Полимерный коньюгат камптотецина, производная 20-0-ациламинокамтотецина

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ(71) Заявитель ФАРМАЦИЯ энд АПДЖОН С.п.А.(73) Патентообладатель ФАРМАЦИЯ энд АПДЖОН С.п.А.(57) 1. Полимерный конъюгат камптотецина, который является растворимым и обладает противоопухолевой активностью, отличающийся тем, что состоит в основном из а) от 60 до 99 мол.-(2-гидроксипропил)метакрилоиламидных звеньев, представленных формулой) от 1 до 40 мол.20-0-(-метакрилоилглициламиноацил)камптотециновых звеньев, представленных общей формулой где группаявляется пространственной группой, имеющей соответствующие концевые амино- и карбонильные группы, которые разделены, по меньшей мере, тремя атомами, и ОСРТ представляет собой остаток камптотецина общей формулы где- водород или 2 в положении 9 молекулы камптоцетина, при этом С-20-гидроксигруппа камптотецина связана с концевой карбонильной группой пространственной группы , аотмечена связь С-20 гидроксигруппы камптотецина с концевой карбонильной группой пространственной группы , и где- гидроксигруппа или остаток формулы НСН 2 СН(ОН)СН 3. 2. Конъюгат по п. 1, отличающийся тем, что пространственную группувыбирают из А 1 а-1 у,Ре-1 у, Ре-Ре, -1 у, -А 1 а, Ре-А 1 а, -Ре, е-А 1 а, е 1 у, Ре-Ре-е, 1 у,е-Т-А 1 а, Ре-1 у-Ре, Ре-Ре-1 у и 1 у-Ре. 3. Конъюгат по п. 1, отличающийся тем, что пространственная группапредставляет группу формулы , в которойявляется С 3 С 6 линейной или разветвленной алкильной группой или А 1 а 1 уСО-, Ре-1 у-НСО-, Ре-РеСО-, -1 у-НСО-, а 1-А 1 а-НСО-, Ре-А 1 аНСО-, -Ре-НСО-, е-А 1 а-НСО-, е-е-1 у-НСО-, Ре-Ре-е-НСО-, е-1 у-НСО-, Ре-Т-А 1 а-НСО-, Ре-1 у-Ре-НСО-, Ре-Ре-1 у-НСО- или РРе-НСО-, в которойимеет те же значения, которые указаны выше. 4. Конъюгат по одному из пп. 1-3, отличающийся тем, что в нем присутствует от 1 до 10 мол.звеньев общей формулы . 5. Конъюгат по одному из пп. 1-4, отличающийся тем, что содержание камптотецина составляет от 1 до 10 . 6. Производная 20-0-ациламинокамтотецина общей формулыНОСРТ Настоящее изобретение относится к водорастворимому полимерносвязанному камптотецину и производным полимерносвязанного камптотецина, наделенным противоопухолевой активностью. Камптотецин представляет алкалоид, выделенный из листьев и корыизвестны также другие аналоги камптотецина, которые получены полусинтезом или полным синтезом из камптотецина смотри . . . . 94(10), 3631, 1972, . . . . (7), 404, (1970) патент США 4981969(. 1, 1991), патент США 5049668 (. 17, 1991). Камптотецин имеет пентациклическую структуру, состоящую из системы конденсированных колец, образующей хинолиновое кольцо (кольца А и В), пирролидиновое кольцо (кольцо С), пиридиновое кольцо(кольцо ) и -гидроксилактоновую составляющую (кольцо Е). Камптотецин и несколько его производных, замещенных в кольце А, проявляют антиопухолевую активность против множества плотных опухолевых линий, включая клеточные линии, невосприимчивые к химиотерапевтическим средствам (смотри . . . 30, 770 (1990). 28, 192(1991). Камптотецин, а также большинство его производных практически нерастворимы в наполнителях, подходящих для парентерального введения, из-за слабой основности атома азота хинона. Предлагалось несколько водорастворимых пролекарств для того, чтобы солюбилизировать камптотецин, например, производные 200-фосфата или 20-0-ациламино, которые можно протонировать посредством минеральных кислот, обеспечивая таким образом растворимость в воде смотри патент США 4943579 (. 