Способ дифференциальной диагностики среднетяжелого и тяжелого течения бронхиальной астмы

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ СРЕДНЕТЯЖЕЛОГО И ТЯЖЕЛОГО ТЕЧЕНИЯ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ(71) Заявитель Учреждение образования Белорусский государственный медицинский университет(72) Авторы Царев Владимир Петрович Потапова Светлана Михайловна(73) Патентообладатель Учреждение образования Белорусский государственный медицинский университет(57) Способ дифференциальной диагностики степени тяжести бронхиальной астмы путем определения иммунных показателей пациента, отличающийся тем, что в качестве иммунных показателей используют 8 илимфоциты, при этом определяют отношение процентного содержания 8 лимфоцитов климфоцитам и при значениях от 2,5 до 3,86 диагностируют среднюю степень тяжести бронхиальной астмы, а при значениях менее 2,49 - тяжелую. Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и касается дифференциальной диагностики среднетяжелого и тяжелого течения бронхиальной астмы(БА). Известен способ дифференциальной диагностики среднетяжелого и тяжелого течения,основанный на изучении таких клинических симптомов, как частота возникновения и выраженность приступов удушья у больных БА (Международный консенсус по диагностике и лечению бронхиальной астмы / Под ред. проф. Н.В. Путова и проф. Г.Б. Федосеева. - С.-П.,1995. - С. 46). Его недостатком является отсутствие точных количественных критериев и невозможность применения методов вариационного и корреляционного анализа в связи с использованием приемов описательной статистики. Известен также способ дифференциальной диагностики среднетяжелого и тяжелого течения БА, основанный на исследовании такого показателя функции внешнего дыхания(ФВД), как объем форсированного выдоха за первую секунду (ОФВ 1) и пиковая объемная скорость выдоха (ПОСвыд) (Международный консенсус по диагностике и лечению бронхиальной астмы / Под ред. проф. Н.В. Путова и проф. Г.Б. Федосеева. - С-П., 1995. - С. 46 Лаптева И.М., Скепьян Н.А., Новиков Д.К. и др. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению бронхиальной астмы. - Мн, 1999. - С. 66). Недостатками этого способа являются невозможность проведения исследования при развитии бронхоспазма, обязательное 2-3-кратное повторное тестирование, влияние на 8520 1 2006.10.30 результаты исследования большого количества как субъективных, так и объективных факторов (правильного выполнения дыхательных маневров, приема пищи, лекарственных препаратов, курения, физической нагрузки, пола, возраста, веса пациентов и т.п. ). Относительно низкая чувствительность показателя ПОСвыд, определяемой при пикфлоуметрии, не позволяет обнаруживать умеренные изменения просвета бронхов при ежедневном контроле. ОФВ 1 и ПОСвыд характеризуют состояние ФВД на данный момент времени,что не всегда точно соответствует общей клинической ситуации у конкретного больного БА. Исследование ФВД требует наличия специальной аппаратуры и обученного медперсонала. К тому же в целом ряде исследований между клиническим симптомами БА и показателями ФВД достоверной корреляционной связи не было выявлено (- // . - 1999. . 54. -1. - . 15 - 19,,.- -// . - 1999. - . 115. . 85 - 91.,.//. . . - 1999. - . 13. -4. - . 751-756). Наиболее близким, принятым за прототип, является лишенный перечисленных выше недостатков способ дифференциальной диагностики тяжести течения БА, основанный на изучении выраженности прямой корреляционной зависимости между содержанием в сыворотке крови интерферона- и интерлейкина-1 обратно пропорциональной степени тяжести БА (Зайцева О.В., Лаврентьев А.В., Зайцева С.В., Самсыгина Г.А. Интерлейкин-1 альфа, фактор некроза опухолей - альфа и интерферон-гамма в сыворотке крови у детей при бронхиальной астме в различные периоды заболевания // Аллергология. - 2000. -3. С. 8 - 12). Недостатками этого способа являются высокая стоимость и сложность исследований,необходимость определения содержания в сыворотке больных указанных биологически активных веществ во время приступа удушья, а также то обстоятельство, что как при среднетяжелом, так и при тяжелом течении БА тяжесть отдельных приступов удушья не всегда соответствует степени тяжести заболевания. Кроме того, при данном способе дифференциальной диагностики не учитываются степень и характер нарушений в Тлимфоцитарном звене иммунной системы. Известно, что гиперреактивность дыхательных путей, определяющая тяжесть течения БА, зависит от степени выраженности аллергического воспалительного поражения бронхов, в регуляции которого важная роль отводится Т-лимфоцитам. Уровень же интерферона- и интерлейкина-, в основном, характеризует активность макрофагов и Т-хелперов первого типа, участвующих в воспалительных реакциях инфекционного генеза (Титов Л.