Способ введения дилудина в организм молоди длиннопалого рака Astacus leptodactylus Esch.

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ ДИЛУДИНА В ОРГАНИЗМ МОЛОДИ ДЛИННОПАЛОГО РАКА.(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Гончарова Роза Иосифовна Слуквин Александр МихайловичДубурс Гунарс Янович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси(56) ГОНЧАРОВА Р.И. и др. Стратегия развития аквакультуры в условияхвека. Материалы международной научно-практической конференции. Минск, 2004. - С. 292-296. СЛУКВИН А.М. и др. Прыроднае асяроддзе Палесся асаблвасцперспектывы развцця. Зборнк навуковых прац. - Брэст, 2010. - Вып. 3. - Т. 2. С. 91-95. МАЛИКОВА Е.М. и др. Рыбное хозяйство. - 1977. -5. - С. 24-25.2179802 1, 2002.(57) Способ введения дилудина в организм молоди длиннопалого рака., заключающийся в том, что молоди длиннопалого рака. скармливают зоопланктон, выращенный в воде с внесенным дилудином. Изобретение относится к раководству, в частности к разработке ресурсосберегающих биотехнологических приемов повышения выживаемости и биопродуктивности рака. Известно, что препарат дилудин (2,6-диметил-3,5 дикарбэтокси-1,4-дигидропиридин,13194) используется в качестве кормовой добавки для различных видов животных в качестве антиоксиданта и стимулятора роста, а также в качестве комплексона и антимутагена с эффективным ростостимулирующим действием 1-9. Все вышеперечисленные свойства препарата могут быть использованы при промышленном выращивании молоди раков. Учитывая низкие темпы роста и развития ракообразных в условиях естественных водоемов Беларуси, использование кормов с добавкой дилудина для выращивания раков в промышленных масштабах позволит получить большое количество молоди рака, более жизнеспособного и устойчивого к заболеваниям. При выращивании раков на промышленной основе и в аквариумистике для кормления молоди раков используются как живые корма (зоопланктон, водоросли и др.), так и стартовые искусственные многокомпонентные корма 10-13. Известен способ введения препарата дилудин в искусственные корма для гидробионтов путем замешивания с 1 18236 1 2014.06.30 различными компонентами животного и растительного происхождения с дальнейшей грануляцией корма 6. Недостатком искусственных стартовых комбикормов для раков является их высокая стоимость, что обуславливает высокую себестоимость выращенной продукции и низкую рентабельность раководства 10-13. Задачей настоящего изобретения является разработка нового биотехнологического приема повышения выживаемости и продуктивности рака за счет использования установленных ростостимулирующих свойств препарата дилудин и удобного способа его введения в корма для молоди раков. Поставленная задача достигается тем, что в качестве посредника по доставке препарата в организм молоди раков предложено использовать живые пищевые организмы, а именно зоопланктон, доминирующий на 70-80 в кормовом рационе у молоди рака в раннем онтогенезе. При разработке данного способа введения препарата в живые корма для молоди раков были использованы известные свойства препарата дилудин, в частности такие как водонерастворимость мелкодисперсность желтое флюорисцентное свечение в проникающем свете способность образовывать коллоидную массу при его размешивании в воде 1. Эффективность предложенного способа введения препарата дилудин в организм молоди рака для повышения его биопродуктивности посредством доставки с помощью живого зоопланктона с аккумулированным дилудином продемонстрирована на следующих примерах. Пример 1. Аккумуляция дилудина дафниями. Для выращивания зоопланктона, используемого в качестве живого корма для молоди рака, были оборудованы четыре замкнутых устройства с водой (в рыбоводстве они называются дафниевые ямы). В воде этих ям был разведен до коллоидной массы препарат дилудин. Затем туда была посажена маточная культура живого зоопланктона, отловленного в выростных прудах хозяйства. При изучении видового состава отловленного зоопланктона было установлено, что основная биомасса представлена прозрачным ветвистоусым рачком - дафнией ( ). Основной пищей для дафний служат бактерии, одноклеточные водоросли и органические