24, 1990). Введение таких лекарственных средств связано с побочным токсическим действием, включая гематологическое и желудочно-кишечное. Были предприняты многочисленные попытки для улучшения терапевтического индекса камптотецина путем модификации структуры. Настоящее изобретение обеспечивает полимерные конъюгаты камптотецина, которые являются водорастворимыми и обладают противоопухолевой активностью,и пониженной токсичностью. Более конкретно, изобретение обеспечивает полимерный конъюгат, который обозначен здесь как А, и который состоит по существу из,2 в которой /А/ представляет пространственную группу, имеющую соответствующие концевые амино и карбонильные группы, которые разделены, по крайней мере, тремя атомами, и О-СРТ представляет остаток камптотецина, при этом С-20 группа камптотецина связана с концевой карбонильной группой пространственной группы /А/ и в которойпредставляет гидрокси или остаток формулы 2-(ОН)-СН 3. Изобретение также обеспечивает способ получения полимерного конъюгата, который определен выше,при этом способ включает взаимодействие производной 20-0-ациламино-камптотецина формулы 7 Н/А/ - ОСРТ,7 в которой /А/ и О-СРТ являются такими, как они определены выше, с полимером, состоящим по существу из,4 в которой 2 представляет (а) остаток активного сложного эфира или (в) гидрокси и возможное замещение остаточных групп активного сложного эфира 1-амино-2-пропанолом. Полимерный конъюгат А содержит -(2-гидроксипропил)метакрилоиламидные звенья, представленные формулой 1, в количестве 60 мол.или выше, например, по крайней мере, 80 мол.или, по крайней мере,85 мол. . Эти звенья могут присутствовать в количестве от 91 до 98 мол. . Конъюгат может содержать от 1 до 40 мол.20-0-(-метакрилоилглициламиноацил)камптотециновых звеньев, представленных формулой 2,например от 1 до 20 мол.этих звеньев. Конъюгат может содержать от 1 до 8 мол. , например от 2 до 6 мол.этих звеньев. Пространственная группа /А/ может иметь от трех до двенадцати, например от шести до девяти атомов. Обычно группа является чувствительной к внутриклеточному гидролизу. Предпочтительно она является устойчивой к внеклеточному гидролизу. Пространственная группа может быть пептидной промежуточной группой, содержащей, например, от 1 до 4 или от 2 до 4 аминокислотных остатков. Промежуточная группа может, таким образом, быть дипептидом, трипептидом или тетрапептидом. Предпочтительно, пространственную группу /А/ выбирают из А 1 а-1 у, Ре-1 у, Ре-Ре, -1 у, А 1 а, Ре-А 1 а, -Ре, е-А 1 а, е 1 у, Ре-Ре-е, 1 у, е-Т-А 1 а, Ре-1 у-Ре, РеРе-1 у и 1 у-Ре. Альтернативно пространственная группа /А/ представляет группу формулы 3, в которойпредставляет С 3 С 6 линейный или разветвленный алкил, например, -(СН 2)-, в которомравно 3, 4, 5 или 6. Альтернативно пространственная группа /А/ является группой формулы А 1 а-1 уСО-, Ре-1 уНСО-, Ре-РеСО-, -1 у-НСО-, а 1-А 1 а-НСО-, Ре-А 1 а-НСО-, -Ре-Н-СО-, е-А 1 а-НСО-, е-е-1 у-НСО-, Ре-Ре-е-НСО-, е 1 у-НСО-, РеТ-А 1 а-НСО-, Ре-1 у-Ре-НСО-, Ре-Ре-1 у-НСО- или РРе-НСО-, гдеимеет те же самые значения, которые указаны выше. Остаток камптотецина обозначен О-СРТ. Камптотецин может быть самим камптотецином или его аналогом, например А-кольцевым аналогом. Такой А-кольцевой аналог представляет, таким образом, камптотецин, замещенный в А-кольце. Камптотецин может быть в природной -форме или в -форме или в смеси и -формы (рацемическая смесь). Соответствующие остатки камптотецина О-СРТ обозначены формулой 5 в которой 1 представляет, например, водород, гидрокси- или амино-, или метилендиоксигруппу, связанную с двумя смежными атомами углерода в А-кольце. Предпочтительно 1 представляет водород, 9-, 10-, 11- или 12-гидрокси-, 9- или 10-нитро-, 9- или 10-амино- или 10-, 11-метилендиокси. Более предпочтительными являются остатки камптотецина формулы 6 в которой 1 является таким, как он определен выше. Предпочтительно звенья формулы 2 присутствуют в количестве от 1 до 10 мол. , например от 0,5 до 5 мол. . Также предпочтительно, чтобы