Способ диагностики злокачественного новообразования щитовидной железы

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физики имени Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Скорняков Иван Васильевич Толсторожев Георгий Борисович Бутра Виктор Александрович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физики имени Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси(57) Способ диагностики злокачественного новообразования щитовидной железы, заключающийся в том, что получают фрагмент ткани из патологического очага, экстрагируют из него жироподобные вещества четыреххлористым углеродом, раздавливают до толщины, необходимой для проведения ИК-спектроскопии, удаляют межтканевую жидкость путем высушивания при комнатной температуре, регистрируют ИК-спектр высушенного фрагмента ткани в диапазоне 4000-1600 см-1, осуществляют Фурье-деконволюцию спектра в интервале 1720-1600 см-1, определяют оптическую плотность в максимумах поглощения в интервалах спектра 3400-3200 и 3000-2800 см-1, а также в интервалах спектра 1720-1680 и 1675-1650 см-1 после Фурье-деконволюции, рассчитывают отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3000-2800 см-1 и отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1720-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 и диагностируют наличие злокачественного новообразования щитовидной железы при значении первого из указанных отношений 1,10 или менее и значении второго из указанных отношений 1,00 или более. Изобретение относится к биомедицине, в частности к онкологии, и может использоваться для диагностики злокачественных новообразований щитовидной железы. Известные к настоящему времени диагностические способы, такие как визуальный,пальпаторный, УЗИ, рентгенологический (рентгеноскопия, рентгенография, томография),а также способ магнитно-резонансной томографии и радионуклидной визуализации, способны лишь выявить опухолевидное образование. Полноценный онкологический диагноз опухолевидного образования устанавливается на основании морфологических (цитологи 17763 1 2013.12.30 ческих и гистологических) исследований с детальной характеристикой структуры опухоли во всех ее аспектах. Морфологический диагноз опухоли устанавливается на основании всего комплекса признаков цитологических характеристик, топографии клеток, их отношения к базальным мембранам, сосудам, состояния стромы, играющей роль посредника между новообразованиями и организмом и т.д. Несмотря на сходство, морфологические признаки злокачественности в каждом органе и ткани имеют особенности, которые порой могут существенно варьироваться. Поэтому при дифференциальной диагностике злокачественных опухолей и состояний, стимулирующих злокачественный рост, большое значение имеют клинические данные и данные лабораторных исследований. Сведения о локализации опухоли, темпах ее роста, возрасте пациента в ряде случаев при морфологической диагностике новообразований могут иметь определяющее значение 1. Тем не менее имеющихся морфологических данных в ряде случаев может быть недостаточно для точной верификации патологического (опухолевого) процесса и заключение о доброкачественности или злокачественности может оказаться предположительным 2. Ввиду того факта, что основополагающие процессы жизнедеятельности от одноклеточных организмов до человека реализуются на молекулярном уровне, для выявления признаков наличия в органе злокачественной опухоли, в добавление к перечисленным диагностическим способам, начата разработка спектроскопических способов, которые исследуют патологию органов на уровне строения и взаимодействий молекул 3. Известен способ диагностики злокачественных новообразований по анализу ИК-спектров ДНК, выделенной из фрагментов диагностируемой ткани 4, 5. Способ основан на анализе различий ИК-спектров ДНК в норме и при раке. Эти спектральные отличия обусловлены изменениями в структуре ДНК и увеличением количества гидроксильных радикалов при возникновении в тканях злокачественной опухоли. Фрагмент исследуемой ткани после иссечения мгновенно замораживается в жидком азоте и хранится при температуре 80 С. ДНК выделяют из каждого образца (70-100 мг) по модифицированной методике ионообменной экстракции. Перед осаждением ДНК пропускают через 5,0 мкм 30 фильтр. Затем ДНК промывают в течение 3 ч охлажденным до температуры льда 70 этанолом. Перед проведением ИК спектральных исследований выделенную ДНК растворяют в 10-40 мл особо очищенной дистиллированной воды. 0,2 мл водного раствора ДНК наносят на поверхность окна из 2, размазывают по поверхности окна и высушивают при комнатных условиях, получая размеры пятна не менее 100 