Кровезамещающее средство

(71) Заявитель Республиканское унитарное производственное предприятие Белмедпрепараты(72) Авторы Петров Петр Тимофеевич Лапковский Михаил Павлович Гаврилов Михаил Владимирович(73) Патентообладатель Республиканское унитарное производственное предприятие Белмедпрепараты(57) Кровезамещающее средство, корректирующее гемодинамические нарушения, содержащее пуллулан, натрий хлористый и воду для инъекций, отличающееся тем, что содержит радиационно модифицированный пуллулан с молекулярной массой 40000-80000 Да при следующем соотношении ингредиентов радиационно модифицированный пуллулан, г 50,0-100,0 натрий хлористый, г 8,0-10,0 вода для инъекций, л до 1. Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицины, а именно к кровезаменителям гемодинамического и реологического действия. Известны кровезаменители гемодинамического действия на основе природных и синтетических полимеров декстрана, гидроксиэтилкрахмала, полиэтиленоксида, поливинилпирролидона, желатина 1, 2. В настоящее время широко применяются заменители плазмы крови на основе гидроксиэтилкрахмала (-,и др.) 3. Наличие -1,4-гликозидных связей в цепи данного полимера обеспечивает ему способность расщепляться -амилазами крови до низкомолекулярных фракций и быстро выводиться из организма, однако высокомолекулярные фракции гидроксиэтилкрахмала и фракции с высокой степенью замещения персистируют в системе мононуклеарных фагоцитов десять и более суток. Высокомолекулярные фракции гидроксиэтилкрахмала способны накапливаться и сохраняться в органах до 0,5 года 3. Известно, что кровезаменители на основе гидроксиэтилкрахмала не лишены побочных эффектов. Сообщается о коагулопатиях и кровотечениях во время проведения нейрохирургических операций, особенно у пациентов с нарушениями коагуляции. В связи с названным побочным действием на гемостаз и систему свертывания крови не рекомендуется применять препараты гидроксиэтилкрахмала при проведении нейрохирургических операций 4. 8525 1 2006.10.30 Учитывая вышесказанное, создание кровезаменителей на основе ферментативно деградируемых биополимеров является актуальной задачей. Для ее решения предлагается использование в качестве основы плазмозамещающего средства полисахарида пуллулана,подвергнутого радиационно-химической обработке, т.е. радиационно-модифицированного пуллулана с молекулярной массой (ММ) 40-80 кДа. Пуллулан - -1,4 -1,6 глюкан, способен подвергаться деструкции под действием -амилаз крови. Как известно, коллоидно-осмотические и гемодинамические свойства кровезаменителей на основе полисахаридов определяются гидродинамическими и молекулярно-массовыми характеристиками этих биополимеров. Поэтому для получения клинической фракции высокомолекулярные полисахариды подвергают деструкции, например кислотному гидролизу, с последующим фракционированием. Альтернативным методом получения низкомолекулярных полисахаридов, не требующим проведения фракционирования и обладающим рядом других преимуществ, является процесс радиационно-химической деструкции и модификации полисахаридов в водных растворах. Пуллулан представляет собой линейный полимер глюкозы, состоящий из мальтотриозных звеньев, соединенных между собой -1,6-гликозидными связями. Наличие в мальтотриозных звеньях -1,4-гликозидных связей обеспечивает пуллулану способность расщепляться под действием амилолитических ферментов крови. Это исключает накопление высокомолекулярных фракций кровезаменителя во внутренних органах человека. Исходный нативный пуллулан, получаемый путем микробиологического синтеза,является высокомолекулярным соединением с ММ около 1106 Да с очень высокими параметрами вязкости (характеристическая вязкость 1,5 дл/г) и поэтому не может непосредственно использоваться в производстве плазмозамещающих средств. Для снижения молекулярной массы нативный пуллулан подвергают деструкции и фракционированию,как например в патенте 5. Прототипом заявляемого изобретения является гемодинамический кровезаменитель на основе гидролизованного полисахарида пуллулана в виде водных растворов с изотоническим компонентом (натрий хлористый, глюкоза) 5. Недостатком прототипа является высокая степень жесткости макромолекул кислотногидролизованного пуллулана, что приводит к более высоким значениям вязкостных показателей инфузионных растворов на основе кислотно-гидролизованного пуллулана, значительно превышающих вязкость плазмы крови. Это отрицательным образом сказывается на реологических свойствах крови, повышает пропульсивную нагрузку. При снижении молекулярной массы кислотно-гидролизованного пуллулана и его концентрации с целью уменьшения вязкости раствора наблюдается быстрое выведение препарата из организма,при этом не обеспечивается гемодинамический эффект, время полувыведения значительно меньше 12 ч и составляет 2,5-6 ч. Заявляемое изобретение представляет собой кровезамещающее средство на основе радиационно-модифицированного пуллулана с ММ 6000020000, средство обладает высокой лечебной эффективностью наряду с хорошей биосовместимостью и необходимым временем полувыведения из организма, т.