содержание камптотецина составляло от 1 до 10(вес/вес), более предпочтительно от 4 до 8(вес/вес) относительно полимерного конъюгата. Изобретение также обеспечивает производную 20-0-ациламинокамптотецина формулы 7, которая определена выше. Содержание активного лекарственного вещества, например камптотецина или его А-кольцевого аналога,в полимерных конъюгатах изобретения определяют(жидкостной хроматографией высокого давления) или спектроскопическим анализом поглощательной способности. Полимерные конъюгаты камптотецина и его А-кольцевые аналоги, описанные в настоящем изобретении,наделены улучшенной водорастворимостью и пониженной токсичностью. Конъюгаты проявляют хорошую водорастворимость, биосовместимость и выделяют камптотецин в плазму или после усвоения в клетки путем ферментативного расщепления. Биологическая активность Сополимер -(2-гидроксипропил)метакриламида, 20-0-/-метакрилоилглицил/камптотецина и -(2 лейцилглицил) камптотецина и -(2-гидроксипропил)метакрилоилглицинамида (А 2) испытывали на голой мыши, которой сделали пересадку рака толстой кишки/НТ 29 (Таблица 1), и на преждевременно рожденной мыши с запущенной мышиной ретикулоклеточной саркомой М 5076 (Таблицы 2 и 3) в сравнении со свободным камптотецином (СРТ). При сравнении с камптотецином для производной полимерносвязанного камптотецина А 2 наблюдали во всех экспериментах более высокую ударную активность. Заслуживает внимания тот факт, что в эксперименте с раком толстой кишки /НТ 29 обнаружили вылеченную мышь. Противоопухолевую активность испытывали при той же самой схеме лечения для А 2 и СРТ. Следует отметить, что было найдено, что полимерносвязанный камптотецин А 2 сильно растворим в воде и растворим в физиологическом растворе, и его вводили внутривенно, тогда как СРТ растворяли в смеси воды и 80. Получение лекарства и его введение Соединение А 2 непосредственно перед использованием растворили в дистиллированной воде и концентрацию проверили спектрофотометрически при 370 нанометрах (Е 157,18). Камптотецин (СРТ) растворили в дистиллированной воде 10 раствором . Лечение осуществляли внутривенно в количестве 10 мл/кг массы тела, а контрольную мышь подвергли обработке дистиллированной водой. 4 3694 1 Опухоли Рак толстой кишки пересадили подкожно швейцарской голой мыши, используя 15-20 мг опухолевых клеток. Мышиную ретикулоклеточную саркому М 5076 поддерживали путем последовательных внутримышечных пассажей и подкожной пересадки (5 х 105 клеток/мышь) сходной мыши С 57 В 1/6. Все животные были от, , Италия. Использовали 10 обычных мышей/группа и 8 мышей с атимией. Обычные мыши весили от 20 до 22 г и их поддерживали при стандартных лабораторных условиях. Мышиную колонию при определенном режиме испытывали на отсутствие антител, согласно перечню патогенных микроорганизмов, включая гепатит,вирус и. Оценка противоопухолевой активности и токсичности Развитие опухоли определяли посредством штангенциркуля, и вес опухоли подсчитывали согласно. (смотри. . . 3,3(2) . 3, -103, 1972). Противоопухолевую активность выражали в виде процентного содержания угнетения роста опухоли ( Т/), используя следующую формулу(средний вес опухоли подвергнутой лечению мыши)100(средний вес опухоли контрольной мыши) Среднее увеличение времени жизни (Т/С ) вычисляли, используя следующую формулу(среднее время жизни подвергнутой лечению мыши)100(среднее время жизни конторольной мыши) Вылеченными мышами были мыши без опухоли в конце эксперимента. Токсичность оценивали на основе уменьшения массы тела и макроскопических данных аутопсии, главным образом с точки зрения уменьшения размера селезенки и печени. Таблица 1 Противоопухолевая активность соединения А 2 в сравнении с камптотецином (СРТ) против рака толстой кишки НТ/29 