мкм по ширине. Затем пластинки из 2 с нанесенными на них образцами ДНК в течение 1 ч подвергают дополнительной лиофильной сушке в струе чистого сухого азота. После осушки образцы ДНК на пластинках помещают в вакуумированные запаянные ампулы и хранят при температуре 80 С. ИК Фурье-спектры ДНК получают с помощью инфракрасного микроскопа-приставки в интервале 2000-700 см-1. Для диагностических целей использован интервал спектра 1750-700 см-1. Каждый спектр нормировался по интенсивности и по положению базовой линии. Для каждого образца ДНК регистрировалось не менее 2 спектров, которые затем усреднялись. Усредненный и нормированный по интенсивности и по положению базовой линии спектр образцов ДНК использовался для дальнейшего статистического анализа. Проведенная статистическая обработка давала совпадение результатов в 8 случаях из 10 для морфологического и спектрального исследований. Таким образом, данный способ достаточно сложен и длителен по времени проведения и обладает малой диагностической эффективностью при сравнении с морфологическим исследованием. Известен способ диагностики рака, который основан на регистрации ИК-спектров поглощения обезвоженных срезов исследуемой и здоровой тканей одного и того же вида и диагностировании ракового заболевания по спектральным различиям между ними 6. 2 17763 1 2013.12.30 Способ состоит в приготовлении среза исследуемой ткани толщиной 10-20 мкм, помещении его на пластинку, прозрачную в инфракрасном интервале длин волн, удалении из среза ткани воды любым известным способом и регистрации спектра в интервале 34001100 см-1. При этом диапазон волновых чисел 3400-3200 и (или) 1700-1600 см-1 используется для быстрого диагностирования рака. Разность значений для волновых чисел максимумов полос поглощения ИК спектра исследуемого образца и нормальной здоровой ткани того же вида в данных диапазонах является диагностическим параметром рака. Если эта разность волновых чисел в пределах погрешности определения прибором волнового числа равна нулю, то исследуемая ткань в норме, при любом неравенстве нулю диагностируется рак исследуемой ткани. Наблюдаемые спектральные изменения исследуемой ткани по сравнению со здоровой в диапазоне 3400-1100 см-1 используются для определения стадии развития ракового заболевания. Они состоят из смещений максимумов некоторых полос поглощения, изменения их относительных интенсивностей, из появления новых полос поглощения. Несмотря на относительную простоту выполнения, в случае диагностирования рака щитовидной железы этому способу присущ ряд недостатков. Спектральные характеристики тканей могут изменяться как при злокачественных, так и при других видах патологических процессов в щитовидной железе. Следовательно, при реализации данного способа важен правильный выбор зоны, где будет браться контрольный образец. При неправильном выборе контрольного образца велика вероятность диагностирования любого патологического процесса в щитовидной железе как злокачественного. Известен способ, включающий регистрацию ИК-спектров и математическую обработку спектральных характеристик обезвоженных срезов из патологических очагов, помещенных на окна, прозрачные в ИК-области спектра, и их сравнение с последующей классификацией образцов клеток и тканей на нормальные, гиперпластические и неопластические с обязательным использованием математических методов многомерного анализа 7. Препараты для исследований изготавливались из материала, взятого из патологического очага при аспирации через тонкую иглу, а также брались мазкиотпечатки удаленных лимфоузлов. Приготавливались также препараты с нанесенными в один слой клетками (с использованием цитоспинового метода). Обезвоженные образцы помещались на прозрачные для ИК-излучения окна из 2 (для спектров пропускания) и на покрытые золотом предметные стекла (для спектров отражения). Цитологические препараты исследовались без дополнительной обработки или после окраски части из них красителями. Гистологические срезы толщиной до 1 мкм изготавливались из залитой в парафин ткани и помещались на окна и покрытие из золота аналогичными способами. При этом одна часть образцов не подвергалась дополнительной обработке, другая фиксировалась в этаноле, третья часть из них фиксировалась и окрашивалась гематоксилином и эозином. Патоморфолог разделял препараты на нормальные, с гиперплазией (легкой,умеренной и выраженной) и опухолевые. Получение инфракрасных спектров осуществлялось на ИК Фурье-спектрометре со встраиваемым в него микроскопом-приставкой. Классификация клеток на нормальные, гиперпластические и неопластические по спектральным данным проведена в интервалах 