Способ хромоскопической диагностики предраковых состояний и ранних стадий злокачественных новообразований эктоцервикса шейки матки

01 33/52 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СПОСОБ ХРОМОСКОПИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПРЕДРАКОВЫХ СОСТОЯНИЙ И РАННИХ СТАДИЙ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ ЭКТОЦЕРВИКСА ШЕЙКИ МАТКИ(71) Заявитель Белорусский государственный институт усовершенствования врачей(73) Патентообладатель Белорусский государственный институт усовершенствования врачей(57) 1. Способ хромоскопической диагностики предраковых состояний и ранних стадий злокачественных новообразований эктоцервикса шейки матки путем его обработки красителем метиленовым синим в 30 тиосульфате натрия с последующей аппликацией хлористоводородной кислотой и выявлением насыщенности синей окраски пораженных участков тканей, по которой судят о новообразовании, отличающийся тем, что после окраски шейки матки красителем, его переводят в бесцветную лейкоформу аппликацией 1 хлористоводородной кислоты. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в случае недостаточной насыщенности тканей красителем,эктоцервикс шейки матки подвергают повторной обработке смесью красителя метиленового синего в 30 тиосульфате натрия и 1 хлористоводородной кислоты в соотношении 11 и при отсутствии окраски тканей шейки матки диагностируют предраковые изменения или раннюю раковую трансформацию.(56) Ищенко Г.Т., Баягина О.Н., Ищенко Т.И., Ильина В.П. Новая проба с окраской в дифференциальной диагностике предопухолевых заболеваний шейки матки // Сб. науч. трудов акушеров-гинекологов Узбекистана. Изобретение относится к медицине, а именно- к онкологии и гинекологии и может быть использовано для выявления предопухолевых состояний и рака эктоцервикса шейки матки на ранних стадиях. Известно,что предупреждение развития злокачественной опухоли и ее полное излечение возможно только при своевременной диагностике и адекватной терапии предопухолевых состояний, а также при выявлении малигнизации на ранних (доклинических) стадиях. Основным методом диагностики предопухолевых заболеваний и рака эктоцервикса шейки матки на доклинической стадии в современных условиях является цитологическое исследование 1. Данный способ является аналогом по отношению к заявляемому способу. Однако применение его при массовых профилактических осмотрах женского населения делает его дорогостоящим. Это обусловлено тем, что злокачественные новообразования в популяции здоровых встречаются относительно редко (1 случай на 1000 исследованных). Проведение же самого цитологического исследования требует квалифицированных специалистов цитологов,труд которых крайне непривлекателен из-за рутинности и малой производительности. Поэтому возникает необходимость разработки тестов для предварительного отбора женщин, подлежащих цитологическому ис 3883 1 следованию. Для этого все чаще используют методы хромоскопии шейки матки. Они основаны на изменении способности эпителиальной ткани при предраковом поражении или неопластической трансформации ее клеток к прижизненной окраске. Методы хромоскопии облегчают выявление участков слизистых оболочек,клетки которых подверглись неопластической трансформации либо находятся на пути к ней (участки дискератоза, дисплазии, интраэпителиальной карциномы и инвазивного рака). Суть способа состоит в выявлении повышенной способности участка эктоцервикса, содержащего диспластически измененные, и клетки сквамозного эпителия с неопластической трансформацией интенсивно сорбировать краситель - метиленовый синий. После превращения его в бесцветную лейкоформу обработкой хлористоводородной (соляной) кислотой процесс восстановления основной массы вышеуказанного красителя в очаге поражения длится дольше, чем на поверхности эктоцервикса шейки матки, покрытого нормальным сквамозным эпителием. При этом участок поверхности влагалищной части шейки матки с дисплазией, дискариозом, злокачественной трансформацией не успевает обесцветиться за время восстановления красителя. Он остается окрашенным остатками сорбированного метиленового синего в идентичный цвет. Известен способ (прототип), заключающийся в следующем 2. Исследуемую слизистую шейки матки(эктоцервикс) осушивают ватным тампоном. После этого его смазывают в течение 3 мин ватным шариком,обильно смоченным раствором метиленового синего в тиосульфате натрия (0,2 г метиленового синего в 10 мл 30 раствора тиосульфата