 2 Для стимуляции овуляции икры у озерных производителей линя были отловлены 4-5 годовики линя весом от 380 до 690 г. Самок выдерживали в инкубационном цехе в бассейнах 3 дня при температуре воды 22-24 С, а затем инъецировали суспензией карпового гипофиза в различных дозах. После инъецирования рыб рассадили в разные бассейны, и через 20 часов был проведен контроль зрелости икры и на возможность ее отцеживания. В табл. 2 представлены результаты инъекции суспензии карпового гипофиза в разных дозах самкам озерного линя. Таблица 2 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок озерного линя Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 0 (физиологический рас 8 0 0 твор) 1 8 1 12,5 2 8 4 50,0 3 8 4 50,0 4 8 5 62,5 5 8 8 100,0 6 8 3 37,5 7 8 2 25,0 8 8 2 25,0 9 8 1 12,5 12340 1 2009.08.30 Оптимальная доза суспензии карпового гипофиза для самок озерного линя, позволяющая максимально индуцировать овуляцию икры и получать качественную икру, составила от 2 до 5 мг/кг массы рыбы. Пример 3 Для стимуляции овуляции икры у самок линя из водохранилищ были отловлены 4-5 годовики линя весом от 430 до 650 г. Самок выдерживали в инкубационном цехе в бассейнах 3 дня при температуре воды 22-24 С, а затем инъецировали суспензией карпового гипофиза в различных дозах. После инъецирования рыб рассадили в разные бассейны, и через 20 часов был проведен контроль зрелости икры на возможность ее отцеживания. В табл. 3 представлены результаты инъекции суспензии карпового гипофиза в разных дозах самкам линя, отловленным из водохранилищ. Таблица 3 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок линя из водохранилищ Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 0 (физиологический рас 8 0 0 твор) 1 8 1 12,5 2 8 4 50,0 3 8 4 50,0 4 8 5 62,5 5 8 5 62,5 6 8 3 37,5 7 8 1 12,5 8 8 2 25,0 9 8 1 12,5 Оптимальная доза суспензии карпового гипофиза для самок линя из водохранилищ,позволяющая максимально индуцировать овуляцию икры и получать качественную икру,составила от 2 до 5 мг/кг массы рыбы. Пример 4 Для стимуляции овуляции икры у самок прудового линя были отловлены 4-5 годовики линя весом от 290 до 540 г. Самок выдерживали в инкубационном цехе в бассейнах 3 дня при температуре воды 22-24 С, а затем инъецировали суспензией карпового гипофиза в различных дозах. После инъецирования рыб рассадили в разные бассейны, и через 20 часов был проведен контроль зрелости икры и на возможность ее отцеживания. В табл. 4 представлены результаты инъекции суспензии карпового гипофиза в разных дозах самкам линя, отловленным из водохранилищ. Таблица 4 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок прудового линя Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 0 (физиологический рас 8 0 0 твор) 1 8 0 0 2 8 1 12,5 4 Результаты инъецирования самок прудового линя во всем диапазоне доз, оптимальных для овуляции икры для самок линя речных, озерных и из водохранилищ, не дали положительного результата по индукции овуляции икры для прудового линя. Поэтому за предварительную дозу инъекции была принята минимальная доза в 2 мг/кг массы тела, при которой зафиксировано начало ответа организма прудовых самок линя на карповую гипофизарную инъекцию. С целью дальнейшей стимуляции овуляционного процесса икры у каждой из 7 самок, получивших предварительную инъекцию в дозе 2 мг/кг массы рыбы,через 24 часа была проведена разрешающая инъекция, начиная с дозы в 2 мг/кг массы тела. После инъецирования рыб рассадили в разные бассейны, и через 20 часов был проведен контроль зрелости икры и на возможность ее отцеживания. Результаты инъецирования представлены в табл. 5. Таблица 5 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок прудового линя при проведении разрешающей инъекции в диапазоне доз от 2 до 9 мг/кг массы тела Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 2 1 0 0 3 1 0 0 4 1 0 0 5 1 0 0 6 1 0 0 7 1 0 0 8 1 0 0 9 1 1 100 Таким образом, опытным путем определена доза разрешающей инъекции суспензии карпового гипофиза, которая составила 9 мг/кг массы тела для самок линя из прудов, позволяющая максимально индуцировать овуляцию икры и получать качественную икру у линя, выращенного в прудах. Пример 6 Для уточнения дозировок разрешающей инъекции самкам прудового линя были отловлены 4-5 годовики прудового линя весом от 310 до 490 г. Самок линя выдерживали в инкубационном цехе в бассейнах 3 дня при температуре воды 22-24 С, а затем инъецировали суспензией карпового гипофиза в различных дозах. Повторно было изучено влияние предварительной 2 мг/кг массы тела и разрешающей через 24 часа от 1 до 9 мг/кг массы тела инъекций на овуляцию икры на большем количестве самок линя (табл. 6), чем в пре 5 12340 1 2009.08.30 дыдущем исследовании (табл. 5). После предварительного и разрешающего инъецирования рыб рассадили в разные бассейны и через 20 часов провели контроль зрелости икры и на возможность ее отцеживания. Результаты разрешающей инъекции представлены в табл. 6. Таблица 6 Влияние суспензии карпового гипофиза на индукцию овуляции икры у самок прудового линя при проведении предварительной инъекции в дозе 2 мг/кг и через 24 часа разрешающей инъекции в дозе от 1 до 9 мг/кг массы тела Количество рыб, шт. Доза введения гипофиза, Овулирующих рыб с овулированной мг/кг всего икрой, шт. 0 (физиологический рас 8 0 0 твор) 1 8 0 0 2 8 0 0 3 8 1 12,5 4 8 2 25,0 5 8 2 25,0 6 8 4 50,0 7 8 4 50,0 8 8 6 75,0 9 8 7 87,5 Полученные результаты свидетельствуют о том, что наиболее эффективная доза разрешающей инъекции для самок прудового линя находится в диапазоне от 8 до 9 мг/кг массы тела, введение которой позволяет эффективно стимулировать овуляцию икры. Источники информации 1..244 397. 17.09.85 2. . , ., ., . .. .63. , 2000. - . 1-15 3. . ,. ,4, 7.1976. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 6