Капсула, заключающая клетки, продуцирующие вирусные частицы, способ ее получения и фармацевтическая композиция, содержащая капсулу

4. Капсула по п. 3, отличающаяся тем, что полисахариды, содержащие сульфатную группу, или их производные представлены одним или более элементами, выбранными из группы, включающей сульфат целлюлозы, ацетосульфат целлюлозы, сульфат карбоксиметилцеллюлозы, сульфат декстрана и сульфат крахмала, а синтетическим полимером, содержащим сульфонатную группу, является полистиролсульфонат.5. Капсула по п. 3 или 4, отличающаяся тем, что полимером, содержащим четвертично-аммониевые труппы, является полидиметилдиаллиламмоний или поливинилбензилтриметиламмоний.6. Капсула по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что пористая стенка капсулы включает комплекс, образованный сульфатом целлюлозы и полидиметилдиатшиламмонием.7. Капсула по любому из пп. 1-6, отличающаяся тем, что имеет форму микрокапсул с диаметром 0,01-5,0 мм, предпочтительно 0,1-1,0 мм.8. Капсула по любому из пп. 1-7, отличающаяся тем, что внутренняя полимерная матрица имеет губчатую структуру.9. Капсула по любому из пп. 1-8, отличающаяся тем, что размер пор пористой стенки капсулы составляет 80-150 нм, предпочтительно 100-120 нм.10. Капсула по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что вирусная частица, продуцируемая клетками, представляет собой ретровирусную частицу, содержащую геном ретровирусного вектора.11. Капсула по п. 10, отличающаяся тем, что клетки, продуцирующие ретровирусные частицы, представляют собой упакованную линию клеток, трансфецированную экспрессирующим вектором, несущим ретровирусную векторную конструкцию, способную инфицировать клетки-мишени и регулировать в них экспрессию одной или нескольких кодирующих последовательностей, присутствующих в указанной ретровирусной конструкции, причем указанная зшния клеток включает, по крайней мере, один экспрессирующий вектор, несущий гены, кодирующие белки, необходимые для упаковки ретровирусной векторной конструкции.12. Капсула по п. 11, отличающаяся тем, что, по крайней мере, одна из указанных кодирующих последовательностей кодирует гетерологичный пептид и выбрана из группы,включающей Маркерный ген, терапевтический ген, антивирусный ген, противоопухолевый ген и ген, кодирующий цитокин.13. Капсула по любому из пп. 10-12, отличающаяся тем, что ретровирусный вектор является дефектным по репликации.14. Капсула по п. 13, отличающаяся тем, что ретровирусный вектор включает участок ЗЪТК структуры 03-11-05 и участок ЗЪТК включает полный или частично делетированный участок ИЗ, причем указанный частично делетированньпй участок 113 замещен полилинкерной последовательностью и регуляторной последовательностью или промотором, за которым следуют участок К или 115.15. Капсула по любому из пп. 10-14, отличающаяся тем, что ретровирусным экспрессирующим вектором является рЬХ 2 В 1.16. Способ получения капсулы по любому из пп. 1-15, включающий суспендирование клеток, продуцирующих вирусные частицы, в водном растворе полиэлектролита и осаждение полученной суспензии путем введения ее в форме предварительно сформированных частиц в осаждающую баню, содержащую водный раствор противоположно заряженного полиэлектролита.17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что формирование частиц происходит путем распыления.18. Способ по п. 16 или 17, отличающийся тем, что клетки суспендируют в водном растворе полисахарида, содержащего сульфатную группу, или его производного или синтетического полимера, содержащего сульфонатную группу.19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что полисахарид, содержащий сульфатную группу, или его производное представлены одним или более элементами, выбранными из20. Способ по п. 16 или 17, отличающийся тем, что осаждающая баня включает водный раствор полимера, содержащего четвертично-аммониевь 1 е группы.21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что полимером, содержащим четвертичноаммониевые группы, является полидиметилдиаллиламмоний или поливинилбензилтриметилшимоний.22. Способ по п. 16 или 17, отличающийся тем, что клетки суспендируют в водном растворе сульфата натрийсодержащей целлюлозы и вводят в осаждающую баню, содержащую водный раствор хлорида полидиметилдиаллиламмония.23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что водный раствор сульфата натрийсодержащей целлюлозы содержит О,5-50,О , предпочтительно 2-5 , сульфата натрийсодержащей