натрия). Поверхность слизистой после такой обработки окрашивается в равномерный сине-голубой цвет. Затем шейку матки протирают в течение 3 с шариком, смоченным 10 раствором хлористоводородной (соляной) кислоты. При этом нормальная слизистая шейки матки полностью обесцвечивается. Участки с предраковыми изменениями и злокачественной опухолью продолжают сохранять интенсивно синий цвет. Однако описанный способ имеет ряд недостатков, которые затрудняют его применение при массовых онкогинекологических осмотрах. Высокая концентрация используемой в этом методе хлористоводородной кислоты требует высокой скорости обработки эктоцервикса шейки матки (не более 3 с), что практически невозможно. При превышении параметра возможен ожог слизистой оболочки влагалища и шейки матки с последующим развитием выраженного фибринозного воспаления, что затрудняет его использование в гинекологической практике. Вследствие ожога слизистой эктоцервикса шейки матки точная диагностика ранних стадий заболевания также невозможна. Попадание даже очень небольших количеств 10 хлористоводородной кислоты на поверхность влагалищных зеркал быстро приводит к порче этого медицинского инструментария. Задачей заявляемого способа является повышение точности диагностики предраковых состояний и ранних стадий злокачественных новообразований эктоцервикса шейки матки и исключение ожогов тканей исследуемого участка. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ хромоскопической диагностики предраковых состояний и ранних стадий злокачественных новообразований эктоцервикса шейки матки путем его обработки красителем метиленовым синим в 30 тиосульфате натрия с последующей аппликацией хлористоводородной кислотой и выявлением насыщенности синей окраски пораженных участков тканей, отличающийся тем, что после окраски шейки матки красителем его переводят в бесцветную лейкоформу аппликацией 1 хлористоводородной кислоты. В случае недостаточной насыщенности ткани красителем эктоцервикс шейки матки подвергают повторной обработке смесью красителя метиленового синего в 30 растворе тиосульфата натрия и 1 раствора хлористоводородной кислоты в соотношении 11 и при отсутствии окраски тканей шейки матки диагностируют предраковые изменения или раннюю раковую трансформацию. В предложенном способе диагностики снижена на порядок концентрация используемого раствора хлористоводородной кислоты. Предлагаемый раствор соответствует той концентрации, которая существует в организме человека, используется в качестве лекарственного препарата для внутреннего применения и не способна вызывать ожоги слизистых оболочек, а также приводить в негодность медицинский инструментарий(влагалищные зеркала). Во-вторых, удлинено время процесса восстановления метиленового синего при образовании его бесцветной лейкоформы после аппликации на окрашенный эктоцервикс шейки матки раствора хлористоводородной кислоты. Это делает более рельефной и четко видимой зону патологических изменений предопухолевого характера и неопластической трансформации. В-третьих, используется повторная обработка эктоцервикса шейки матки уже готовой лейкобазой красителя метиленового синего. Такая процедура позволяет уточнить границы патологического очага, который в отличие от первого этапа теста остается бесцветным при постепенно окрашивающемся в синий цвет нормальном эктоцервиксе шейки матки. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. 1. Приготовление реагентов. Для проведения исследования используют наборы реактивов, изготавливаемых централизованно м.п. Анализ-Х. Раствор метиленового синего в тиосульфате натрия непосредственно перед началом обследования к навеске метиленового синего 0,2 г вливают из другого флакона набора 10 мл 30 раствора тиосульфата натрия. Содержимое перемешивают круговыми движениями флакона. Раствор хлористоводород 2 3883 1 ной кислоты (1 ) находится в отдельном флаконе. После проведения первого исследования к флакону с красителем добавляется в соотношении 11 остаток хлористоводородной кислоты из второго флакона. Происходит обесцвечивание метиленового синего вследствие образования его лейкоформы. 