П. Молекулярные механизмы активации Т- и Влимфоцитов/В кн. Современные проблемы инфекционной патологии человека. - Минск,2001. - С. 287 - 317,// . . . - 2001. - . 344.5. - . 239 - 248.2/,. -, 1993. - . 13). Целью изобретения является повышение точности способа вне зависимости от наличия и тяжести приступов удушья в момент обследования больных. Цель достигается тем, что определяется отношение процентного содержания 8 илимфоцитов в периферической крови пациентов. При значениях показателя от 2,5 до 3,86 диагностируется течение БА средней тяжести, а при величине соотношения менее 2,49 - тяжелое течение заболевания. Предложенный способ осуществляется следующим образом. Кровь из локтевой вены натощак путем венепункции забирают в полистироловую пробирку объемом 5 мл с 0,5 М раствором ЭДТА. Лимфоциты периферической крови выделяют центрифугированием на градиенте плотности фиколл-верографтин при 400 в течение 30 мин. Клетки интерфазы отмывают питательной средой- 1640 (1) с 1 АВ-сыворотки. Осадок ресус 2 8520 1 2006.10.30 пендируют в питательной среде- 1640 с добавлением 10 АВ-сыворотки, 2 ммглутамина, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Выявление поверхностных маркеров лимфоцитов (8 и) проводят с моноклональными антителами, мечеными ФИТЦ на проточном цитофлюриметре. Фенотипические характеристики мононуклеаров оценивают в гейте лимфоцитов. Пример 1 Больной Е. 52 лет поступил в клинику с диагнозом бронхиальная астма, смешанная форма, тяжелое течение, фаза обострения ДН . Предъявлял жалобы на кашель с плохим отхождением мокроты, приступы удушья, купирующиеся приемом 2-агонистов короткого действия, ночные симптомы 2-3 раза в неделю, БА страдает в течение 17 лет, после перенесенного острого бронхита. Состояние ухудшилось без видимой причины 7 дней назад. Компьютерная спирография при поступлении выявила снижение показателей ОФВ 1 до 40 и ПОСвыд до 34 от должного. Суточные колебания ПСВ по данным мониторинга пикфлоуметрии составили 34 . В связи с несоответствием степени спирографических нарушений выраженности клинической симптоматики и эффективности местного симпатомиметического лечения, с целью уточнения степени тяжести БА и подбора адекватной медикаментозной терапии, было проведено определение количества 8 илимфоцитов в периферической крови. Содержание 8 лимфоцитов составило 14 ,- 3,91 , а соотношение 8/- 3,58. Это позволило пересмотреть диагноз больного Е. в сторону уменьшения степени тяжести заболевания, определив ее как среднетяжелую. В качестве базисной терапии больному были назначены ингаляционные глюкокортикостероиды в средних дозах (будесонид 600 мкг/сут) и сальметерол. Назначенное лечение позволило в течение 10 дней купировать имеющуюся клиническую симптоматику. Пример 2 Больной М. 38 лет доставлен в клинику с диагнозом бронхиальная астма, смешанная форма, среднетяжелое течение, фаза обострения, ДН 1. Сенсибилизация к бытовым аллергенам. При поступлении жаловался на приступы удушья каждые 4-6 часов, в том числе и ночью, затяжного характера, плохо купирующиеся бронхолитиками, приступообразный кашель с плохим отхождением мокроты. По данным компьютерной спирографии ОФВ 1 и ПОСвыд составили 82 и 89 соответственно. Суточный разброс ПСВ при пикфлоуметрии - 36 . На фоне лечения (эуфиллин в/венно, ингаляционные глюкокортикостероиды сначала средних, а затем в высоких дозах, 2-агонисты в ингаляциях и в/венно) состояние больного не улучшилось. При повторной спирографии через 7 дней отмечено снижение показателей ФВ 1 и ПОСвыд до 37 и 45 соответственно. С целью уточнения тяжести течения БА и необходимости коррекции схемы базисного лечения заболевания у пациента было исследовано содержание 8,лимфоцитов периферической крови и их соотношение (15 , 8 и 1,88 соответственно). С учетом полученных результатов характер течения БА был определен как тяжелый, что позволило назначить короткий курс глюкокортикостероидов системно (метилперднизолон 24 мг/сут внутрь) и, в дальнейшем,перевести больного на амбулаторное лечение в связи с улучшением состояния. Таким образом, предлагаемый способ позволяет увеличить точность и повысить чувствительность дифференциальной диагностики среднетяжелого и тяжелого течения БА и отличается тем, что определяется соотношение процентного содержания 8 илимфоцитов в периферической крови больных. При величине показателя от 2,5 до 3,86 диагностируется течение БА средней тяжести, а при соотношении менее 2,49 тяжелое течение заболевания. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3