Способ моделирования инфекционно-токсического шока менингококкового генеза

61 39/095, 12 1/02, 12 136 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ(71) Заявитель Белорусский научно-исследовательский институт кардиологии Минздрава Республики Беларусь(73) Патентообладатель Белорусский научноисследовательский институт кардиологии Минздрава Республики Беларусь(57) Способ моделирования инфекционно-токсического шока менингококкового генеза путем внутривенной инъекции подопытным животным липополисахарида клеточной стенки менингококка, отличающийся тем,что за сутки до инъекции животным внутривенно вводят комплекс культуральных антигенов в дозе 5 мг.(56) 1. Шалыгина Н.Б., Шепелева Г.К. и др. Влияние бактериальных токсинов на микрогемоциркуляцию (экспериментальное исследование) // Архив патологии.1987.2, -С. 27-32. Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования инфекционно-токсического шока (ИТШ) менингококкового генеза. Наиболее близким к изобретению по совокупности признаков и достигаемому результату является способ построения частичной модели ИТШ менингококкового генеза для исследования нарушений микрогемоциркуляции под влиянием различных фракций менингококковых микробов путем введения липополисахарида клеточной стенки менингококка в хвостовую вену крысам весом 200-250 г в дозе 2 мг. Данная доза не вызывает гибель животных и дает воспроизводимый эффект сосудистых нарушений 1. Однако, вышеописанный способ не позволяет построить модель ИТШ менингококкового генеза, отражающую полную картину течения патологического процесса, характеризуемую фазовостью, приближенную к клиническому проявлению инфекционно-токсического шока менингококкового генеза у человека. Кроме того, модель недостаточно воспроизводима. Задача, на решение которой направлено изобретение, заключается в необходимости построения патогенетической модели инфекционно-токсического шока менингококкового генеза, которая отражала бы полную клиническую картину шока, была бы четко воспроизводимой, отличалась фазовостью, обязательным усугублением симптоматики, нарастанием полиорганных поражений, являлась сопоставимой с существующей клинической картиной и могла быть использована для клинико-экспериментальных целей. Техническим результатом, который может быть получен при реализации изобретения является отчетливая фазовость построенной модели ИТШ менингококкового генеза. Поставленная задача решается следующим образом. В способе моделирования инфекционно-токсического шока менингококкового генеза, включающем внутривенную инъекцию подопытным животным липополисахарида (ЛПС) клеточной стенки микроба, согласно изобретению, за сутки до инъекции внутривенно вводят комплекс культуральных антигенов (КА) в дозе 5 мг. 2746 1 Способ осуществляют следующим образом. Для получения модели используют беспородных кроликов весом 1400-1500 г. Токсические субстанции получают путем формовой экстракции и возгонки с последующей лиофильной сушкой по методу Грачевой А.М. и соавт. (отчет лаборатории менингококковых инфекций ЦНИИ эпидемиологии МЗ СССР. -М. 1986). Предварительно определяют -50 для кроликов. Которая составила для КА - 15 мг/кг, для ЛПС - 23 мг/кг. Использованные дозы антигенов подбирают эмпирически. В краевую вену уха кролика медленно, на протяжении двух минут вводят комплекс антигенов в дозе 5 мг,разведенных в 1 мл физиологического раствора. Через сутки аналогично вводят ЛПС в дозе 10 мг на кг веса животного и проводят наблюдения. Критериями эффективности способа явились гемодинамические, клинические и патологоанатомические исследования. Отмечается однотипность и отчетливая фазовость гемодинамической картины у кроликов, погибших в разные сроки. Так, у всех животных в раннем периоде наблюдается выраженная гиперкинетическая реакция,проявляющаяся умеренной гипертензией, ростом периферического сосудистого сопротивления, тахикардией при незначительном повышении минутного и ударного объема. Общей тенденцией является постепенное нарастание гиперкинетической реакции с формированием развернутой гемодинамической картины к 20-30 минуте эксперимента. Последующий период характеризуется нарастанием гипокинетических явлений и значительно варьируется по длительности. Минимальная продолжительность этого периода - 40 минут, максимальная - 8 часов. Однако,несмотря на значительные временные различия, отмечаются общефазовые закономерности смена нарастающих гипокинетических явлений периодами относительной стабилизации, проградиентное течение процесса,неуклонное нарастание внешних признаков тканевой гипоксии и централизации кровообращения. Затем наступает терминальный период