Способ получения средства, обладающего притивовоспалительным действием

(12) ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬСпособ получения средства, обладающем противовоспалительным действием, путем экстракции торфа диоксидом углерода и его отгонки, отличающийся тем, что используют сжиженный диоксид углерода, а экстракциюНастоящее изобретение относится к технологии получения экстракта из торфа, обладающего высокой биологической активностью.Известен способ получения экстракта из торфа гааообразным диоксидом углерода в сверхкритических условиях (т 20-80 С давление 20-80 Мпа, время экстракции 5,5 ч, расход газа 3 кг/ч) 1.Данный способ является одностадийным,однако экстракты, полученные данным методом, обладают недостаточной биологической активностью, а именно низкой противовоспалительной активностью, имеют низкое содержание тритерпеноидов, проявляющих Эту активность. Процесс получения экстракта проходит при очень высоком давлении в течение 5,5 часов.Задача предполагаемого изобретения - получение экстракта из торфа, обладающего противовоспалительным действием, снижение затрат на проведение экстракции (уменьшение(71) Заявитель Институт проблем использо вания природных ресурсов и экологии АНБ (ВЧ)(73) Патентообладатель Институт проблем ис пользования природных ресурсов и экологии АНБ (ВЧ)проводят при температуре 2529 С и давлении 6,0-70 МПа в течение 2-3 часов.1. Багетная, 1 Ехтгасиоп 01 Реат Ырйдз тал 5 прегсг 1 т 1 са 1 СагЬо ПйохйоеН Аста Слеш. Зсапа 1986.-/.40.-Р.538-545.давления процесса экстракции и ее длительнести).Поставленная задача достигается путем экстракции торфа диоксидом углерода и его отгонки. В качестве экстрагента используют сжиженный диоксид углерода, а экстракцию торфа проводят при температуре 25- 29 С, давлении 60-70 МПа в течение 2-3 часов.Использование предлагаемого способа получения экстракта из торфа сжиженным апоксидом углерода при указанных параметрах. по сравнению с известным, обеспечивает возможность выделять экстракты из торфа с повышенной противовоспалительной активностью и снизить затраты на проведение экстракции(уменьшить давление экстракции в 10 раз и продолжительность экстракции в 2 раза. что значительно снижает энергоемкость самого процесса экстракции).Технологическая сторона получения экстракта из торфа поясняется следующими примерами.В стеклянную термостатированную колонку высотой 1000 мм, диаметром колонки 100 мм загружают 1,0 кг воздушно-сухого верхового торфа с фракционным составом 0,5-0,7 мм и влажностью 15. Колонка с торфом загружается в экстрактор емкостью 5000 мл, снабженный водяной рубашкой. Под колонку на вращающемся столике ставятся сборники готового продукта - СОз-экстракта торфа в количестве 6 штук по 100 мл каждый. Экстрактор закрывается, герметизируется и в него через вентиль подается сжиженный диоксид углерода (скорость подачи последнего 3 кг/час) до тех пор, пока он полностью не закроет навеску торфа, затем подачу экстрагента прекращают. В рубашку экстрактора подводится горячая вода (40-50 С) Для подогрева экстрактора до 26 С. Давление в эсктракторе поднимают до рабочего 6,5 МПа и проводят процесс экстракции в течение 2,5 часов. По окончании экстракции из экстрактора удаляется шрот и СО 2-экстракт торфа. Выход экстракта составляет 15,8 г (1,58 Х, на абсолютно сухое вещество торфа).экстракцию ведут по примеру 1, используя 1,0 кг воздушно-сухого низинного торфа с фракционным составом 0,5-0,7 мм и влажностью 15 . Экстракцию ведут при температуре 29 С, давлении 7,0 МПа в течение 3 часов. Выход экстракта составляет 16,5 г (1,65 и, на абсолютно сухое вещество торфа).Указанные параметры экстракции являются необходимыми, так как обеспечивают получение экстрактов из торфа с повышенным противовоспалительным действием при снижении затрат на проведение экстракции.В табл. 1 и 2 приведены данные по выходу С 02-экстрактов из верхового и низинного торфов и содержаниюв них тритерпеноидов и алифатическик соединений нормальногостроения, а в табл. 3 и 4 - данные по противовоспалительной активности экстрактов.