частицы. Питаются дафнии путем отфильтровывания пищевых объектов, создавая токи воды ритмическими движениями грудных ножек. Световая микроскопия дафний, выполненная через 30 мин после их помещения в воду с дилудином, показала, что в кишечнике дафний находится дилудин, дающий четкую желто-зеленую флюорисцентную окраску 1. Как показали дальнейшие исследования, дилудин не оказывал отрицательного воздействия на выживаемость, видовой состав и биомассу зоопланктона в течение месяца наблюдения. Более того, через месяц после начала эксперимента было зарегистрировано увеличение в 2,1 раза численности зоопланктона в опытных ямах по сравнению с контрольными. Это свидетельствует о том, что дилудин стимулирует рост численности и биомассы дафний при их культивировании в дафниевых ямах, то есть проявляет ростостимулирующий эффект. Пример 2. Влияние дилудина, аккумулированного в организме дафний, на рост и развитие молоди рака. Молодь рака выращивали в 12 садках, погруженных в воду и закрытых полиэтиленовыми укрытиями. Перед посадкой личинок рака в садки были изучены их морфометрические показатели. Личинки, посаженные в контрольные и опытные садки, не отличались по линейным и весовым показателям (табл. 1). Молодь рака выращивались в садках с разной плотностью посадки, а именно 15 и 30 экз/м 2. 18236 1 2014.06.30 Для кормления опытной молоди рака при низкой плотности посадки личинок рака в садки вносили по 1 кг живого зоопланктона с отфильтрованным и аккумулированным дилудином, а при высокой плотности посадки личинок рака соответственно по 2 кг. Зоопланктон в контроле (без препарата) задавался личинкам рака в аналогичных опыту количествах. Длительность опытного скармливания личинкам рака живого зоопланктона,с поглощенным дилудином, составляла один месяц (с 01.07 по 30.07.2009 г.). Таким образом, было проведено две серии экспериментов с трехкратным повтором по введению препарата дилудин в организм молоди рака новым способом и изучению его влияния на биопродуктивность рака при низкой и высокой плотностях выращивания. Каждые десять дней анализировались рост и развитие молоди рака, а также их выживаемость и частоты встречаемости морфологических отклонений. Полный гидрохимический анализ проб воды в пруду и садках осуществлялся лабораторией хозяйства раз в декаду. Оперативный гидрохимический контроль в течение эксперимента проводили ежедневно с помощью термооксиметра - 7 (Япония). Таблица 1 Величины линейных и весовых показателей рака в опытных и контрольных сериях перед началом эксперимента (01.07.2009 г.) Опытные садки Морфологическиесадка Длина , (мм) аномалиип/п Плотность посадки личинок 15 экз/м 2 4 7,11,04 5 7,21,04 6 7,21,04 Плотность посадки личинок 30 экз/м 2 10 7,11,05 11 7,31,04 12 7,21,05 18236 1 2014.06.30 Результаты полного гидрохимического анализа в пруду и садках на начало постановки и в ходе проведения экспериментов показали, что вода полностью соответствовала оптимальным параметрам для выращивания молоди раков (табл. 2) 14, 15. На протяжении всего хода эксперимента отклонений от нормы по гидрохимическим показателям в садках не зарегистрировано. Таблица 2 Обобщенные результаты гидрохимических исследований воды с 01.07.2009 г. по 30.07.2009 г. Наименование показателей Температура воды Содержание кислорода Азот аммонийный Аммиак Фосфор Щелочность Сероводород Свободная углекислота Нитриты Нитраты Жесткость Окисляемость Кальций Магний Железо общее Прозрачность Данные двух серий экспериментов по определению оптимальной плотности посадки личинок в садки, а также влиянию дилудина, доставляемого в организм молоди рака посредством скармливания живого зоопланктона, на рост и развитие личинок представлены в табл. 3-5. Таблица 3 Влияние введенного дилудина в живой корм на рост и развитие молоди рака через десять дней после начала эксперимента Контрольные садки Опытные садки Плотность посадки личинок 15 экз/м 2 45 100,0 4, 5, 6 45 13,91,6 0,0340,005 Плотность посадки личинок 30 экз/м 2 90,02,0 10, 11, 12- различия опыта с контролем при плотности посадки раков 15 экз/м 2 достоверны при 0,05- различия опыта с контролем при плотности посадки раков 30 экз/м 2 достоверны при 0,05. 