е. способностью обеспечить устойчивый гемодинамический эффект. Заявляемое изобретение отличается от прототипа тем, что в качестве полимерного компонента используют радиационно-модифицированный пуллулан при следующем содержании ингредиентов, г/л радиационно-модифицированный пуллулан с молекулярной массой 6000020000 Да 50,0-100,0 г натрий хлористый 8,0-10,0 г вода для инъекций до 1 л. 2 8525 1 2006.10.30 Радиационно-модифицированный пуллулан получают путем гамма-облучения водного щелочного раствора нативного пуллулана дозой 4-6 Гр, при этом реализуется процесс деструкции и модификации нативного пуллулана. В процессе деструкции происходит снижение молекулярной массы пуллулана до значений 40000-80000 Да за счет разрыва (-1,4-) и(-1,6-)-гликозидных связей, а также имеет место образование в глюкозных звеньях макромолекул пуллулана карбонильных (СО) и карбоксильных (СООН) групп. Изменение молекулярно-массовых свойств и радиационно-химическая модификация пуллулана при радиолизе приводят к изменению гидродинамических и конформационных свойств облученного полисахарида. Увеличивается гибкость полимерной цепи, что приводит к снижению вязкостных показателей. Значения вязкостных показателей и гидродинамических размеров для радиационномодифицированного пуллулана становятся значительно ниже, чем для кислотногидролизованного пуллулана при равных молекулярных массах. Уменьшение значения величины сегмента Куна (17,910-8 см) свидетельствует об увеличении гибкости макромолекулярной цепи и изменении гидродинамического радиуса макромолекул радиационномодифицированного пуллулана до значений 47,8 . При этом снижаются показатели вязкости для растворов радиационно-модифицированного пуллулана, так для радиационно-модифицированного пуллулана с молекулярной массой 60000 Да характеристическая вязкость 0,26 дл/г, в то время как для кислотно-гидролизованного пуллулана величина гидродинамического радиуса 62,5 , а 0,390 дл/г, т.е. плазмо-замещающие растворы на основе радиационно-модифицированного пуллулана обладают более выраженным реологическим эффектом. Наличие в структуре пуллулана -1,4-гликозидных связей обеспечивает способность этого полисахарида к гидролитическому расщеплению ферментами крови, а присутствие в радиационно-модифицированном пуллулане дополнительных (СО -СООН и др.) функциональных групп в макромолекулах снижает скорость расщепления пуллулана в 1,5 раза по сравнению с кислотно-гидролизованным пуллуланом, что позволяет достичь времени полувыведения из организма до 12 часов. Средство готовят следующим образом Пример 1. 50 г радиационно-модифицированного пуллулана растворяют в 800-900 мл воды для инъекций, добавляют 10 г натрия хлористого, перемешивают до полного растворения компонентов, доводят объем раствора водой для инъекций до 1 л. Раствор фильтруют через стерилизующие фильтры с размером пор 0,2 мкм, разливают в асептических условиях во флаконы, флаконы укупоривают и стерилизуют при 120 С в течение 15 мин в автоклаве. Пример 2. Порядок растворения компонентов, условия фильтрации, розлива и стерилизации такие же, как в примере 1,75 г радиационно-модифицированного пуллулана растворяют в воде для инъекций, добавляют 8 г натрия хлористого, перемешивают до полного растворения компонентов, доводят объем раствора водой для инъекций до 1 л. Пример 3. Порядок растворения компонентов, условия фильтрации, розлива и стерилизации такие же, как в примере 1. 100 г радиационно-модифицированного пуллулана растворяют в воде для инъекций, добавляют 9 г натрия хлористого, перемешивают до полного растворения компонентов, доводят объем раствора водой для инъекций до 1 л. Наименьшее значение молекулярной массы радиационно-модифицированного пуллулана 40000 Да определяется способностью полимера с такой молекулярной массой обес 3 8525 1 2006.10.30 печивать реологический эффект и поддерживать давление крови на необходимом уровне достаточно длительное время. Растворы радиационно-модифицированного пуллулана массой выше 80000 Да еще способны обеспечивать реологический эффект, а показатели вязкости еще не превышают показатели вязкости крови. Использование радиационно-модифицированного пуллулана в качестве основы для плазмозамещающего средства позволяет нормализовать вязкостные показатели крови и обеспечить необходимое время полувыведения. Клинические испытания кровезамещающего средства на основе радиационно-модифицированного пуллулана, проведенные на пациентах с нарушением параметров макро- и микрогемодинамики вследствие шоковых состояний, острой кровопотери, травмы, интоксикации, сепсиса, нарушения реологических свойств крови или тенденции к тромбообразованию и ДВС-синдрому, показали его высокую эффективность. Методика применения заключалась во внутривенном капельном введении препарата в дозе 400 мл со скоростью 150 мл/час (преимущественно двух-трехкратно). Кровезамещающее средство на основе радиационно-модифицированного пуллулана хорошо переносилось пациентами и не вызывало у них клинически значимых побочных эффектов и осложнений. Было установлено, что введение препарата способствует улучшению гемореологических свойств крови и активации тканевого кровотока. Препарат вызывет ликвидацию спазма периферических сосудов, повышение суспензионной устойчивости крови, уменьшая ее вязкостные характеристики, способствует устранению периферических стазов. Вследствие этого препарат вызывает улучшение гемореологических свойств крови и активацию тканевого кровотока. Было показано, что препарат блокирует развитие синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови, уменьшает проявления свободно-радикальных процессов перекисного окисления липидов, позитивно влияет на белоксинтезирующую функцию печени и в целом на функциональную активность органов естественной депурации. Источники информации 1. Кровезаменители, консерванты крови и костного мозга / Под ред. Г.Н. Хлябича. М. Медицина, 1997. - С.192. 2. Барышев Б.А. Кровезаменители Справочник для врачей - СПб. Человек, 2001. - С. 96. 3. Франке Р. Восполнение объема циркулирующей крови с использованием коллоидных растворов // Анестезиология и реаниматология. - 1999. -3. - С. 70-76. 4... . - . 1 , 1985. - . 148-167. 5.2 109 391, 1983 (прототип). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4