Способ оценки функционального состояния печени у женщины в послеродовом периоде

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ У ЖЕНЩИНЫ В ПОСЛЕРОДОВОМ ПЕРИОДЕ(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(72) Авторы Гутикова Людмила Витольдовна Кузнецов Олег Евгеньевич Кеда Людмила Николаевна(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(57) Способ оценки функционального состояния печени у женщины в послеродовом периоде, включающий определение активности аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и лактатдегидрогеназы, отличающийся тем, что активность ферментов определяют в грудном молоке после отделения фракции хиломикронов, причем при значениях активности аланинаминотрансферазы 5-42 Ед/л, аспартатаминотрансферазы 5-37 Ед/л,лактатдегидрогеназы 174-516 Ед/л состояние печени оценивают как нормальное, а при более высоких значениях активности всех ферментов функциональное состояние печени оценивают как нарушенное. Изобретение относится к медицине, а именно, акушерству и гинекологии, и может использоваться для оценки функционального состояния печени в послеродовом периоде у кормящих матерей. Наиболее близким к предлагаемому является способ оценки функции печени путем определения активности гепатоцитарных ферментов (аланинаминотрансфераза, аспарта-таминотрансфераза, лактатдегидрогеназа) в сыворотке крови Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. - М. МЕДпресс-информ, 2004. - С. 328-341, 378-393. Недостатком известного способа является его инвазивность, существует опасность инфицирования при получении образца в результате проведения пункции периферической вены. Способ не позволяет многократно повторять анализы вследствие повышения риска возникновения инфекционных осложнений. Задача изобретения - повышение безопасности оценки функции печени в послеродовом периоде у кормящих матерей с сохранением эффективности и информативности способа. Указанная задача достигается путем определения активности гепатоцитарных ферментов, а именно аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы и лактатдегидрогеназы, при этом отличительным моментом является то, что ферменты определяют в оставшемся после отделения фракции хиломикронов образце грудного молока и при значениях 11226 1 2008.10.30 аланинаминотрансферазы 5-42 Ед/л, аспартатаминотрансферазы 5-37 Ед/л, лактатдегидрогеназы 174-516 Ед/л функцию функцию печени оценивают как нормальную, при значениях всех показателей свыше указанных функция печени нарушена. Способ осуществляют следующим образом. Для получения образца грудного молока молочные железы и руки родильницы обрабатывают мыльным раствором и обмывают теплой водой. Производят сцеживание в подготовленные стерильные стеклянные или пластиковые пробирки объемом 10 мл. Первую каплю молока не используют. Полученный образец в количестве 5-7 мл помещают в холодильную камеру при температуре 0-8 С на 12 ч. Отделяют фракцию хиломикронов. В оставшемся после отделения фракции хиломикронов образце проводят анализ активности аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазыи лактатдегидрогеназы(ЛДГ). Нами использовался автоматический биохимический анализатор 8000 компании(США). В термостатируемой кювете смешивают 1 мл раствора для определения ферментов (АЛТ, , ЛДГ) компании(США) и 20 мкл пробы грудного молока. Для определения активности АЛТ исмесь инкубируют 2 мин, для определения активности ЛДГ - 5 мин при 37 С при длине волны - 340 нм. После проведенной инкубации на мониторе анализатора появляется измеренная активность фермента. В случае, когда значения АЛТ 5-42 Ед/л,5-37 Ед/л, ЛДГ 174-516 Ед/л, диагностируют нормальную функцию печени. При значениях всех показателей свыше указанных функция печени нарушена. Заявляемым способом проведена оценка активности АЛТ,и ЛДГ в грудном молоке и сопоставлена с активностью этих ферментов в сыворотке крови у 48 здоровых родильниц и 83, перенесших во время беременности гестоз различной степени тяжести. На 3 сутки послеродового периода у всех обследованных женщин оценивали активность ферментов в сыворотке крови и грудном молоке на автоматическом биохимическом анализаторе 8000 компании(США) и проводили сопоставление данных для каждой женщины индивидуально. Результаты исследования обработаны на персональном компьютере с