Биологически активный препарат для нормализации гомеостаза, обмена веществ, профилактики или лечения иммунодефицита у животных

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ГОМЕОСТАЗА, ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ, ПРОФИЛАКТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ИММУНОДЕФИЦИТА У ЖИВОТНЫХ(71) Заявители Зайцева Алеся Владимировна Зайцева Виктория Владимировна Дремач Геннадий Эдуардович Зайцев Владимир Владимирович(72) Авторы Зайцева Алеся Владимировна Зайцева Виктория Владимировна Дремач Геннадий Эдуардович Зайцев Владимир Владимирович(73) Патентообладатели Зайцева Алеся Владимировна Зайцева Виктория Владимировна Дремач Геннадий Эдуардович Зайцев Владимир Владимирович(57) Биологически активный препарат для нормализации гомеостаза, обмена веществ,профилактики или лечения иммунодефицита у животных, содержащий биологически активные вещества из гриба, отличающийся тем, что в качестве биологически активных веществ содержит 0,3-0,4 -ный водный раствор метаболитов грибаи дополнительно содержит селен органический, натрия хлорид и формалин в качестве консерванта при следующем соотношении компонентов, мас.органический селен 0,001-0,020 натрия хлорид 0,5-0,9 формалин 0,3-0,5 0,3-0,4 -ный водный раствор остальное. метаболитов гриба Изобретение относится к ветеринарии, а именно к получению препарата для животных, и может быть использовано в качестве средства для нормализации гомеостаза, обмена веществ, профилактики и лечения иммунодефицитов у животных. Широко известны биологически активные препараты из клеток бактерий приготовление биологически активного препарата из культуральной среды после отделения грибаВСБ 917 или 3051 Д 1, 2, 3, 4 16525 1 2012.10.30 детоксицированный липополисахарид из нейсерий 7 липополисахарид из биомассы авирулентного штамма .выделяют воднофенольной экстракцией при температуре 65 С по способу . , . 12 очищают гельфильтрацией на сефадексе 200 8 липополисахарид получают путем экстракции бактерий трихлоруксусной кислотой 9 липополисахарид из биомассы .штамма 475 выделяют по методу .. 11 и очищают путем трехкратного пересаждения и дальнейшего центрифугирования при 15000 д в течение двух часов 10 липополисахарид из биомассы пуллорных бактерийштамма 24 КСТ выделяют путем экстракции биомассы бактерий 0,5 -ным раствором аммиака при температуре 80 С в течение 60 минут и последующей обработки экстракта формалинизированными эритроцитами в соотношении 11 5 полисахарид антиген из биомассы сальмонелл, обработанных ацетоном в течение 24-60 часов при температуре 4-20 С и массовом соотношении 13, экстрагируют 0,5-1,0 -ным раствором аммиака в течение 60-100 минут при температуре 90-105 С,центрифугируют и в центрифугат добавляют до 0,5-1,0 тиосульфат натрия 6 и др. Наиболее близким техническим решением к предлагаемому изобретению является биологически активная добавка к пище 1. Согласно описанному методу штамм, грибаВСБ 917 или 3051 Д выращивают глубинным способом в жидкой питательной среде, содержащей источник углерода 3-4 , азота - 0,2-0,3 , фосфора - 0,2-0,3 и микроэлементов - 0,07-0,08 в стерильных условиях при температуре 26-30 С, перемешивании и аэрации в течение 36-72 часов. В жидкую культуральную среду, после отделения биомассы гриба, добавляют этанол до концентрации 7-10 . Недостатком препарата является нестерильность, реактогенность и невысокая биологическая активность. Задача изобретения - создание стерильной и безвредной инъекционной формы препарата с высокой биологической активностью. Поставленная цель достигается тем, что водный раствор метаболитов грибаконсервируют формалином и стабилизируют путем добавления натрия хлорида и селена органического. Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что биологически активный препарат для нормализации гомеостаза, обмена веществ, профилактики и лечения иммунодефицитов у животных содержит биологически активные вещества из гриба, отличающийся тем, что в качестве биологически активных веществ содержит 0,3-0,4 -ный водный раствор метаболитов грибаи дополнительно содержит селен органический, натрия хлорид и формалин в качестве консерванта при следующем соотношении компонентов, мас.