Способ диагностики злокачественного новообразования

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ(71) Заявители Григорович Николай Александрович Григорович Татьяна Михайловна(72) Авторы Григорович Николай Александрович Григорович Татьяна Михайловна(73) Патентообладатели Григорович Николай Александрович Григорович Татьяна Михайловна(57) Способ диагностики злокачественного новообразования, при котором в плазме крови определяют содержание в г/л фибриногена (Ф), альбумина (А), общего белка и глобулинов (Г), в ммоль/л - содержание глюкозы (Гл) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ), в секундах время обесцвечивания метиленового синего (ВОМС), 0,2 мл 0,15 -ного раствора которого смешивают с 1 мл сыворотки крови при 100 С, после чего вычисляют лабораторный онко-диагностический коэффициент (ЛОДК) по формуле ЛОДК(100 Ф 10 ГВОМС)/АЛДГ/10 Гл и диагностируют наличие злокачественного новообразования при ЛОДК, равном 29,47 или более, или отсутствие злокачественного новообразования при ЛОДК менее 29,47. Предлагаемый способ относится к медицине и ветеринарии, в частности к диагностике злокачественных новообразований у человека и животных. Известно, что развитие в организме злокачественной опухоли сопровождается нарушением в плазме крови соотношения между грубодисперсными и мелкодисперсными белками количество первых возрастает, тогда как количество вторых уменьшается 1, 2. Ранее было установлено в эксперименте, что возникновение опухолевого роста в организме, независимо от природы опухолеродных факторов, сопровождается повышением интенсивности белкового синтеза в клетках-мишенях и снижением в них процессов дыхания 1. Было высказано предположение, что эти наблюдения - изменения белкового и энергетического обмена - должны найти отражение в изменении состава омывающей клетки опухоли плазмы крови. На основе этого предположения был разработан способ диагностики злокачественных опухолей, основанный на определении в плазме крови содержания белка и количества ко-фермента дегидрогеназы молочной кислоты НАД-Н 2 4, 5, 6,. В известном способе указанные компоненты определяют люминесцентным методом в спектрофлюориметре и по величине соотношения интенсивности флюоресценции белков 16506 1 2012.10.30 к таковой НАД-Н 2 решают вопрос о наличии или отсутствии у обследуемого злокачественной опухоли. Плазму крови разводят физиологическим раствором и флюорометрировали при длинах волн 340-350 нм и 450-470 нм и длине волны возбуждающего света 313-317 нм, после чего находят соотношение между полученными значениями пиков флуоресценции. Недостатком известного способа 4 является то, что для его осуществления необходим дорогостоящий и не встречающийся в учреждениях практического здравоохранения физический прибор - спектрофлюориметр. Наиболее близким к заявляемому является способ диагностики злокачественных опухолей, основанный на определении соотношения в крови грубодисперсных белков (фибриноген) и количества мелкодисперсных белков (альбумин) в ней, а также величины нового показателя - отношение времени обесцвечивания метиленового синего коагулянтом сыворотки крови 7 к количеству находящегося в ней альбумина. Для осуществления известного способа 7 находят содержание фибриногена и альбумина в плазме крови обследуемого пациента и время обесцвечивания 0,15 -го раствора метиленового синего. Рассчитывают величину диагностического коэффициента по формуле ДК(100 ФВОМС)/А,где ДК - диагностический коэффициент А - альбумин, г/л ВОМС - время обесцвечивания метиленового синего, секунды Ф - фибриноген, г/л (19,5). При значении ДК 29,47 и более диагностируют злокачественное новообразование. Задачей предлагаемого изобретения является повышение чувствительности способа,расширение возможностей выявления злокачественных новообразований. Задача решается за счет того, что в способе диагностики злокачественного новообразования, при котором определяют содержание в г/л фибриногена (Ф), альбумина (А), общего белка и глобулинов (Г), в моль/л - содержание глюкозы (Гл) и лактатдегидрогеназы(ЛДГ), в секундах - время обесцвечивания метиленового синего (ВОМС), 0,2 мл 0,15 ного раствора которого смешивают с 1 мл сыворотки крови при 100 С, после чего вычисляют лабораторный онкодиагностический коэффициент (ЛОДК) по формуле ЛОДК(100 Ф 10 ГВОМС)/АЛДГ/10 Гл,и диагностируют наличие злокачественного новообразования при ЛОДК, равном 29,47 или более, или отсутствие злокачественного новообразования, ЛОДК менее 29,47. Таким образом, повышение чувствительности способа достигается за счет дополнительного учета содержания в крови всех видов грубодисперсных белков, а именно не только фибриногена, но и глобулинов, а также оценки состояния изменения углеводного и энергетического обмена у обследуемого путем учета содержания фермента лактатдегидрогеназы, приходящейся на единицу глюкозы. Известно, что при росте злокачественных опухолей в крови снижается содержание глюкозы и возрастает количество ЛДГ 8. Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. У обследуемых сыворотку крови получают стандартным путем, удаляя образовавшийся сгусток крови. Далее определяют в плазме крови содержание в г/л общего белка, альбумина (А) и глобулинов (Г), в моль/л - лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и глюкозы на многоканальном биохимическом анализаторе Хитачи - 912, в г/л - количество фибриногена (Ф) на гемокоагулогическом анализаторе- 10000,Затем определяют в секундах время обесцвечивания 0,2 мл 0,15 -ного раствора метиленового синего сывороткой крови в процессе коагуляции и последующего нагревания коагулята при 100 С 7 до полного его обесцвечивания. Полученные результаты обрабатывают методами вариационной статистики 4, используя стандартный пакет программ Статистик. 2 16506 1 2012.10.30 Лабораторный онкодиагностический коэффициент (ЛОДК) вычисляют по формуле ЛОДК(100 Ф 10 ГВОМС)/А(ЛДГ/10 Гл). Предлагаемым способом было обследовано 132 человека. Когорта обследованных состояла из двух групп. -я группа - онкологические больные - 70 человек, преимущественно 1-й и 2-й стадии заболевания, и -я группа - 62 человека, практически здоровые. Диагноз злокачественного новообразования во всех случаях подтверждался морфологически. Полученные результаты обрабатывали методами вариационной статистики 9. Находили диагностические параметры системы, а именно диагностическую чувствительность,диагностическую специфичность, диагностическую эффективность и прогностические значения положительных и отрицательных диагностических заключений. Здоровые - 62 чел.27,220,070,54. Доверительные границы Величина дискриминанты между группой здоровых и онкобольных 29,47. Таким образом, при величине лабораторного онкодиагностического коэффициента(ЛОДК)29,47 констатируют наличие у обследуемого злокачественного новообразования или предопухолевого заболевания, а при меньшей величине дискриминантного показателя отсутствие такового. На основании анализа полученного материала были рассчитаны незаданные основные информационные параметры предполагаемой системы диагностики рака диагностическая чувствительность - 72 , диагностическая специфичность - 67 , диагностическая эффективность - 70 , диагностическая ценность положительного заключения (ПЦ ) - 77 , диагностическая ценность отрицательного заключения (ПЦ-) - 69 . Таким образом, предлагаемый способ с приемлемой точностью позволяет из когорты обследуемых выделить здоровых и тех лиц, у которых может быть еще клинически не проявляющее себя злокачественное новообразование. Предлагаемый способ диагностики злокачественных новообразований отличается от известных полнотой использования информации о содержании всех грубодисперсных белков в плазме крови и учете биохимических параметров плазмы, закономерно меняющихся при опухолевом росте. Сказанное иллюстрируют следующие примеры. Пример 1. Р.А.А., 51 год. Жалоб нет. Обратилась по собственной инициативе. Обследована общий белок - 75,8 г/л альбумин - 46,8 г/л фибриноген - 3,34 г/л ВОМС - 600 секунд, ЛДГ 344 ммоль/л глюкоза - 4,69 ммоль/л. ЛОДК(100 Ф 10 ГВОМС)/А(ЛДГ/10 Гл)(1003,3410(75,8-46,8)600)/46,8(344/104,69)26,157,3333,48. По данным анализов рассчитанная величина ЛОДК указывает на высокую вероятность наличия у обследуемой опухолевого процесса. При маммографии в правой молочной железе ее верхнем наружном квадранте выявлена тень злокачественной опухоли. Оперирована. Диагноз подтвержден гистологически аденокарцинома правой молочной железы, 10 М 0. Пример 2. Б.Т.А., 36 лет. Жалобы на появление узлового образования в области передней стенки живота справа. Предварительный диагноз лимфома передней стенки живота. Общий бе 3 16506 1 2012.10.30 лок - 84 г/л альбумин - 48,7 г/л ЛДГ - 300 ммоль/л глюкоза - 5,6 ммоль/л фибриноген 3,5 г/л ВОМС - 330 секунд. ЛОДК(100 Ф 10 ГВОМС)/АЛДК/10 Гл(1003,510(84-48,7)330)/48,7300/(105,6)1033/48,7300/5621,215,3526,56. По данным анализов рассчитанная величина ЛОДК указывает на высокую вероятность отсутствия в организме обследуемой злокачественного роста. Это заключение подтверждено морфологическим изучением препаратов иссеченной опухоли. Заключение липома. Источники информации 1. Винцлер Р. Успехи в изучении рака. Т. 1. - 1955. - С. 388-436. 2. Патент РБ 7458, 2006. 3. Григорович Н.А. Физико-химическая механика дезоксирибонуклеопротеидов хроматина из клеток органов-мишеней на ранних этапах бластомогенеза // Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук. - Киев. - 1990. - 40 с. 4. А. с. СССР 938671, 1982. 5. Черницкий Е.А., Григорович Н.А., Слобожанина Е.И., Монастырная П.Л. Здравоохранение Белоруссии. - 1987. -8. - С. 31-32. 6. Черницкий Е.А., Григорович Н.А., Слобожанина Е.И., Монастырная П.Л. Вопросы онкологии. - 1988. -6. - С. 664-668. 7. Патент РБ 12320, 2009. 8. Шапот В.С. Биохимические аспекты опухолевого роста. - М. Медицина, 1975. 304 с. 9. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. -Минск Вышэйшая школа, 1973. Изд. 3-е. - 320 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4