использованием стандартных компьютерных программ 6.0,. В таблице представлены показатели активности ферментов в грудном молоке и сыворотке крови. Таблица 1 Показатели активности ферментов в грудном молоке и сыворотке крови в послеродовом периоде у кормящих матерей Группы обследованных Контрольная группа,48 Гестоз легкой степени,38 Гестоз средней степени,25 Гестоз тяжелой степени,20 Образцы Грудное молоко 17,51,2 18,31,1 203,819,7 17,91,1 19,11,2 226,718,2 29,21,9 25,51,6 320,221,4 47,33,9 40,45,2 479,323,8 11226 1 2008.10.30 Из приведенных в таблице данных следует, что активность ферментов, определяемая в грудном молоке, аналогична активности ферментов в сыворотке крови. Причем в цифровом эквиваленте они не различаются между собой. При проведении углубленной математической обработки (корреляционный анализ) мы выявили прямые корреляционные взаимосвязи между изученными показателями в грудном молоке и сыворотке крови. Для АЛТ коэффициент корреляции составил 0,85 для 0,87 для ЛДГ 0,81. Анализируя активность ферментов в грудном молоке и сыворотке крови, мы выявили следующие общие закономерности повышение активности всех исследованных ферментов в зависимости от степени тяжести перенесенного гестоза (таблица). Выявлено, что активность АЛТ свыше 50,0 Ед/л,свыше 47,5 Ед/л, ЛДГ свыше 316 Ед/л соотносилась с клиническими проявлениями поражения печени (наличие болей в правом подреберье и эпигастральной области, тошнота и рвота), которые в большей степени предъявляли родильницы, перенесшие тяжелую форму гестоза. При получении образца крови традиционным способом у 2 обследованных женщин в месте пункции периферической вены образовался воспалительный инфильтрат, что потребовало назначения антибактериальных средств. Кроме того, данная периферическая вена была непригодна для последующего внутривенного введения лекарственных препаратов. При многократном получении образцов молока для выполнения заявляемого способа не было выявлено ни одного осложнения. Таким образом, заявляемый неинвазивный способ оценки функционального состояния печени в послеродовом периоде у кормящих матерей эффективен, информативен и безопасен в сравнении с прототипом. Приводим примеры конкретного использования заявляемого способа. Пример 1. Беременная Е., 37 лет, история родов 1885-1993. Диагноз беременность 277 дней.срочные роды в заднем виде затылочного предлежания. Гестоз тяжелой степени(Е 2 Р 3 Н 2). Хроническая внутриутробная гипоксия плода. Отягощенный акушерский анамнез. Анемия беременных легкой степени. Из анамнеза выявлено, что , ,беременности завершились срочными родами,и- медабортами. Настоящая беременность . При данной беременности с 28 недель патологическая прибавка массы тела, повышение артериального давления до 150/100 мм рт. ст. Проведено стационарное лечение. Госпитализирована в 35 недель с жалобами на головные боли, бурное шевеление плода, боли в ногах, плохой сон, боли в правом подреберье и эпигастральной области, тошноту и рвоту. Отмечены отеки нижних конечностей и передней брюшной стенки. Беременной выполнено полное клиническое и лабораторное обследование, а также комплекс функциональных методов обследования, включающий ультразвуковое исследование с определением предполагаемой массы плода, кардиотокография (КТГ). При УЗИ выявлены признаки задержки внутриутробного развития плода. Показатели КТГ колебались в пределах 6-7 баллов. Проведено базовое лечение гестоза. Беременная родоразрешилась через естественные родовые пути живым плодом массой 3450 г, рост 52 см с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Отмечена морфофункциональная незрелость. Послеродовый период протекал без осложнений. Лактация установилась на 3 сутки. Оценка активности гепатоцитарных ферментов в грудном молоке и сыворотке крови произведена на 3 сутки. Для получения образца грудного молока молочные железы и руки родильницы обрабатывали мыльным раствором и обмывали теплой водой. Родильница самостоятельно производила сцеживание в подготовленную стерильную стеклянную пробирку объемом 10 мл. Первая капля молока не использовалась. Полученный образец в количестве 7 мл помещался в холодильную камеру при температуре 0-8 С на 12 часов для отделения фракции хиломикронов. После проведенной обработки образец использовался для кине 3 11226 1 2008.10.30 