Способ моделирования острого гнойного менингита

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ГНОЙНОГО МЕНИНГИТА(73) Патентообладатель Республиканский научнопрактический центр Кардиология(57) Способ моделирования острого гнойного менингита, включающий забор у подопытного животного спинномозговой жидкости с последующим интратекальным введением микробной субстанции, отличающийся тем, что в качестве микробной субстанции вводят липополисахарид клеточной стенки Е(56)0624376 1, 1994.2068270 1, 1996.950853 , 1997. Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для построения модели острого гнойного менингита (ОГМ). Наиболее близким к заявляемому по совокупности признаков и достигаемому результату является способ моделирования острого гнойного менингита, включающий забор у подопытного животного, например кролика,спинномозговой жидкости с последующим введением микробной субстанции, а именно суточной агаровой культуры интратекально, в большую цистерну мозга. Микробную субстанцию вводили в объеме 0,5 мл. Развитие заболевания характеризовалось специфической клинической картиной, а также изменением состава ликвора(повышение цитоза и содержание белка) (Петрова М.А., Королева В.Г., Березина Е.К. Экспериментальный гнойный менингит и его лечение антибиотиками //Антибиотики. - 1974. -5. - С. 422-427). Однако этот способ не дает возможности получить универсальную экспериментальную модель ОГМ, которая отражала бы все клинические особенности течения заболевания, так как получаемая модель во многом определяется величиной инфицирующей дозы и наличием примесей в микробной субстанции - агар-агаре. Кроме того, модель трудоемка в воспроизведении. Задача, на решение которой направлено изобретение, заключается в построении универсальной, легко воспроизводимой и лабораторно сопоставимой с клинической картиной течения заболевания экспериментальной модели ОГМ, пригодной для использования в клинико-экспериментальных целях. Техническим результатом, который может быть получен при реализации изобретения, является отчетливое лабораторное соответствие построенной модели ОГМ клинической картине течения заболевания. Поставленная задача решается следующим образом. В способе моделирования острого гнойного менингита, включающем забор у подопытного животного спинномозговой жидкости с последующим интратекальным введением микробной субстанции, согласно изобретению, в качестве микробной субстанции вводят липополисахарид (ЛПС) клеточной стенки Е. . Способ осуществляют следующим образом. Для построения модели острого гнойного менингита берут подопытное животное, например кролика, которому с целью обезболивания внутривенно вводят диазепам. Затем из большой цистерны мозга забирают спинномозговую жидкость и интратекально вводят липополисахарид клеточной стенки Е.в дозе 50 мг. Примеры осуществления способа. 4907 1 Пример. Для построения модели острого гнойного менингита отбирают 15 беспородных кроликов весом 30003500 г. Перед началом опыта для анальгезии животным внутривенно вводят диазепам. Затем у каждого кролика из большой цистерны мозга забирают 0,5 мл спинномозговой жидкости (СМЖ) и интратекально вводят липополисахарид клеточной стенки микроорганизма Е.0111 В 4 , растворенный в 0,5 мл физиологического раствора. Наблюдение ведут в течение 7 суток. Критериями эффективности опыта являются следующие показатели развивающаяся клиническая картина температура тела кроликов в динамике изменение веса животных до и после опыта исследование СМЖ на цитоз, белок, глобулиновую реакцию (реакцию Панди) число лейкоцитов и характер лейкоцитарной формулы крови бактериоскопическое исследование крови и СМЖ (в том числе на грибковую флору). Введение кроликам липополисахарида клеточной стенки Е.интратекально вызвало у них развитие гнойного менингита. Уже через 6-8 ч наблюдалась типичная клиническая картина. У всех 15 животных отмечались адинамия и мышечное напряжение. Кролики слабо или вообще не реагировали на звук. 10 животных отказались от еды, у 15 - отмечено учащение дыхания, у 12 - тахикардия, у 11 - судороги и парез задних конечностей. Температура тела кроликов до введения липополисахарида клеточной стенки Е.колебалась в пределах 38,5-39,5 С. Через 6 ч от начала опыта она увеличивалась на 1-2 С и оставалась высокой в последующие дни болезни. Перед гибелью температура тела животных всегда падала значительно ниже нормы. У выздоровевших кроликов температура нормализовалась по мере исчезновения клинических симптомов заболевания. Вес животных за время опыта снижался на 263-420 г. Через сутки после введения липополисахарида клеточной стенки Е.отмечены значительные изменения со стороны СМЖ и крови. В СМЖ наблюдали плеоцитоз, большое количество белка, резко положительную реакцию Панди, в крови - лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево. У выживших кроликов кровь нормализовалась на 5-6 день наблюдения, в ликворе на 7 сутки отмечалось повышенное содержание белка и цитоз. У всех погибших животных определен диффузный гнойный цереброспинальный менингит и менингоэнцефалит. Вещество мозга было отечно, оболочки гиперимированы. На основании головного и продолговатого мозга оболочки тусклые, отмечено желатинозное пропитывание оболочек и вещества. У выживших кроликов при исследовании отмечены остаточные явления перенесенного менингита и менингоэнцефалита. Для сравнения результатов, полученных заявляемых способом, взята контрольная группа животных в количестве 6 кроликов, которым проведено интратекальное введение фосфатно-солевого буферного раствора с дальнейшим клинико-лабораторным наблюдением за их состоянием. За время наблюдения за животными не было замечено каких-либо особенностей в их поведении кролики по-прежнему оставались активными, четко реагировали на звук, имели сохраненный аппетит. Температура тела оставалась в пределах нормы. Через сутки после введенияв спинномозговой жидкости не было каких-либо существенных изменений. Таким образом, заявляемый способ имеет следующие преимущества отчетливую фазовую клиническую картину заболевания ярко выраженные лабораторные изменения легкую воспроизводимость в эксперименте. Вышесказанное свидетельствует о клинической и лабораторной репрезентативности полученной экспериментальной модели. Гнойный менингит кроликов, вызванный введением липополисахарида клеточной стенки Е. , представляет большой интерес как модель для изучения воспалительных поражений мозговых оболочек. Ее ценность определяется в первую очередь возможностью воспроизводить гнойный менингоэнцефалит, не осложненный сепсисом, для проведения экспериментальной терапии с последующими клиническими сопоставлениями. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.