органический селен 0,001-0,020 натрия хлорид 0,5-0,9 формалин 0,3-0,5 0,3-0,4 -ный водный раствор метаболитов грибаостальное. Пример 1 (прототип). ГрибВСБ 917 или 3051 Д выращивали глубинным способом в жидкой питательной среде, содержащей источник углерода 3-4 , азота - 0,2-0,3 , фосфора - 0,2-0,3 и микроэлементов - 0,07-0,08 в стерильных условиях при температуре 26-30 С, перемешивании и аэрации в течение 36-72 часов. Биомассу гриба отделяли от жидкой среды, добавляли в последнюю этанол до концентрации его 7-10 . 2 16525 1 2012.10.30 Препарат нами фильтровался через полисульфоновую мембрану с величиной пор 0,22 мкм. Препарат вводили белым мышам определенной группы в дозе от 0,1 до 0,5 см 3. Животным контрольной группы в дозе 0,5 см 3 вводили стерильный 0,9 -ный раствор натрия хлорида. Препарат вводили за 24 часа и через 72 часа после инфицирования белых мышей 2 50 рожистыми бактериями матрикса Конева. Через каждые 12 часов учитывали клиническое состояние мышей, а также количество погибших животных в группах. Срок наблюдения за животными составлял 15 суток. Препарат в оптимальной дозе 0,2 см 3/мышь обеспечил выживание только 20 животных. Не фильтрованный препарат не обладал стерильностью и защищал только 10 мышей. Пример 2. Биологически активный препарат для нормализации гомеостаза, обмена веществ,профилактики и лечения иммунодефицитов у животных готовили путем смешивания 0,4 -ного водного раствора метаболитов грибас формалином, селеном органическим и натрием хлорида при следующем соотношении компонентов,мас.органический селен 0,001 натрия хлорид 0,5 формалин 0,3 0,4 -ный водный раствор метаболитов грибаостальное. 3 Препарат в оптимальной дозе 0,2 см /мышь обеспечил защиту от гибели 40 животных. Пример 3. Способ осуществляли аналогично примеру 2, но для изготовления препарата использовали 0,3 -ный водный раствор метаболита гриба. Препарат в оптимальной дозе 0,2 см 3/мышь обеспечил защиту от гибели 40 инфицированных животных. Пример 4. Способ осуществляли аналогично примеру 2, но при изготовлении препарата натрия хлорид добавляли до 0,9 , формалин - 0,5 , а селен органический - до 0,02 . Препарат в оптимальной дозе 0,2 см 3/мышь защищал от гибели 36 животных. Пример 5. Способ осуществляли аналогично примеру 2, но в 0,4 -ном водном растворе метаболитов гриба селен органический растворяли до концентрации 0,0005 , натрия хлорид до 0,4 , а формалин - до 0,2 . Препарат в оптимальной дозе 0,2 см 3/мышь обеспечил защиту от гибели 20 инфицированных животных. Пример 6. Способ осуществляли аналогично примеру 2, но в 0,4 -ном водном растворе метаболитов гриба селен органический растворяли до концентрации 0,03 , натрия хлорид - до 1,0 , а формалин - до 0,6 . Препарат в оптимальной дозе защищал от гибели 28 инфицированных животных. Повышение концентрации натрия хлорида и селена органического в препарате делают его реактогенным. Реактогенный препарат запрещено применять продуктивным животным. Из полученных экспериментальных данных видно, что препараты, приготовленные согласно способам, описанным в примерах 2, 3 и 4, нереактогенны, обладают высокой биологической активностью, так как защищают 36-40 инфицированных животных. 16525 1 2012.10.30 Снижение концентрации консерванта и стабилизаторов в составе препарата приводит к падению его активности (пример 5). Источники информации 1.2177699 1, 2002. 2.2235481 1, 2002. 3.2268620 1, 2004. 4.2289957 1, 2005. 5. Патент РБ 4371. 6. РБ 7787. 7. Дельвич А.А. и др. Протективная активность детоксицированного липополисахаридасерогруппыв опытах// Микробиология. - 1989. -5. - С. 70. 8. Татаренко Т.М., Дальвадяну С.М., Бахрах Е.Э. Проблемы особоопасных инфекций. Саратов, 1972. - Вып. 3 (25). - С. 93-98. 9..,. // . . - 1993. - . 144. - . 307-310. 10..,.,.. // . . . - 1985. . 151. - . 399-404. 11. // . . . - 1965. - . 5. - . 92-95. 12..,. // . . . - 1965. - . 5. - . 83-91. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4