Соединение(2) количество смертных случаев от токсичности (общее количество) мышей(3) мыши, не имеющие опухоли через 90 дней после имплантации опухоли. Таблица 2 Противоопухолевая активность соединения А 2 в сравнении с камптотецином (СРТ) против ранней мышиной ретикулоклеточной саркомы М 5076(2 ) Ингибирование(3) опухоли Т/С,Соединение Доза, мг/кг (1) Схема лечения Токсичность А 2 7,5 1,6,9 100 171 0/10 СРТ 7,5 1,6,9 100 165 0/10(2) количество смертных случаев от токсичности/ общее количество мышей(3)угнетения роста опухоли оценивали через одну неделю после последней терапии. Таблица 3 Противоопухолевая активность соединения А 2 в сравнении с камптотецином (СРТ) против прогрессирующей мышиной ратикулоклеточной саркомы М 5076. Схема применения внутривенной терапии на 16, 20, 24, 28, 31 и 35 день Доза, мг/кг(1) Ингибир. опухоли(3) Т/С,10,0 80 174 А 2 25,0 95 183 СРТ 7,5 72 173(2) количество смертных случаев от токсичности (общее количество) мышей(3)угнетения роста опухоли оценивали на 34-й день. 3694 1 Токсичность Токсичность сополимера -(2-гидроксипропил)метакриламида, 20-0-/-метакрилоилглицинафенилаланил-лейцилглицил/камптотецина и -(2-гидроксипропил)метакрилоилглицинамида (А 2) оценивали на здоровых мышах 571/, подвергнутых внутривенному лечению, в сравнении с камптотецином (СРТ). Значение 10(1) и 50(2) для мышей 571/ были следующими Соединение 10, мг/кг 50, мг/кг А 2 129 151 СРТ 16,9 43,4(2) 50 доза, включающая 50 мертвых мышей Низкая токсичность производной полимерносвязанного камптотецина А 2 дает возможность применять повышенные дозы продукта и достигнуть эквивалентных или улучшенных результатов по сравнению с таковыми с камптотецином. Полимерносвязанные камптотецины обладают противоопухолевой активностью. Они ингибируют топоизомеразу . Они пригодны для лечения лейкемии и в особенности опухолей толстой и прямой кишки. Следовательно, можно лечить человека или животное способом, включающим введение им терапевтически эффективного количества полимерного конъюгата изобретения. Таким образом, можно улучшить состояние человека или животного. Диапазон принимаемой дозы зависит от способа применения лекарственного средства, от возраста, веса и состояния пациента, подвергнутого лечению. Полимерные конъюгаты обычно вводят парентеральным путем, например, внутримышечно, внутривенно или в виде шарика. Подходящий диапазон дозы составляет от 1 до 1000 мг камптотецина на м 2 площади поверхности тела, например, от 10 до 50 мг/м 2. Полимерные конъюгаты вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем могут образовать лекарственные препараты. Обычно полимерные конъюгаты создают для парентерального введения, например, путем растворения в воде для инъекции или физиологического раствора. Последующие примеры иллюстрируют изобретение без ограничения его. По всему описанию аминокислотные остатки показаны трехбуквенным кодом, в соответствии с . . . 138, 9-37, 1984. Устойчивость полимерных конъюгатов в мышиной плазме или плазме крови человека оценивали следующим образом к 1 мл мышиной плазмы или плазмы крови человека добавили различные концентрации полимерного конъюгата изобретения А и в соответствующие периоды времени (24, 48, 72, 96 часов) собрали 100 мл пробы и хранили при -70 С до дальнейшей обработки. Каждую пробу экстрагировали путем добавления 100 мл 0,25 М фосфорной кислоты, 500 мл Н 3 и 700 мл этилацетата и энергичного встряхивания в течение 20 минут при 4 С. После этого пробу центрифугировали при 15000 х г в течение 10 минут и всплывшее наверх отделили. К остатку добавили 300 мл 3 и 500 мл центрифугировали при 15000 х г в течение 10 минут. Всплывшее наверх отделили. Органические фазы объединили и выпарили, используя высоковакуумную центрифугу. Пробу извлекли, путем добавления 500 мл МеОН/воды рН 2 (70/30 по объему) и инжектировали в аппаратуру для жидкостной хроматографии высокого давления для определения общего процентного содержания лекарства. СистемаКолоннаС 103,9 х 300 мм Скорость потока 1,5 мл/мин Детекторспектрофотометрическая флюоресценция 650-40 ( ) эмиссия 434 нм (щель 5) возбуждение 370 нм (щель 5) Инжекция 10 л Подвижная фаза 51,5 МеОН 47,5 воды, 1 фосфорной кислоты. Пример 1. 