3000-2800 и 1800-900 см-1. Ввиду незначительных, мало воспроизводимых различий между спектрами образцов, вне зависимости от способа их приготовления, для получения достоверных результатов разделения клеток на классы требовалось применение сложных математических методов обработки спектров на основе многомерного статистического анализа. При этом данный способ не дает прямого ответа о наличии или отсутствии онкологического заболевания. Такое заключение может быть сделано лишь после исследования полученной по данному способу информации о клеточном составе проверяемой биологической ткани. Этот подход аналогичен морфологическим исследованиям, когда по ряду качественных и количественных параметров клеток или тканей ставят диагноз онкологического заболевания. Это существенный недостаток способа. Данный способ имеет также ряд других недостатков. 3 17763 1 2013.12.30 Для проведения классификации клеток одного органа необходим ряд образцов на оптически прозрачных окошках и зеркалах с золотым покрытием в виде специально обработанных парафиновых срезов ткани, а также препаратов из материала пункции с расположением клеток в один слой, для чего необходима специальная технология. После регистрации спектров пропускания и отражения на спектральной аппаратуре,оборудованной приставками для микроанализа, необходима обработка спектральных данных с применением математических методов частичных наименьших квадратов, регрессии основных компонентов, статистической линейной классификации и других подобных методов многомерного анализа с использованием расстояния Махаланобиса в качестве критерия для классификации. Приготовление различных видов образцов для анализа одного органа, регистрация спектров в широком диапазоне длин волн с последующей их математической обработкой значительно снижает скорость процесса диагностики злокачественных новообразований. Классификация нормальных и ненормальных клеток и тканей сделана на основании исследования только лишь ИК-спектров лимфатических узлов собак, больных лимфомой. Не сообщается о результатах классификации клеток и тканей по ИК-спектрам для онкологических заболеваний щитовидной железы. Наиболее близким к заявляемому является способ диагностики злокачественных новообразований, основанный на регистрации спектральных характеристик образцов диагностируемой и контрольной ткани в ИК-области спектра и их сравнении 8. В этом способе образцы анализа получают путем экстрагирования ткани растворителем жироподобных веществ, в частности четыреххлористым углеродом, регистрируют спектр экстракта в диапазоне спектра 4000-3400 см-1 и измеряют оптическую плотность в максимумах поглощения и частоту максимумов поглощения в интервалах спектра 37603650, 3650-3570, 3570-3500 и 3500-3400 см-1. Затем вычисляют отношения оптических плотностей в максимумах поглощения в интервалах спектра 3760-3650, 3650-3570, 35703500 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1. При смещении максимумов поглощения в заданных спектральных интервалах и увеличении отношений оптических плотностей в спектре образца диагностируемой ткани диагностируют злокачественное новообразование. В случае диагностики злокачественных новообразований щитовидной железы этому способу присущ один существенный недостаток. Следует учитывать, что ткань любого органа человека представляют собой многокомпонентную систему, в которой присутствуют белки, липиды, вода, полиуглеводы, гормоны, поступающие по кровотоку продукты биосинтеза и распада, а также лекарства, которые дают пациентам накануне и во время операций. Эти компоненты способны поглощать ИК-излучение и дают свой определенный вклад в совокупный ИК-спектр биологической ткани 3. В процессе экстрагирования ткани растворителем жироподобных веществ растворяются и остаются в растворе экстракта не только липиды, по спектральным характеристикам которых осуществлялась диагностика опухолевидных образований, но и другие вышеперечисленные компоненты биологической ткани. Концентрация побочных компонентов в растворе экстракта определяется их количеством в исследуемой ткани и растворимостью компонентов в используемом растворителе. При диагностике вышеуказанным способом опухолей в таком специализированном эндокринном органе, как щитовидная железа, в растворе экстракта происходит усиленное концентрирование побочных компонентов. Возрастающий вклад побочных компонентов в совокупный ИК-спектр экстракта может привести при реализации этого способа в некоторых случаях к ошибочному диагнозу. Задачей настоящего изобретения является повышение точности и расширение возможностей диагностики злокачественных опухолей в тканях щитовидной железы оптическими методами. 