Данные табл. 1-4 свидетельствуют о том, что экстракты, выделенные из торфа сжижентпям диоксидом углерода при давлении 6,0-70 МПа,температуре экстракции 25-29 С и ее продолжительности 2-3 часа обладают повышенным противовоспалительным действием, а именно введение их в дозе 100 мг/кг ока зывает высокий противоотечный эффект наначальной стадии развития воспаления (6978 торможения отека у экстрактов верхового торфа, 72-81 - у экстрактов низинного торфа по сравнению с прототипом - 29-33 и 3035 соответственно, что в 2,0-2,5 раза выше чем у прототипа) на пике воспаления эф 10фект уменьшается (40-45 торможения отека у верхового торфа, 44-47 - у низинного по сравнению с прототипом - 15-20 и 18-22 сгоответсгветпто), а на обратной стадии развития отека эффект вновь уживается 49-58 и 51-61 И,соответственно по сравнет-што с прототипом 28 и 28-29).Высокую противовоспалительную активность экстрактов обеспечивают шактшчестше органические соединения - тригерпенотищът, входящие в состав данных экстрактов. Как видно из табл. 1 и 2, СО 2-эксгракты торфа, полученные сжиженньш диоксидом углерода при вышеперечислеш-тьтх условиях, содержат подобных соединеншй в 1,52,0 раза больше по сравнению с прототгшом.Увеличение давления с 7,0 до 8,0 МПа, температуры экстракции с 29 до 30 С и продолжительности экстракции с 3 до 4 часов ведет к увеличению выхода экстракта на 10-1,2, незначительному повышению содержания в нем тритерпеноидов (на 05-0,8 и значительному обогащению экстракта атщфатттческшш соединениями нормального строения (на 3,2-35) обладающих низкой биологической активностью,что соответственно снижает противовоспалительную активность на начальной стадии развития отека на 16-19, на пике воспаления- 13 и на обратной стадии развития отека на 10-18.Уменьшение давлетптя с 6,0 до 5,0 МПа, температуры экстраютгпт с 25 до 24 С и продолжительности экстракции с 2 до 1 часа ведет к снижению выхода экстракта на 0,9-1,7, уменьшает на 1,0-1,5 И, содержание в нем тритерпеноидов обогащает его на 1,2-1,5 алифатичестсиьш соединениями нормального строения, что снижает противовоспалительную активность на начальной стадии развития отека на 11 на пике воспаления - 1013 и на обратной стадии развития отека на 846.Изучение противовоспалительной активности проведено в соответствующих медншшстсик учреждениях на моделях экспериментального вос-паления лапки белых крыс линии Вистар.Воспалительный отек вызывают путем введения под апоневроз подошвенной поверхности задней лагпси крысы по 0,1 мл 1 каррагентша. Исследавание проведено по общепринятым методикам по пику воспаления. Исследуемые экстракты вводили внутримышечно в диапазоне доз одномоМБНТНО С ВВВДЗНИСМ ЗГВНТЗ, ВЫЗЫВЗЮЩСГО воспалительную реакцию. Объем конечности измеряли прибором туша штангепьциркутгь через 1,3, 5 и 24 часа после введения флотогенов и определяют в И, ветптчшту снятия воспалительной реакции.Количественное определение алифатических соединений нормального строения определяли химическими методами.Таблица 1 Выход СО 2-экстракта из верхового торфа и содержание в нем тритерпеноидов и соединений нормального строенияТехнологические параметры процесса ЭКС- Выход экстрактакции та, мг/гд Таблица 2 т Выход СОгэкстракта из низинного торфа н содержание в нем тритерпеноидов и соединений нормального строенияТехнологические параметры процесса экст акцииРезультаты Исследования противовоспалительной активности СО 2-экстракта верхового торфа (по противоотечному действию) (Доза введения 100 мг/ кг)Пик Обратная Пик Обратная д С 25,0 38 46 43 56 26,0 40 49 - 45 58 29,0 41 50 46 57 24,0 30 41 32 42 30,0 27 39 32 40 60,0 15 28 20 28Таблица 4 Результаты исследования противовоспалительной активности СО 2-экстракта низинного торфа (по противовоспалительному действию) (Доза введения 100 мг/ кг)Стадия азвития отека аЗаказ 1068. Тираж 20 экз. Государственное патентное ведомство Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.