6 тритилгексаноил-п-нитрофениловый эфир (8 с)(65)3-(2)5-64 О 2 6-Аминокапроновую кислоту (6,5 г, 50 миллимолей), суспендированную в смеси сухого хлороформа (75 мл) и сухого ацетонитрила (15 мл) добавили к триметилсилилхлориду (6,3 мл, 50 миллимолей) и держали под флегмой в течение 2 часов при сильном перемешивании. После этого смесь охладили и добавили один за другим триэтиламин (13,7 мл, 100 миллимолей) и тритилхлорид (14 г, 50 миллимолей), растворенный в сухом хлороформе (100 мл). Смесь выдерживали при комнатной температуре всю ночь, затем добавили метанол (10 мл) и реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением. Остаток промыли холодным 5 водным раствором лимонной кислоты (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу отделили и экстрагировали холодным 1 водным раствором гидроксида натрия (200 мл). Водную фазу отделили, охладили льдом, уксусной кислотой довели рН до 5 и экстрагировали этилацетатом (2 х 100 мл). Органический растворитель удалили под пониженным давлением для получения 6-тритилкапроновой кислоты (16 г) после кристаллизации из этилацетата. Это вещество растворили в безвод 6 3694 1 ном тетрагидрофуране (150 мл) и обработали р-нитрофенолом (5,6 г, 400 миллимолей) и дициклогексилкарбодиимидом (8,4 г, 40 миллимолей) при 0 С в течение 1 часа при перемешивании, затем всю ночь при 8 С. После этого реакционную смесь отфильтровали, охладили при 0 С в течение 2-х часов и фильтровали опять. В конечном счете органический растворитель удалили под пониженным давлением и остаток кристаллизовали этиловым эфиром для получения названного соединения 8 с (16,4 г). Осуществили(тонкослойную хроматографию) на пластинах 245 и элюировали систему этиловым эфиром/н-гексаном(11 по объему)0,6 - /// 495 Н 1 ЯМР (90 , 3) 1,1-1,9 (, 6 Н), 2-2,5(, 4 Н), 5,7-5,9 (, 2, -), 7,2-7,7 (, 15). Пример 2. 20-0-(6-аминогексаноил)камптотецин (7) Камптотецин (6, 1, 0, 7 г, 2 миллимоля) растворили в сухом диметилсульфоксиде (100 мл) и добавили к 6-тритилгексаноил-п-нитрофениловому эфиру (8 с, 2 г, 4 миллимоля), полученному, как описано в примере 1, и 4 диметиламинопиридину (0,24 г, 2 миллимоля). Реакционную смесь поддерживали при комнатной температуре в течение 48 часов, затем разбавили хлороформом (400 мл) и промыли водой (3 х 100 мл). Органическую фазу отделили, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до маленького объема под пониженным давлением. Необработанный продукт подвергли мгновенной хроматографии на колонке с кремниевой кислотой при элюировании хлороформом до получения 20-0-(6 тритилгексаноил)камптотецина (0,6 г). Осуществили(тонкослойную хроматографию) на пластинах 245 при элюировании системы хлороформом-метанолом(955 по объему).0,4. -защищенную производную обработали 95 три-фторуксусной кислоты (10 мл) при комнатной температуре в течение 50 минут. После удаления кислоты под пониженным давлением названное соединение 7 с собрали этиловым эфиром. Выход составил 0,4 г. Осуществили тонкослойную хроматографию на пластинах 245 при элюировании системы метиленхлоридом/метанолом/уксусной кислотой/водой (802073).0,6 - / /МН/ 462. Пример 3. 