4 17763 1 2013.12.30 Способ диагностики злокачественного новообразования щитовидной железы заключается в том, что получают фрагмент ткани из патологического очага, экстрагируют из него жироподобные вещества четыреххлористым углеродом, раздавливают до толщины, необходимой для проведения ИК-спектроскопии, удаляют межтканевую жидкость путем высушивания при комнатной температуре, регистрируют ИК-спектр высушенного фрагмента ткани в диапазоне 4000-1600 см-1, осуществляют Фурье-деконволюцию спектра в интервале 1720-1600 см-1, определяют оптическую плотность в максимумах поглощения в интервалах спектра 3400-3200, 3000-2800 см-1, а также в интервалах спектра 1720-1680 и 1675-1650 см-1 после Фурье-деконволюции, рассчитывают отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3000-2800 см-1 и отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1720-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 и диагностируют наличие злокачественного новообразования щитовидной железы при значении первого из указанных отношений 1,10 или менее и значении второго из указанных отношений 1,00 или более. Предлагаемый способ диагностики злокачественных новообразований щитовидной железы состоит во взятии фрагмента исследуемой ткани известными в медицине способами, помещении фрагмента в растворитель жироподобных веществ, в частности в четыреххлористый углерод. После удаления из ткани побочных компонентов фрагменты тканей располагают между окнами, прозрачными в анализируемой области спектра, например из 2, и раздавливают. Такими действиями из исследуемых образцов ткани удаляют межтканевую жидкость и достигают необходимой для проведения спектроскопических измерений толщины слоя. Затем известными способами осуществляют сушку образцов и регистрацию ИК-спектров в интервале 4000-1600 см-1. Для разделения спектрального контура в интервале 1720-1600 см-1 на составляющие с помощью программного обеспечения осуществляют Фурье-деконволюцию спектральной кривой. После измерения оптической плотности в максимумах поглощения и расчета величины отношений оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3000-2800 см-1 и оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1710-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 диагностируют злокачественные новообразования щитовидной железы. Сущность предлагаемого изобретения поясняется фигурами, где на фиг. 1 приведен ИК-спектр фрагмента тканей щитовидной железы, взятого непосредственно из патологического очага при папиллярном раке на фиг. 2 приведен ИК-спектр фрагмента тканей щитовидной железы, взятого непосредственно из патологического очага при фиброме (доброкачественная опухоль). на фиг. 3 приведены спектральные кривые фрагмента ткани щитовидной железы, взятого непосредственно из злокачественной опухоли (недифференцированная форма рака) до (сплошная линия) и после их деконволюции (пунктирная линия) на фиг. 4 приведены спектральные кривые фрагмента ткани щитовидной железы, взятого непосредственно из доброкачественной опухоли (фиброма) до (сплошная линия) и после их деконволюции (пунктирная линия). Стрелками на фигурах указаны максимумы поглощения, по которым осуществлялась диагностика злокачественных новообразований щитовидной железы. В спектральном диапазоне 4000-1600 см-1 ИК-спектры опухолей щитовидной железы характеризуются тремя интенсивными полосами с максимумами поглощения в интервалах 3400-3200, 3000-2800 и 1720-1600 см-1 (фиг. 1 и 2). Отличия в ИК-спектрах, которые связаны с возникновением онкологической патологии в тканях щитовидной железы, проявляются в изменении интенсивности поглощения этих трех полос. В ИК-спектре опухолевой ткани при папиллярном раке (фиг. 1) интен 5 17763 1 2013.12.30 сивность полосы с максимумом поглощения в интервале 3400-3200 см-1 близка к интенсивности полосы с максимумом поглощения в интервале 3000-2800 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в интервале 3000-2800 см-1 составляет 1,00 (1,10). В ИК спектре доброкачественной опухоли - фиброма (фиг. 2) - полоса с максимумом поглощения в интервале 3400-3200 см-1 более интенсивна, чемполоса с максимумом поглощения в интервале 3000-2800 см-1. Величина отношений оптических плотностей этих двух полос равна 1,56 (1,10). Следовательно, величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в интервале 3000-2800 см-1 может быть использована в качестве спектроскопического признака присутствия в тканях щитовидной железы злокачественных новообразований. Отличия в ИК-спектрах, которые характерны злокачественных новообразований, выявлены в полосе с максимумом поглощения в