Способ биосинтеза рифамицина B

Еихп-сггинсздн в РЕСПУБЛИНЕ если смеет 19госицАРотвЕннЫй номитвт по изоБРЕтЕниям и отнгьпиям ПРИ пант сссг 5 1(71) Белорусское производствеиное объединение медицинский Препаратов велмедпоепаратыЦель изобретения - повышение вьг хода целевого продукта.П р и М е р 1. Биосинтез рифамицнна В проводят в ферментере вместимостью 0,63 мъ. Продуцент рифампнна В, штамм Моеаг 1 а ше 1 еггапе 1 Р 84 выращивают на посевной среде сначала в колбах, затем в аппаратах вместимостью 0,1 на и передают в количестве 102 в фермеитер вмести 42-89- 2 с . Цель изобретеииядф повышение выхода целевого продукта. Посевной матерновырзщваштв феоментациоиной среде,содержащей (иас.) глюкозу-2-3 сае харозуд 5,56 д 5 соевую муку 2,7-3,5 . сернокислый аммоний 036-О 7 аммо ний фосфорнокислый двузаиещеииый 0,02-ооз 5 меп 3 чРдб 8 рбитал р,1 д-0 д 17 смесъ микроэлементов 0,5 сернокислый.нагии.01 тО 3 водт остальное Зыреыванне ведут до сиит женил-концентрации сахарозы дод 7 3 мас.3 атем осушествляют 7 дррбнуюч 7что обеслечнваетподдержаиие кои л центрации сахарозы на уровнехдгз. мас.д дрчбнуюдподепудведут до на чала аетолизамицелияпри этом . количество дробно вводимой сахарозыЦноиную среду следующего состава,мас. глюкоза.25 сахароза 6,Ч соевая мука З 1.сериокислыи аммоч нпй 0,65 аммоний фосфорнокислый двузанещеный О,028.меп 1,35 барбит тал 0,16.сернокислый нагннй 02 смесь мкроэлемеитов 0,5, остальное вода, рН среды после стерилизации 7,17,4. Процесс ферментации ведут при периодическом коитроле количества биомассы и содержания углеводов до тех пор, пока концентрация сахарозы в среде не достигнет 3,5 мас.. Далее поддерживают эту концентрацию сахарозы в кулвтуральной жидкости путем дробной подачи раствора, содержащего 2 Осахарозы и 2,3 сернокислого аммония (соотношение сахарозы и сернокислого аммония 1 д 0,115). Дозирование продолжают до момента начала автолнзамицелия.Количество сахарозы и сернокислого амМонпя вводимое дополнительно в кулътуральную жидкость в процессе ферментации, составляет 7,5 н 0,85 мас.2 соответственно.Суммарный расход сахарозы и сернокислого аммония в процессе ферментации составляет 13,5 и 1,5 мас. соответственно.Уровень образования рифамицина В 15150 мкг/мл, съем с аппарата Ш 4П р и м е р 2. Процесс биосинтеза проводят как в примере 1, но с Исполь зованием ферментационной среды, со-. держащей (мас.) глюкозы 2,0 сахарозы 5,5 соевой муки 2,7 сернокислого аммония 0,6 аммония фосфорнокислого Двузамещенного 0,02 мела 1,3 барбитала 0,14 сернокислого магния 0,61 смесь микроэлементов 0,5 воду остальное.Поддержание содержания сахарозы в культуральной жидкости на уровне З мас.2 осуществляют раствором, содержащим 202 сахарозы и 2,0 сернокис лого аммоня (соотношение сахарозы и сернокислого аммония.0,11. Ко ЛИЧЕСТВО СЕЬХРОЗЫ Н СЕРНОКНСЛОГО 1 . . Й ммоиия ВВОДИМОЕ ДОПОЛНИТЕЛЬНО -Екультурапьную жидкость в процессе ферментации, составляет 7,0 и 0.7 мас. соответственно. Суммарный расход сахарозы И сернокислого аммония в процессе ферментации составляет 12,5 и 1,3 мас.Х соответственно. Уровень образования рифамицина В 14200 мкг/мл, съем с аппарата 4,85 млрд. ед. 0 П р и М е р З. Процесс биосинте использованем ферментационной среды, содержащей(мас.2) глюкозы 3,0 сахарозы 6,5 соевой муки 3,5 сернокислого аммония 0,7 аммония фосфорнокислого двузамещенного 0,035амела 1,4 барбиталаО 17 сернокислого магния 0,3 смесь мкроэлемен тов 0,5 воду остальное.Поддержание концентрации сахарозы осуществляют раствором, содержащим 20 сахарозы и 2,52 сернокислого алюминия (соотношение сахарозы наммония сернокислого 1 О,125). Коли чество сахарозы и сернокислого аммония, вводимое дополнительно в культуральную жидкость в процессе ферментации, составляет 8,0 и 1,0 мас.2 соответственно. Уровень образования рифамицииа 14500 мкг/мл, съем с аппарата 5 млрд.ед.По способу-прототипу уровень образования антибиотика 11400 мкг/мл,съем с аппаратад,095 млрд.ед.,длительность процесса в среднем 238 ч. -Использование способа позволяет повысить активность культуральной жидкости и съем антибиотика. ,Ф о р М у л а и 3 о б р е т ен и яСпособ биосинтеза рифамицина В путем выращивания штамма Ыосага 1 еше 1 Ъеггапе 1 Р 8 д в ферментационной среде, содержащей глюкозу, сахарозу,соевую муку, сернокислый аммоний,аммоний фосфорнокислый двузамещенный,мел, барбнтал, смесь мкроэлементовцелевого продукта, выращнваниеведут в ферментационной среде, дополнительно содержащей сернокислый магний,при следующем соотношении компонен тов, мас.аммоний ОбО,7 Аммоний фосфорно кислый двузамедо достижения концентрации сахарозы в культуральной жидкости 4-3 мас. и в процессе ферментации ПОДДЭРЖНВН ют концентрацию сахарозы на данном уровне путем дробной подачи РаСТВ 0 ра, содержащего сахарозу и СЕРНОКИСлый а . ммоннн в соотношении .(0- дробно конпоненфов составляет 7-8 0 з 125) до начала автолиза мицелия, Мас. сахароэд и 0,7-1 ас 2 верно При этом общее количество вводимых кислого аммония.ВННН Государственного комитта понэобретениян И открытиянпрн ГКНТ СССР 113035, Москва.жь 35 Раушская наб. ддд/5ПронзЬодственноиздательский комбинат Патент г.Ужго од дул. Гагарина 101 а Р я . э