целлюлозы И 2-10 предпочтительно 5 , плодной телячей сыворотки в забуферированном физиологическом растворе.24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что водный раствор хлорида полидиметилдиаллиламмония содержит 0,5-50,0 , предпочтительно 2-10 или более предпочтительно 3 хлорида полидиметилдиашшламмотшя в забуферированном физиологическом растворе.25. Капсула по любому из пп. 1-15, полученная способом по любому из пп. 16-24.26. Капсула по любому из пп. 1-15 или 25 для использования в генной терапии.27. Капсула по п. 26, отличающаяся тем, что ее используют в противораковой терапии.28. Фармацевтическая композиция для доставки терапевтических генов к органам/клеткам мишеням путем инъекции и/или имплантации, включающая капсулу по любому из пп. 1-15 или 25 и физиологически приемлемый носитель.29. Фармацевтическая композиция по п. 28, отличающаяся тем, что органом/клеткой мишенью является раковая ткань или клетки гладкой мускулатуры, окружающие артерии.Настоящее Изобретение относится к капсулам, заключающим клетки,продуцирующие вирусные частицы, в частности, ретровирусные частицы, содержащие геном ретровирусного вектора, несущего терапевтические гены, к способам получения таких капсул, а также к фармацевтической композиции, содержащей упомянутыеКЭПСУЛЫ, предназначенной ДЛЯ доставки ГЭНОВ, ЧЭСТНОСТИ, тераДоставка терапевтически ценных генов к клеткаммишеням является основным принципом генной терапии. Для того, чтобы генная терапия стала обычной процедурой, крайне важно разработать такие системы, которые обеспечивали бы эффективную 3 у 19 доставку терапевтических генов к клеткаммишеням.Вирусные векторы, а в частности, векторы на основе ретровирусов, являются наиболее часто используемыми средствами для переноса генов в генной терапии (Молчал и Апаег 5 оп,1993). В основе большинства апробированных схем генной терапии лежит 95 уу 9 метод, который заключается в том, что у пациента удаляют соответствующие клетки, эти клетки генетически модифицируют 33 утвго, а затем снова вводят пациенту. Этот метод является трудоемким и дорогостоящим, а также ограничен технологическими трудностями. Кроме того, возможности этого метода ограничены конкретными клетками, которые должны быть легко выделены, культивированы, и снова имплантированы (СингЬцгч И др., 1995). Хотя Ед уу 9 доставка терапевтических генов имеет много преимуществ, однако, в той форме, в которой ее осуществляют в этом методе, она является неэффективной и проблематичной. Основной проблемой, связанной с низкой эффективностью переноса генов в данном методе, является необходимость многократного введения вирусного вектора. Такая необходимость осуществления множества циклов доставки вектора делает этот метод не только трудоемким, но также,очевидно, И неэффективным изза иммунного ответа, продуци руемого ПрОТИВ ВИРУСНЫХ частиц.Одним из путей решения этой проблемы является непосредственная имплантация клеток, продуцирующих вирусные частицы. Имплантация клеток, продуцирующих вирусные частицы, содержа щие геном вирусного вектора, 3 уур вблизи органамишени или клетокмишеней, позволила бы также доставлять вирусный вектор непосредственно к клеткам/органаммишеням.л Кроме того, в случае, когда вирусом, используемым для вирусного вектора, является ретровирус этот метод является более эффективным, чем метод введения множества однократныхвысоких доз, поскольку в данном случае, существует вероят ность того, что векторный вирус будет присутствовать при репликации клетокмишеней, что повышает его шанс инфицировать эти клеткимишени. К тому же, высвобождение более низких уровней вирусных частиц, но более продолжительное,может оказаться преимущественным, поскольку оно позволяет избежать иммунного ответа против этих вирусных частиц.Для эффективной доставки вирусных векторов, клетки, продуцирующие вирусные частицы, должны быть жизнеспособными в течение длительного периода времени после их имплантации хозяину, и в этот период времени должны продуцироваться и высвобождаться из клеток вирусные частицы. В отсутствие значительного иммунного ответа, например, после имплантации в головной мозг, эти клетки могут сохранять жизнеспособность в течение продолжительного периода времени (6 ц 1 Чег и др., 1992,Ваш и др., 1993). Однако, для успешного осуществления им плантации в другие участки организма, клеткипродуценты должны быть сначала защищены от иммунного ответа.Таким образом, продолжительная эффективность этого ме б