интервале 1720-1600 см-1 после математической обработки спектральной кривой по методу Фурье-деконволюции. Как показывает метод Фурье-деконволюции, контур полосы с максимумом поглощения в интервале 1720-1600 см-1 сформирован в ИК-спектре из нескольких разных по интенсивности полос с максимумами поглощения в интервалах 1720-1680, 1675-1650 и 16401620 см-1. В спектре опухоли при недифференцированной форме рака (фиг. 3) наиболее интенсивна полоса с максимумом поглощения в интервале 1720-1680 см-1. В интервале 1675-1650 см-1 в спектре злокачественной опухоли присутствуют две полосы, интенсивность которых меньше, чем интенсивность полосы поглощения в интервале 1720-1680 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 17201680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 1,24 (1). Спектр доброкачественной опухоли щитовидной железы в интервале 1720-1600 см-1 характеризуется тремя полосами поглощения, среди которых наиболее интенсивна полоса в спектральном интервале 1675-1650 см-1 (фиг. 4). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1720-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 0,89 (1). Исследуя предложенным способом фрагменты тканей, взятые из диагностируемых опухолей щитовидной железы, определяют спектроскопическим методом наличие онкологической патологии. Установленные закономерности изменения ИК-спектров позволяют определить взаимно однозначное соответствие между наличием онкологического заболевания диагностируемого органа и принятой в спектроскопии характеристикой, такой как оптическая плотность, а также величинами отношений этой количественной характеристики. Данный способ может быть применен для диагностики злокачественных новообразований в тканях щитовидной железы на любой стадии заболевания. Пример 1. Пациент К.Е.Н. Клинический диагноз папиллярный рак. Фрагмент опухолевой ткани после экстрагирования четыреххлористым углеродом помещался между окнами из фтористого бария, раздавливался и сушился при комнатных условиях. Регистрировали ИК-спектр осушенного фрагмента ткани в диапазоне 40001600 см-1. В ИК-спектре зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3294, 2922 и 1653 см-1. Математическая обработка спектра по методу Фурьедеконволюции показала, что контур полосы в интервале 1720-1600 см-1 сформирован из четырех полос с максимумами поглощения на частотах 1693, 1672,1653 и 1633 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 30002800 см-1 равна 0,99 (1,10). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1710-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в 6 17763 1 2013.12.30 интервале 1675-1650 см-1 равна 1,46 (1,00). Полученные значения отношений оптических плотностей свидетельствуют о том, что опухоль щитовидной железы злокачественная. Регистрировался также ИК-спектр экстракта в диапазоне 4000-3400 см-1. В ИК-спектре экстракта зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3708, 3616,3534 и 3487 см-1. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале спектра 3760-3650 см к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 0,86. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале спектра 3650-3570 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 0,94. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3570-3500 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 1,19. Пример 2. Пациент Д.О.А. Клинический диагноз зоб щитовидной железы. Фрагмент опухолевой ткани после экстрагирования четыреххлористым углеродом помещался между окнами из фтористого бария, раздавливался и сушился при комнатных условиях. Регистрировали ИК-спектр осушенного фрагмента ткани в диапазоне 40001600 см-1. В ИК-спектре зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3291, 2925 и 1651 см-1. Математическая обработка спектра по методу Фурьедеконволюции показала, что контур полосы в интервале 1720-1600 см-1 сформирован из трех полос с максимумами поглощения на частотах 1687, 1657 и 1632 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в интервале 3000-2800 см-1 равна 1,24 (1,10). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 17101680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 0,65 (1,00). Полученные значения отношений оптических плотностей свидетельствуют о том, что опухоль щитовидной железы доброкачественная. Регистрировался также ИК-спектр экстракта в диапазоне 4000-3400 см-1. В ИК-спектре экстракта зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3707, 3514,3534 и 3489 см-1. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале спектра 3760-3650 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 0,80. