Способ моделирования у крыс дисбактериоза кишечника, сопровождающегося токсическим поражением печени

СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ У КРЫС ДИСБАКТЕРИОЗА КИШЕЧНИКА, СОПРОВОЖДАЮЩЕГОСЯ ТОКСИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(72) Авторы Горецкая Марианна Викторовна Бушма Михаил Иванович Шейбак Владимир Михайлович Жмакин Андрей Игоревич Мацюк Ярослав Романович(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(56) Созинов А.С. и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2002. -3. - С. 60-63. Корнева Т.К. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 1999. - Т. ,3. - С. 55-60. Ардатская М.Д. и др. // Терапевтический архив. - 2001.-2/ - . 67-72. Шейбак В.М. и др. Актуальные проблемы медицины. - Гомель, 2002. - . 259-261. Мацюк Я.Р. и др. Актуальные вопросы современной медицины Сборник научных трудов. - Гродно, 2002. - С. 311-313.(57) Способ моделирования у крыс дисбактериоза кишечника, сопровождающегося токсическим поражением печени, путем введения в желудок через зонд лекарственного средства, отличающийся тем, что в качестве лекарственного средства вводят ацетаминофен в дозе 500 мг/кг массы с интервалом в 24 часа на протяжении 7 дней. Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к экспериментальной микробиологии, и может использоваться для изучения эффективности пробиотиков при их профилактическом или терапевтическом использовании. Наиболее близким к заявляемому является способ моделирования дисбактериоза, связанный с внутрижелудочным введением крысам через зонд канамицина сульфата в дозе 1,4 мг/100 г массы, а также подкожным введением четыреххлористого углерода в дозе 0,1 мг/100 г массы. Через две недели отмечали развитие дисбактериоза, вызванного канамицином и четыреххлористым углеродом, кроме того, отмечали токсическое поражение печени, обусловленное введением четыреххлористого углерода (Созинов А.С., Поздеев ,Лапшина Г.Н. и др. Микрофлора кишечника крыс в условиях хронического токсического поражения печени // Журн. микробиол. - 2002. -3. - С. 60-63). Недостатком данного способа является чрезмерная продолжительность эксперимента. Канамицин при длительном применении может оказывать токсическое действие на почки. Отмечаются нефротические реакции - цилиндрурия, альбуминурия, микрогематурия. Кроме того, наблюдали аллергические реакции, парестезии, ототоксическое действие по 8351 1 2006.08.30 сле введения антибиотика. В кишечнике имеет место возникновение канамицинустойчивых клонов микроорганизмов. Задача изобретения - создание модели, позволяющей повысить воспроизводимость при моделировании дисбактериоза кишечника, сопровождающегося токсическим поражением печени, при одновременном сокращении сроков эксперимента и упрощении способа достижения цели. Поставленная задача достигается путем введения внутрижелудочно крысам ацетаминофена в дозе 500 мг/кг массы ежедневно в течение 7 суток. Ацетаминофен - белый кристаллический порошок. Легко растворим в спирте, нерастворим в воде. Оказывает жаропонижающее, болеутоляющее и противовоспалительное действие (М.Д. Машковский. Лекарственные средства. - М., 2000. - Т. 1-2.). Способ осуществляют следующим образом. Белым беспородным крысам массой 15010 г ежедневно с интервалом в 24 часа в течение 7 дней внутрижелудочно вводят ацетаминофен в дозе 500 мг/кг массы. Таблетку ацетаминофена растирают в фарфоровой ступке в порошок. Поскольку препарат нерастворим в воде, порошок ацетаминофена ресуспензируют в 2 крахмальном растворе. С помощью металлического зонда суспензию ацетаминофена вводят крысам внутрижелудочно из расчета 1 мл на 100 г массы один раз в сутки. Приводим результаты эксперимента, демонстрирующего возможность моделирования дисбактериоза, сопровождающегося токсическим поражением ткани печени путем курсового введения ацетаминофена (табл. 1). В результате перорального введения ацетаминофена нарастают дисбиотические изменения в микробиоценозе кишечника (табл. 1), а именно наблюдаются качественные и количественные нарушения состава микрофлоры - увеличение содержания тех видов, которые представлены в кишечнике в небольшом количестве, и, соответственно, уменьшение на этом фоне содержания кишечной палочки, повышается количество кишечной палочки с измененными биохимическими свойствами. Таблица 1 Показатели микрофлоры кишечника крыс до и после введения ацетаминофена Показатель Примечание Контрольные значения состояние микробиоценоза кишечника крыс до введения ацетаминофена. Опытные значения состояние микробиоценоза кишечника крыс после введения ацетаминофена.- общее количество банальной микрофлоры в 1 мл фекалий (определялось максимальным десятикратным разведением фекалий, выраженном в , в котором при засеве на мясопептонный сахарный агар в количестве одной бактериальной петли определялось присутствие микроорганизмов).- количество нормальной кишечной палочки (определялось аналогично , но путем засева на среду Эндо и учета на ней лактозоположительных колоний)./- - титров лактозопозитивной кишечной палочки к лактозонегативной микрофлоре(определялось аналогично предыдущему показателю на среде Эндо).- - разница между общим количеством банальной микрофлоры и количеством нормальной кишечной палочки. 2 8351 1 2006.08.30 Показатель дисбактериоза - сумма условных баллов, характеризующих степень проявления дисбиотических явлений микробиоценоза кишечника. Помимо создания модели экспериментального дисбактериоза у животных регистрируется токсическое поражение ткани печени, о котором свидетельствует повышение в данных экспериментальных условиях основного маркера - гамма-глутамилтрансферазы (в 1,7 раза),активация процессов перекисного окисления липидов (увеличение концентрации диеновых конъюгатов - в 2,1 раза, оснований Шиффа - в 1,3 раза, падение активности каталазы на 34 , уменьшение количества витамина Е в ткани печени - на 32 ) (табл. 2). Таблица 2 Биохимические показатели в печени после курсового введения ацетаминофена Группа Контроль Опыт Преимущества по сравнению с прототипом упрощение способа моделирования дисбактериоза кишечника, сопровождающегося токсическим поражением ткани печени (использование одного ацетаминофена, по сравнению с одновременным использованием канамицина и четыреххлористого углерода). Кроме того, достигается сокращение сроков получения данного патологического состояния до 7 суток (14 суток при использовании канамицина). Таким образом, предлагаемый нами способ обеспечивает получение модели экспериментального дисбактериоза, сопровождающегося токсическим поражением ткани печени. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3