Способ получения лейкоцитарной массы

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ МАССЫ(71) Заявитель Государственное учреждение Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства Министерства здравоохранения Республики Беларусь(72) Авторы Милько-Черноморец Юлия Викторовна Довбан Светлана Рудольфовна Шилко Александр Николаевич(73) Патентообладатель Государственное учреждение Научно-исследовательский институт охраны материнства и детства Министерства здравоохранения Республики Беларусь(57) Способ получения лейкоцитарной массы из свежезаготовленной крови донора, при котором кровь помещают во флакон с консервирующим раствором и 10 медицинской желатиной, инкубируют в течение 30-45 мин при 37 в наклонном положении, затем отбирают плазму с лейкоцитами, центрифугируют ее в течение 10 мин при 1500 об/мин,удаляют надосадочную жидкость и ресуспендируют осадок лейкоцитов в 2 мл стерильного физиологического раствора, отличающийся тем, что в качестве консервирующего раствора используют препарат Глюгицир.(56)925346, 1982.93031143 , 1996.2061958 1, 1996.02009823 , 1990.0375201 1, 1990.0312713 2, 1989. Изобретение относится к акушерству и может использоваться в отделениях патологии беременных для проведения иммунокоррегирующей терапии привычного невынашивания беременности. В практическом здравоохранении применяется достаточно эффективный способ лечения привычного невынашивания беременности путем подкожного введения беременной взвеси донорских лимфоцитов, что приводит к нормализации иммунологических реакций в материнском организме и способствует вынашиванию беременности в 60 случаев. Донорские лимфоциты получают из лейкоцитарной массы, приготовленной из венозной крови донора или мужа. Известен способ получения лейкоцитарной массы из венозной крови, полученной с помощью 4,5 -ного раствора ЭДТА в качестве консерванта. Концентрация лимфоцитов обычно составляет до 60 млн. клеток, процент живых составляет 90 ( 925346, 1982). 6416 1 Недостатком известного способа является относительно малое результативное количество лейкоцитов, что ограничивает возможности проводимой иммунотерапии в достижении благополучного исхода. Задачей изобретения является получение большего количества взвеси лимфоцитов с использованием разрешенных к применению консервирующих растворов, максимально удовлетворяющих требованиям асептики. Задача решается тем, что лейкоцитарную массу получают из свежезаготовленной крови донора, которую помещают во флакон с консервирующим раствором и 10 -ной медицинской желатиной, инкубируют в течение 30-45 минут при 37 С в наклонном положении, затем отбирают плазму с лейкоцитами, центрифугируют ее в течение 10 минут при 1500 об/мин, удаляют надосадочную жидкость и ресуспензируют осадок лейкоцитов в 2 мл стерильного физиологического раствора, отличающийся тем, что в качестве консервирующего раствора используют препарат Глюгицир. Способ осуществляется следующим образом 250 мл свежезабранной венозной крови мужа или донора и помещают во флакон, содержащий 50 мл консервирующего раствора Глюгицир, к раствору добавляют 10 мл 10 -ного раствора медицинской желатины. Флакон помещают в термостат под углом в 45 градусов, температурой 37 и выдерживают в течение часа. После этого плазму и лейкоциты отсасывают с помощью пипетки, помещают в центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 10 минут при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок лимфоцитов ресуспензируют в 2 мл стерильного физиологического раствора. Пипеткой Сали забирают 0,02 мл взвеси для подсчета количества лимфоцитов. Получают от 100 до 200 млн. лимфоцитов. Процент живых составляет 95. Эффективность использования лейкоцитарной массы, полученной предлагаемым способом для лечения угрозы прерывания беременности, подтверждается клиническим примером. Пример. Беременная А., 28 лет, служащая, состоит в 1 браке, менструальная функция не нарушена, беременеет сразу. Беременности завершались самопроизвольными выкидышами первая в 1993 г. в сроке 18 недель вторая в 1994 г. в сроке 12 недель, третья в 1995 г. в сроке 8 недель. Во время четвертой беременности в сроке 5 недель проведен 1-й курс иммунотерапии лимфоцитами мужа, полученными по способу-прототипу, однако результаты лечения оказались сомнительными. В сроке 8 недель был проведен следующий курс иммунотерапии лимфоцитами мужа, полученными по заявляемому способу. Количество полученных лимфоцитов составило 200 млн. клеток, процент живых - 95. Еще один курс иммунотерапии был проведен в сроке 28 недель лимфоцитами, полученными по заявленному способу в количестве 180 млн. клеток. Беременность завершилась родами в срок. Описанный способ позволяет получить значительно большее количество лимфоцитов и больший процент живых клеток, что значительно повышает эффективность курсов иммунотерапии невынашивания беременности и сокращает количество проводимых курсов. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.