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале спектра 3650-3570 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 0,96. Отношение оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3570-3500 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения спектрального интервала 3500-3400 см-1 равно 1,15. ИК-спектр экстракта из опухоли щитовидной железы при папиллярном раке (пример 1) и ИК-спектр экстракта опухолевидного образования щитовидной железы при зобе (пример 2) имеют близкие характеристики. Смещения частот максимумов поглощения не превышают 2 см-1. Изменение величины отношения оптических плотностей в заданных спектральных интервалах при переходе от доброкачественной опухоли к злокачественной регистрируется лишь во втором знаке после запятой в рассчитанных отношениях. Это означает, что способ,основанный на исследовании ИК-спектров экстрактов из опухолей, при диагностике злокачественных новообразований щитовидной железы имеет ограниченное применение. Пример 3. Пациент Б.К.К. Клинический диагноз недифференцированная форма рака. Регистрировали ИК-спектр фрагмента ткани щитовидной железы в диапазоне 40001600 см-1. В ИК-спектре зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3282, 2925 и 1654 см-1. Математическая обработка спектра по методу Фурьедеконволюции показала, что контур полосы в интервале 1720-1600 см-1 сформирован из четырех полос с максимумами поглощения на частотах 1693, 1674, 1656 и 1630 см-1. 17763 1 2013.12.30 Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 30002800 см-1 равна 1,02 (1,10). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1710-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 1,92 (1,00). Полученные значения отношений оптических плотностей свидетельствуют о том, что опухоль щитовидной железы - злокачественная. Пример 4. Пациент Ш.Л.М. Клинический диагноз недифференцированная форма рака. Регистрировали ИК-спектр фрагмента ткани щитовидной железы в диапазоне 40001600 см-1. В ИК-спектре зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3283, 2920 и 1640 см-1. Математическая обработка спектра по методу Фурьедеконволюции показала, что контур полосы в интервале 1720-1600 см-1 сформирован из четырех полос с максимумами поглощения на частотах 1704, 1673, 1652 и 1631 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 30002800 см-1 равна 0,98 (1,10). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1710-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 1,78 (1,00). Полученные значения отношений оптических плотностей свидетельствуют о том, что опухоль щитовидной железы злокачественная. Пример 5. Пациент Р.О.П. Клинический диагноз папиллярный рак. Регистрировали ИК-спектр фрагмента ткани щитовидной железы в диапазоне 40001600 см-1. В ИК-спектре зарегистрированы полосы с максимумами поглощения на частотах 3315, 2923 и 1655 см-1. Математическая обработка спектра по методу Фурьедеконволюции показала, что контур полосы в интервале 1720-1600 см-1 сформирован из четырех полос с максимумами поглощения на частотах 1705, 1675, 1650 и 1621 см-1. Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3400-3200 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 3000-2800 см-1 равна 1,04 (1,10). Величина отношения оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1710-1680 см-1 к оптической плотности в максимуме поглощения в интервале 1675-1650 см-1 равна 2,52 (1,00). Полученные значения отношений оптических плотностей свидетельствуют о том, что опухоль щитовидной железы злокачественная. Все диагнозы, приведенные в примерах по предлагаемому способу, подтверждены гистологическими исследованиями. Предлагаемый способ по сравнению с прототипом обладает рядом преимуществ повышена точность диагностирования и расширены возможности диагностики злокачественных опухолей в тканях щитовидной железы оптическими методами упрощена процедура диагностики онкологического заболевания, поскольку предлагаемый способ является прямым диагностированием злокачественных новообразований и не требует дополнительного приготовления экстрактов и их спектральных исследований. Полученные спектральные зависимости дают возможность вести исследования проблем рака в щитовидной железе на молекулярном уровне, поскольку наблюдаемые изменения в ИК-спектрах связаны с колебаниями атомных групп в молекулах биологических тканей. Источники информации 1. Угляница К.Н., Луд Н.Г., Угляница Н.К. Общая онкология. - Гродно ГрГМу, 2007. 2. Патологоанатомическая диагностика опухолей человека / Под ред. Н.А. Краевского,А.В. Смельянникова, Д.С. Саркисова. - М. Медицина, 1993. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 9