20-0-(-Фенилаланиллейцилглицил)камптотецин (7 в)-тритилфенилаланиллейцилглицил-п-нитрофениловый эфир (8 а, 1,4 г, 2 миллимоля), полученный,как было ранее описано в заявке Великобритании 9309663.4, камптотецин (6 а, 1, 0,35 г, 1 миллимоль) и 4-диметиламинопиридин (0,12 г, 1 миллимоль) растворили сухим диметилсульфоксидом (50 мл) и перемешали при комнатной температуре в течение 20 часов. После этого реакционную смесь разбавили хлороформом (400 мл) и промыли водой (3 х 100 мл). Органическую фазу отделили, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали до маленького объема под пониженным давлением. Необработанный продукт подвергли мгновенной хроматографии на колонке с кремниевой кислотой при элюировании смесью хлороформа и метанола (99,5/0,5 по объему). Собрали фракции, содержащие -защищенную производную названного соединения, концентрировали до остаточного влагосодержания, растворили в 75 водном растворе уксусной кислоты (30 мл) и поддерживали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь обработали твердым кислым углекислым натрием до рН 7 и экстрагировали хлороформом (400 мл). После удаления органического растворителя названное соединение 7 в выкристаллизовали из этилового эфира. Выход составил 0,16 г. Осуществили тонкослойную хроматографию на пластинах 245 при элюировании системы хлороформом/метанолом (91 по объему)0,35.-тритилфенилаланиллейцилглицин-п-нитрофениловый эфир (8 а, 1,14 г, 2 миллимоля), 9 аминокамптотецин (6 в,2, 0,363 г, 1 миллимоль), 4-диметиламинопиридин (0,12 г, 1 миллимоль) провзаимодействовали в сухом диметилсульфоксиде (20 мл) при комнатной температуре, как описано в примере 3, до получения названного соединения 7 с (0,31 г). Осуществили тонкослойную хроматографию на пластинах 245 , систему элюировали хлороформом/метанолом (91 по объему)0,2. Сополимер -(2-гидроксипропил)метакриламида и -метакрилоилглицин-п-нитрофенилового эфира (0,15 г), полученного, как описано в . ., 178, 2159 (1977), и содержащего 2,7 х 103 эквивалентов п-нитрофенилового эфира, провзаимодействовал с 20-0-(6-аминогексаноил)камптотецином (7 с, 18 мг), полученным, как описано в примере 2, в сухом диметилсульфоксиде (1 мл) при комнатной температуре в течение 18 часов, затем с 1-амино-2 пропанолом (2 мл) в течение 1 часа при комнатной температуре. После этого реакционную смесь обработали ацетоном (70 мл). Осадок собрали, опять растворили в безводном этаноле (5 мл) и повторно осадили ацетоном (50 Мл) до получения названного конъюгата А 1 (0,14 г), содержащего 5(вес/вес) камптотецина. После инкубации плазмы конъюгат А 1 выделил через 120 часов 10 камптотецина. 8 Сополимер -(2-гидроксипропил)метилакриламида и -метакрилоилглицин-н-нитрофенилового эфира (0,15 г,содержащий 2,7 х 103 эквивалентов п-нитрофенилового эфира) и 20-0-(глициллейцилфенилаланил)камптотецин (7 в, 20 мг), полученный, как описано в примере 3, провзаимодействовали в сухом диметилсульфоксиде (1 мл), затем с 1-амино-2-пропанолом, как описано в примере 6, до получения названного конъюгата А 2(0,14 г), содержащего 4,8 вес. камптотецина. После инкубации плазмы конъюгат А 2 через 60 часов выделил 100 камптотецина. Пример 7. Сополимер -(2-гидроксипропил)метакриламида, 9-амино-20-0-/-метакрилоилглицилфенилаланиллейцилглицил/камптотецина и -(2-гидроксипропил)метакрилоилглицинамида. Названный конъюгат получили путем взаимодействия сополимера -(2-гидроксипропил)метакриламида и метакрилоилглицин-п-нитрофенилового эфира (0,15 г, содержащий 2,7 х 103 эквивалентов п-нитрофенилового эфира) и 9-амино-20-0-(Глициллейцилфенилаланил)камптотецина (7 с, 20 мг, полученного, как описано в примере 4, в сухом диметилсульфоксиде (1 мл), затем с 1-амино-2-пропанолом, как описано в примере 5. Выход продукта, содержащего 6,3 вес/вес 9-аминокамптотецина, составил 0,14 г. После инкубации плазмы конъюгат 3 через 50 часов выделил 100 камптотецина. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66. 9