Способ выявления нарушения цитокинеза, связанного с радиационным фактором, в популяции лимфоцитов периферической крови детей

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ ЦИТОКИНЕЗА, СВЯЗАННОГО С РАДИАЦИОННЫМ ФАКТОРОМ, В ПОПУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ДЕТЕЙ(71) Заявитель Научно-исследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии(73) Патентообладатель Научно-исследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии(57) Способ выявления нарушения цитокинеза, связанного с радиационным фактором, в популяции лимфоцитов периферической крови, детей, включающий лимфоцитометрический анализ мазков капиллярной крови,окрашенных по Романовскому, при котором анализируют 100 клеток, выявляют лимфоциты с диаметром 13,5 мкм и более у детей от 1 года до 7 лет и свыше 10 мкм у детей от 7 до 15 лет и при их количестве 15 и более выявляют нарушение цитокинеза.(56)2047177 С 1, 1995.2080597 1, 1997.92000949 , 1995.98/05763 1.98/06422 1.5615159 , 1981. Ярмоненко С.П. Радиобиология человека и животных. - М. Высшая школа, 1988. Реакции клеток на облучение. Клеточная радиочувствительность. - С. 57-79. Люцко А.М. Фон Чернобыля. - Мн. Белорусская советская энциклопедия имени П. Бровки, 1990. Радионуклиды в организме человека. - С. 25-35 Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики. Наиболее известен способ выявления нарушения цитокинеза в популяции эритроцитов периферической крови путем прямого микроскопического анализа эритроцитов 1. Указанный способ является прототипом по отношению к заявляемому. Однако способ-прототип не позволяет точно выявить нарушение цитокинеза в популяции лимфоцитов периферической крови у детей, связанных с радиационным фактором. Задачей заявляемого способа является повышение точности. Поставленная задача достигается следующим образом. Способ выявления нарушения цитокинеза, связанного с радиационным фактором, в популяции лимфоцитов периферической крови детей, включающий лимфоцитометрический анализ мазков капиллярной крови, окрашенных по Романовскому, при котором анализируют 100 клеток, выявляют лимфоциты с диаметром 13,5 мкм и более у детей от 1 года до 7 лет и свыше 10 мкм у детей от 7 до 15 лет и при их количестве 15 и более выявляют нарушение цитокинеза. 4075 1 На основании проведенных цитоморфологических исследований на большой популяции детей (1522 человека) в возрасте от 1 года до 15 лет, из них 699 человек вошли в контрольную группу, установлено, что в периферической крови детей встречаются не только малые лимфоциты, имеющие диаметр 7-9 мкм, средние и большие широкоцитоплазменные, размер которых может достигать 12-13 мкм у детей 1-7 лет, но и лимфоциты с диаметром свыше 13 мкм. У детей 1-7 лет большие, так называемые широкоцитоплазменные лимфоциты считают нормой по возрастной физиологии крови, поэтому, размер свыше 13,5 мкм взят в качестве диагностического теста у детей от 1 года до 7 лет. Выявлено, что у детей от 7 до 15 лет в норме встречаются лимфоциты, имеющие диаметр 7-9 мкм, поэтому в указанной группе в качестве диагностического теста могут быть взяты лимфоциты с диаметром свыше 10 мкм. Количественный критерий, составляющий 15 клеток от 100 проанализированных, взят нами потому,что у детей контрольной группы от 1 года до 7 лет лимфоциты с диаметром свыше 13,5 мкм и у детей от 7 до 15 лет лимфоциты с диаметром свыше 10 мкм встречались не более, чем в 10 клеток, по сравнению с частотой встречаемости более, чем в 15 клеток у детей, проживающих на радиационно-загрязненных территориях. Пример выполнения. Обследована группа детей, проживающих в г.п. Брагин, у которых выявлены лимфоциты в мазке периферической крови, взятой из пальца и окрашенной по Романовскому 2, с диаметром более 13,5 мкм у детей от 1 года до 7 лет и лимфоциты с диаметром свыше 10 мкм у детей от 7 до 15 лет. Таня . 11 лет цитометрический анализ лимфоцитов периферической крови позволил выявить 26,0 лимфоцитов с диаметром свыше 10 мкм. Заключение инкорпорированы долгоживущие радионуклиды Маша З. 5 лет - 24,0 лимфоцитов с диаметром свыше 13,5 мкм. Заключение инкорпорированы долгоживущие радионуклиды Жанна Ш. 8 лет - 18,5 лимфоцитов с диаметром свыше 10 мкм. Заключение инкорпорированы долгоживущие радионуклиды Коля Т. 3 лет - 39,5 лимфоцитов с диаметром свыше 13,5 мкм. Заключение инкорпорированы долгоживущие радионуклиды Витя Д. 4 лет - 32,5 лимфоцитов с диаметром свыше 13,5 мкм. Заключение инкорпорированы долгоживущие радионуклиды. Для подтверждения инкорпорации организма радионуклидами у этих детей был проведен спектральный анализ крови и мочи, который выявил наличие искусственных радионуклидов в организме в крови - цезий 134, цезий-137, цирконий-95, сурьма-125, серебро-110, активность которой составила 3,8 х 10-9 - 4,8 х 10-8 Ки/л. Суммарная радиоактивность у этих детей, определявшаяся с помощью счетчика СРП, составила от 120 до 3060 мкР/ч и по цезию-137 с помощью счетчика СИЧ - от 0,01 до 1,66 мкКи/организм. В моче,кроме перечисленных радиоизотопов, обнаружены йод-125, углерод-14, рутений-106, церий-144, цинк-65. В данном случае увеличение лимфоцитов обусловлено радиационным воздействием, возникновение которых связано с нарушением цитокинеза. Следовательно, имеется радиационно-индуцированное поражение лимфоцитов периферической крови. Таким образом, по сравнению с прототипом заявляемый способ обладает следующим преимуществом позволяет выявлять нарушение цитокинеза, связанного с радиационным фактором. Источники информации 1. Кост Е.А. Определение диаметра эритроцитов // Справочник по лабораторным методам исследования.М. Медицина, 1975. - С. 28. 2. Кост Е.А. Приготовление, фиксация и окраска мазков // Справочник по лабораторным методам исследования. - М. Медицина, 1975. - С. 41. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.