длительностью 1-2 часа, который характеризуется развернутой гипокинетической реакцией, гипотонией, менее 40 от исходного уровня, декомпенсированным метаболическим ацидозом. Для клинической картины ИТШ характерен тромбогеморрагический синдром, в частности он имеет место у всех животных, погибших после первых суток эксперимента, проявляется гематурией, кишечными кровотечениями или кровоизлияниями. При патологоанатомическом исследовании погибших животных наиболее характерными были инфильтративно-дистрофические проявления в легких, печени, миокарде, почках. На этом фоне наблюдались явления ТГС набухание капиллярного эндотелия, сладжирование крови, очаговые отложения фибрина, тромбоз,кровоизлияния в ткани. Примеры осуществления способа. Пример 1. Для проведения эксперимента взят беспородный кролик весом 1500 г. В краевую вену уха животного медленно, в течение двух минут, вводят комплекс антигенов в дозе 1 мг на 1 мл физиологического раствора. Затем через сутки таким же образом вводят 10 мг/кг липополисахарида клеточной стенки менингококка и определяют исходные данные гемодинамики - артериальное давление (АД) составило 90 мм рт.ст, частота сердечных сокращений (ЧСС) -230 уд./мин, ударный объем (УО) - 3,2 мл, минутный объем (МО) - 736 мл/мин, периферическое сопротивление (ПС) - 0,12. Через 7 минут после инъекции ЛПС резко нарастают явления централизации кровообращения АД - 100 мм рт.ст., ЧСС - 250 уд/мин, УО - 3,3 мл, МО - 825 мл/мин, ПС-5,8. На 15 минуте уши и конечности холодные,цианоз слизистых, периоды двигательных возбуждений, тахинноэ (частота дыхания - 110 в минуту), АД - 90 мм рт.ст., ЧСС - 276 уд/мин, УО - 2,6 мл, МО - 707,6 мл/мин, ПС - 6,3. На 30 минуте регистрируют падение АД на фоне высокого ПС, тахикардию, явления тканевой гипоксии. На 40 минуте животное погибло. Ведущим проявлением шока в данном примере был диффузный ангиоспазм, приведший к появлению выраженных признаков централизации кровообращения, тканевой гипоксии. Пример 2. Беспородному кролику весом 1500 г таким же образом, как и в предыдущем примере вводят 5 мг КА и 10 мг ЛПС с суточным интервалом. Регистрируют исходные показатели гемодинамики. АД - 95 мм рт.ст., ЧСС- 238 уд/мин, УО - 2,6 мл, МО - 618,2 мл/мин, ПС - 0,12. На 15 минуте эксперимента имеет место снижение АД, рост периферического сопротивления сосудов, тахикардия (АД - 70 мм рт.ст., ЧСС - 312 уд/мин, УО - 2,3 мл, МО - 717,6 мл/мин, 2 2746 1 ПС - 4,12). Состояние животного и фиксируемые параметры оставались практически неизменными на протяжении последующих суток. На 29 часу эксперимента наступило резкое ухудшение АД - 50 мм рт.ст., ЧСС- 310 уд/мин, У 0 - 1,1 мл, МО - 341 мл/мин, ПС - 4,38. Далее наблюдалась прогрессирующая гипотония с последующей гибелью животного к концу 29 часа эксперимента. В данном случае причиной гибели животного явилось развитие сердечной недостаточности, обусловившей падение АД и МО. Эксперимент по использованию предложенного способа построения модели ИТШ менингококкового генеза проводился на 20 животных. Данные по срокам гибели этих животных после введения им ЛПС представлены в таблице. Время после введения ЛПС в часах 1-12 Число погибших животных Для сравнения результатов, полученных заявляемым способом, взята контрольная группа в количестве девяти кроликов, которым проведено однократное введение ЛПС в дозе 10 мг/кг с дальнейшим наблюдением за их состоянием. Возбуждение и двигательная активность этих животных сопровождалась последующим быстрым нарастанием эффектов централизации кровообращения, гемодинамических расстройств и тканевой гипоксии. Двое животных погибло очень быстро - через 30 минут после инъекции, а у остальных наступила стабилизация состояния. Скоротечность токсического процесса, нечеткость фаз шока, отсутствие нарастания полиорганной патологии не позволяют построить полную модель ИТШ менингококкового генеза, максимально приближенную к клиническому течению шока у человека, а также использовать этих кроликов, как объект для фармакологических исследований. Как следует из таблицы, сроки гибели животных при использовании предложенной модели шока были значительно большими. Таким образом, заявляемый способ имеет ряд преимуществ отчетливую фазовость процесса, появление гипокинетической фазы с длительными периодами стабилизации и кратковременным терминальным периодом,появление выраженного ТГС, характерного для менингококковой инфекции. Это свидетельствует о том, что получена четкая патогенетическая модель ИТШ менингококкового генеза с характерной фазовостью и большой воспроизводимостью. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.