тического анализа активности АЛТ,и ЛДГ на автоматическом биохимическом анализаторе 8000 компании(США). В термостатируемой кювете смешивали 1 мл раствора для определения ферментов (АЛТ, , ЛДГ) компании(США) и 20 мкл пробы грудного молока. Для определения активности АЛТ исмесь инкубировали 2 минуты, для определения активности ЛДГ - 5 минут при 37 С. Определение активностей проводили при длине волны 340 нм. Активность гепатоцитарных ферментов в грудном молоке на 3 сутки составила АЛТ 51 Ед/л- 59 Ед/л ЛДГ - 487 Ед/л в сыворотке крови АЛТ - 53 Ед/л- 61 Ед/л ЛДГ - 493 Ед/л. Полученные результаты явились показаниями для проведения коррекции нарушенной функции печени. Назначались следующие препараты курантил по 2 таб. 3 раза в день спиронолактон по 1 таб. 3 раза в день полисорб по 1 ст. ложке 1 раз в день апилак по 1 таб. 3 раза в день. Активность гепатоцитарных ферментов на 10 сутки составила в грудном молоке АЛТ - 47 Ед/л- 35 Ед/л ЛДГ - 387 Ед/л в сыворотке крови АЛТ - 49 Ед/л- 39 Ед/л ЛДГ - 382 Ед/л. Женщина была выписана с ребенком на 11 сутки. Пример 2. Беременная П., 27 лет, история родов 1781-860. Диагноз беременность 278 дней.срочные роды в головном предлежании. Хроническая внутриутробная гипоксия плода. Хронический гастрит. Родовозбуждение палочкой ламинарии. Из анамнеза выявлено, что настоящая беременность первая. Беременной выполнено полное клиническое и лабораторное обследование, а также комплекс функциональных методов обследования, включающий ультразвуковое исследование с определением предполагаемой массы плода, кардиотокография (КТГ). Показатели КТГ колебались в пределах 7/7 баллов. Проведена амниотомия. Развилась регулярная родовая деятельность. Беременная родоразрешилась через естественные родовые пути живым плодом массой 3500 г, рост 52 см с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Послеродовый период протекал без осложнений. Лактация установилась на 2 сутки. Оценка активности гепатоцитарных ферментов в грудном молоке и сыворотке крови производилась на 3 сутки. Для получения образца грудного молока молочные железы и руки родильницы обрабатывали мыльным раствором и обмывали теплой водой. Родильница самостоятельно производила сцеживание в подготовленную стерильную стеклянную пробирку объемом 10 мл. Первая капля молока не использовалась. Полученный образец в количестве 7 мл помещался в холодильную камеру при температуре 0-8 С на 12 часов для отделения фракции хиломикронов. После проведенной обработки образец использовался для кинетического анализа активности АЛТ,и ЛДГ на автоматическом биохимическом анализаторе 8000 компании(США). В термостатируемой кювете смешивали 1 мл раствора для определения ферментов (АЛТ, , ЛДГ) компании(США) и 20 мкл пробы грудного молока. Для определения активности АЛТ исмесь инкубировали 2 минуты, для определения активности ЛДГ - 5 минут при 37 С. Определение активностей проводили при длине волны 340 нм. При оценке функции печени активность гепатоцитарных ферментов на 3 сутки в грудном молоке составила АЛТ - 27 Ед/л- 29 Ед/л ЛДГ - 187 Ед/л в сыворотке крови АЛТ - 28 Ед/л- 24 Ед/л ЛДГ - 190 Ед/л. Полученные результаты исследования соответствовали нормальным величинам. Показаний для назначения лекарственных препаратов не было. Женщина была выписана с ребенком на 8 сутки. Из приведенных примеров видно, что заявляемый способ имеет преимущества по сравнению с традиционным, а именно достигаются неинвазивность и уменьшение времени получения биологического образца,предупреждение инфекционных осложнений,4 11226 1 2008.10.30 возможность многократного повторения исследований,сохранение периферических вен для последующего внутривенного введения лекарственных препаратов,экономия времени работы лаборантов и медицинских сестер при получении биологических образцов,предупреждение возникновения стресс-реакции при получении биологического образца,высокая информативность. Таким образом, заявляемый способ неинвазивной оценки функции печени при адекватном заборе и обработке образца грудного молока не уступает по своей диагностической информативности и ценности образцам сыворотки, и может использоваться для ранней диагностики нарушений функции печени у кормящих матерей в любом родовспомогательном учреждении. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5