6 Таблица 4 Влияние введенного дилудина в живой корм на рост и развитие молоди рака через двадцать дней после начала эксперимента Контрольные садки Опытные садки Морфологи- Выжива садка Кол-во Длина , Масса ,Кол-во Длина , Масса ,ческие анома- емостьсадка п/п п/п Плотность посадки личинок 1 5 экз/м 2 1, 2, 3 Плотность посадки личинок 30 экз/м 2 7, 8, 9- различия опыта и контроля при плотности посадки личинок 15 экз/м достоверны при 0,05- различия опыта и контроля при плотности посадки личинок 30 экз/м 2 достоверны при 0,05. Таблица 5 Влияние введенного дилудина в живой корм на рост и развитие молоди рака через тридцать дней после начала эксперимента Контрольные садкисадка п/п- различия опыта и контроля при плотности посадки раков 15 экз/м 2 достоверны при 0,05- различия опыта и контроля при плотности посадки раков 30 экз/м 2 достоверны при 0,05. 7 18236 1 2014.06.30 Полученные данные свидетельствуют о том, что плотность посадки 15 экз. молоди раков на 1 м 2 садков является наиболее благоприятной для выращивания сеголетка рака и не оказывает отрицательного воздействия на их продуктивность и выживаемость. Молодь рака при такой плотности посадки хорошо развивается и дает хорошие приросты. В результате месячного эксперимента с дилудином у представителей ракообразных был впервые зарегистрирован ростостимулирующий эффект препарата. Так, при оптимальной плотности посадки личинок в садки величины прироста линейных и весовых показателей у молоди рака к концу эксперимента возросли по сравнению с контролем на 39,6 и на 60,6 , а при высоких плотностях посадки на 20,2 и 26,3 соответственно. Выживаемость молоди раков, получавшей дилудин с живым кормом, была существенно выше (4,4-17,7 ), чем в контрольных вариантах, как при низких, так и при высоких плотностях выращивания личинок. Установлено, что дилудин также способствовал уменьшению частот морфологических отклонений от 4,4 до 6,0 по сравнению с контролем. Таким образом, установлено, что способ введения дилудина молоди рака (.), основанный на опосредованном механизме доставки препарата в организм посредством скармливания ракам живого зоопланктона, способствует повышению биопродуктивности молоди рака за счет увеличения роста и выживаемости, а также снижения частот морфологических отклонений. Источники информации 1. Вальдман А.Р., Дубур Г.Я., Спруж Я.Я. Дилудин - новый антиоксидант-стабилизатор витаминов и стимулятор роста и продуктивности сельскохозяйственных животных//Известия АН Латв. ССР. - 1977. - . 9. - С. 43-61. 2. Гончарова Р.И. Теоретические и практические аспекты антимутагенеза //Молекулярная и прикладная генетика. Т. 1. - Минск, 2005. - С. 21-25. 3. Кужир Т.Д. Антимутагены и химический мутагенез в системах высших эукариот. Минск Тэхналогя, 1999. - 267 с. 4. Наставление по применению дилудина в качестве стимулятора продуктивности сельскохозяйственных животных / МСХ СССР. Главное управление по производству комбикормов и кормовых добавок. Утверждено 16.04.1984. -109-10. - М., 1984. - 2 с. 5. Маликова Е.М., Глаголева Т.П., Бодрова Т.И., Иозепсон У.П., Дубурс Г.Я., Улдрикис Я.Р. Дилудин - стимулятор роста молоди лососевых // Рыбн. хоз-во. - М., 1977. -5. С. 24-25. 6. Гамыгин Е.А., Лысенко В.Я., Скляров В.Я., Турецкий В.И. Комбикорма для рыб производство и методы кормления. - М. Агропромиздат, 1989. - 168 с. 7..,.,.,.,.. -,. - 2002. - . 31. - . 63-66. 8.5016. 9. Новые вещества и технологии для сельского хозяйства. Каталог научно-технической продукции. - Минск, 2007. - 24 с. 10- корма для раков Электронный ресурс - Режим доступа /. - Дата доступа 10.01.2011. 11. Корм для креветок и раков 100 мл Электронный ресурс- Режим доступа //-171794/ - Дата доступа 10.01.2011. 8 18236 1 2014.06.30 12.100 мл - специальный корм для раков и креветок - Электронный ресурс. - Режим доступа ///.1616. 13. Кормдля раков 100 - Электронный ресурс. - Режим доступа.-././/17796. - Дата доступа 10.01.2011. 14. Колмыков Е.В. Инструкция по разведению раков. - Астрахань, 2004. - 30 с. 15. Раколовство и раководство на водоемах европейской части России Справочник / Под ред. О.И. Мицкевич. - Санкт-Петербург, 2006. - 207 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 9