2. Проведение хромоскопического исследования. Поверхность эктоцервикса шейки матки осторожно осушивают ватным тампоном. После этого ее смазывают в течение 3 мин ватным шариком, обильно смоченным раствором метиленового синего в 30 тиосульфате натрия. Затем исследуемую поверхность протирают в течение 1-3 мин другим шариком, смоченным 1 раствором хлористоводородной кислоты (перевод красителя в бесцветную лейкоформу). За это время поверхность нормального эктоцервикса шейки матки полностью обесцвечивается. Участки его, претерпевающие раннюю опухолевую трансформацию, остаются окрашенными в синий цвет. При этом интенсивность окраски коррелирует с тяжестью поражения слизистой предопухолевым и ранним опухолевым процессом. Затем вновь повторно начинают смазывать шейку матки (эктоцервикс) новым тампоном, пропитанным уже готовой лейкобазой метиленового синего, и наблюдают за развитием на его поверхности синей окраски. Спустя 3-5 мин поверхность нормального эктоцервикса приобретает голубовато-синюю окраску, тогда как участок пораженного эктоцервикса шейки матки остается в течение этого времени неокрашенным, сохраняя присущий ему розово-красный цвет. Визуальное и/или кольпоскопическое сопоставление на схематическом рисунке шейки матки, окрашенной при обработке первый раз и неокрашенной при обработке второй раз зоны эктоцервикса шейки матки,позволяет достаточно точно выделить место предопухолевого или опухолевого поражения эктоцервикса и взять из него материал для морфологического (цитологического, гистологического) исследования. Целесообразность использования предлагаемого хромоскопического способа, диагностики предопухолевых заболеваний и рака эктоцервикса шейки матки иллюстрируют следующие примеры. Пример 1. Больная Д., 40 лет. Диагноз правосторонний хронический сальпингоофорит в фазе обострения. Хронический эндоцервицит. Эктоцервикс бледно-розовой окраски. Из наружного зева умеренное количество мутных выделений. Необходимо исключить предраковое состояние и рак шейки матки. Для этого берут раствор метиленового синего в тиосульфате натрия, соляную кислоту и последовательно смазывают эктоцервикс шейки матки. После окраски раствором метиленового синего и обработки раствором 1 хлористоводородной кислоты эктоцервикс равномерно обесцветился. Затем шейку матки обрабатывают готовой лейкобазой метиленового синего. Спустя 2 мин по всей поверхности эктоцервикса наблюдают бледно-голубую окраску. Заключение патологии со стороны эктоцервикса шейки матки не выявлено. Цитологическое исследование воспалительный тип мазка, признаки клеточной атипии отсутствуют. Пример 2. Больная В., 30 лет. Диагноз рубцовая деформация шейки матки. Эктропион. Хронический эндоцервицит. Дисплазия 3-й степени. Необходимо подтвердить наличие предракового состояния. Для этого обрабатывают последовательно эктоцервикс шейки матки метиленовым синим в тиосульфате натрия и 1 соляной кислотой. После окраски шейки матки раствором метиленового синего в тиосульфате натрия и обработки раствором хлористоводородной кислоты выявляют очаг интенсивно-синей окраски на задней губе, непосредственно граничащей с эктропионом. Затем эктоцервикс обрабатывают лейкобазой метиленового синего и выявляют равномерное окрашивание в сине-голубой цвет передней губы шейки матки и части задней в районе 15-18 ч. Область эктропиона и задней губы в районе 18-21 ч остается неокрашенной. Цитологическое исследование материала из зоны поражения эктоцервикса шейки матки клетки сквамозного эпителия с признаками дискариоза. Комплексы клеток, подозрительных на раковые. Таким образом, предложенный способ хромоскопической диагностики предопухолевых заболеваний и рака эктоцервикса шейки матки прост в осуществлении, не требует особого оборудования и специально приготовленного персонала - цитологов. Он осуществляется с помощью стандартного оборудования и гинекологического инструментария гинекологических кабинетов, а также фельдшерско-акушерских пунктов и смотровых кабинетов поликлиник. Хромоскопическое исследование эктоцервикса шейки матки предложенным методом может использовать не только врач-кольпоскопист, но и участковый врач акушер-гинеколог, а также обученная акушерка. Предложенный способ в то же время обладает высокой эффективностью и полностью позволяет проводить селективный отбор пациентов с патологией шейки матки для морфологического исследования (цитология, гистология). Источники информации 1. Миляновский А.И. Методы диагностики в онкогинекологии. - Киев Высшая школа, 1988. - С. 54 (аналог). 3883 1 2. Ищенко Г.Т., Баягина О.Н., Труцко Г.И., Ильина В.П. Новая проба с окраской в дифференциальной диагностике предопухолевых заболеваний шейки матки // Сб. науч. трудов акушеров-гинекологов Узбекистана. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66. 4