Способ моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости у лабораторного животного в эксперименте

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ НИЗКОЙ ОБТУРАЦИОННОЙ ТОЛСТОКИШЕЧНОЙ НЕПРОХОДИМОСТИ У ЛАБОРАТОРНОГО ЖИВОТНОГО В ЭКСПЕРИМЕНТЕ(71) Заявитель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(72) Авторы Гаин Юрий Михайлович Денисенко Валерий Ларионович Шахрай Сергей Владимирович Веремей Эдуард Иосифович Журба Владимир Александрович Рукаль Василий Михайлович Гаин Михаил Юрьевич(73) Патентообладатель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(56)2376649 1, 2009.2335020 1, 2008.1534494 1, 1990. КУРМАШЕВ А.Р. Экспериментальноморфологическое обоснование микрохирургических межкишечных анастомозов при острой обтурационной толстокишечной непроходимости Автореф. дис. - Оренбург, 2010. - С. 1-29.(57) Способ моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости у лабораторного животного в эксперименте, отличающийся тем, что под ингаляционным масочным наркозом выполняют наложение подкожного кисетного шва вне наружного сфинктера анального отверстия, выводят наружу лигатуры, затягивают их концы до плотного смыкания слизистой прямой кишки в области анального канала и завязывают между собой. Изобретение относится к экспериментальной медицине и ветеринарии и может быть использовано для экспериментального воспроизведения низкой обтурационной толстокишечной непроходимости с целью изучения этиологии и патогенеза заболевания, а также для разработки методов профилактики и лечения данной патологии. Известен способ моделирования обтурационной толстокишечной непроходимости путем лапаротомии и сужения просвета толстой кишки в ее дистальных отделах (нисходящая ободочная или сигмовидная кишка, ректосигмоидный отдел толстой кишки) с использованием специальных колец, полосок материи, лигатур 1-3. Недостатками способа являются а) сложность выполнения б) необходимость и длительность общей анестезии (наркоза) в) необходимость выполнения травматичной операции для создания модели - лапаротомии, существенно утяжеляющей состояние животного, с дальнейшей манипуляцией на толстой кишке г) невозможность формирования препятствия на уровне прямой кишки (у человека опухолевая обтурация прямой киш 17437 1 2013.08.30 ки - один из вероятных и частых источников низкой обтурационной непроходимости кишечника) д) невозможность без релапаротомии и манипуляции на толстой кишке оборвать патологический каскад развития болезни. Наиболее близкого способа моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости, прототипа, не обнаружено. Задачей настоящего изобретения является создание простого и эффективного способа моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости в эксперименте на лабораторных животных. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости у животного в эксперименте, отличающийся тем, что под ингаляционным масочным наркозом выполняют наложение подкожного кисетного шва вне наружного сфинктера анального отверстия,выводят наружу лигатуры, затягивают их до плотного смыкания слизистой прямой кишки в области анального канала и завязывают между собой. Эффективность способа подтверждается примером конкретного выполнения. Половозрелой взрослой беспородной крысе (самцу) массой 270 г после взятия из хвостовой вены крови на исследование под масочным ингаляционным наркозом (фторотаном) выполнено наложение вне наружного сфинктера заднепроходного отверстия прямой кишки подкожного кисетного шва. Выведенные наружу лигатуры проведены через пуговицу, затянуты до полного, плотного смыкания слизистой прямой кишки в области анального канала и на ней завязаны бантиком. Крыса изолирована в индивидуальной клетке с осуществлением динамического наблюдения за ней. На первые сутки поведение крысы изменилось незначительно (отмечено некоторое угнетение физической активности), она выпила 100 мл воды и съела 15 г зерна. На вторые сутки поведение крысы - такое же, потребление воды и зерна - 110 мл и 13 г соответственно. На третьи сутки отмечено более выраженное снижение физической активности,шерсть стала взъерошенной, употребление воды увеличилось до 150 мл, аппетит снизился. На четвертые сутки живот резко увеличился в объеме, крыса стала малоподвижной,агрессивной, употребление воды уменьшилось до 30 мл, шерсть взъерошена. В конце 4-х суток наблюдения под ингаляционным наркозом (фторотан) произведена эвтаназия животного путем декапитации с забором крови на исследования. Выполнено вскрытие животного с забором экссудата брюшной полости, содержимого толстой кишки и крови из воротной вены для бактериологического исследования. В брюшной полости до 1,5 мл мутного серознофибринозного экссудата. Толстая кишка увеличена в 2 раза,имеется расширение петель тонкой кишки. Внутренние органы забраны на гистологическое исследование. При окраске гистологических препаратов гематоксилином и эозином толстой кишки выявлены лимфоидномакрофагальная инфильтрация слизистой оболочки, гиперсекреция бокаловидных клеток,выраженная десквамация эпителия. В печени - острая венозная гиперемия, некроз гепатоцитов в центре долек (цитоплазма разрыхлена, глыбчатая, ядра лизированы), в отдельных участках - плазмолизис. В почках - гиперемия коркового и мозгового слоев, некроз эпителя почечных канальцев, белковый нефроз, интерстициальный нефрит - клеточная инфильтрация с преобладанием нейтрофилов (включены макрофаги и гистиоциты). В сердце отек интерстиция, сосудистое полнокровие, сглаженность поперечной исчерченности мышечных волокон. Из брюшной полости высеяны микроорганизмы - . ,, из крови воротной вены -. В общем анализе крови лейкоциты - 18,610(исходный уровень - 4,8109/л), палочкоядерные нейтрофилы - 3,99109/л (исходный уровень - 0,28109/л) гемоглобин 123,41012/л (исходный уровень - 157,11012/л) гематокрит - 40,3 (исходный уровень 47,9) тромбоциты - 525 (исходный уровень - 699). Учитывая выявленные клинические,2 17437 1 2013.08.30 лабораторные и морфологические признаки, у лабораторного животного на фоне моделированной низкой обтурационной толстокишечной непроходимости имеют место признаки перитонита, полиорганной недостаточности и тяжелой эндогенной интоксикации, свидетельствуя о развитии у него индуцированного абдоминального сепсиса. Эксперимент повторен на 30 животных (рандобредных белых крысах обоего пола массой 296,726,2 г). 16 животных были выведены из эксперимента через 4 суток от начала моделирования патологического процесса ( основная серия), 14 животным через 4 суток сняты компрессирующие прямую кишку устройства ( основная серия). У всех животныхсерии при исследовании выявлены клинические, морфологические и микробиологические признаки заболевания, схожие с изменениями, установленными у животного на примере конкретного исполнения. Изсерии погибло 2 животных (14,2 ), при аутопсии которых выявлены признаки продолжающегося фибринозно-гнойного перитонита и полиорганной недостаточности. У остальных животных наступило постепенное выздоровление с восстановлением функции пищеварительного тракта. При проведении экспериментов всех животных содержали на стандартном рационе вивария. Все исследования проводили в полном соответствии с современными принципами биоэтики, в том числе Европейской конвенцией по защите прав позвоночных животных (принятой в г. Страсбурге 18.03.1986 г.) и Всемирной декларацией прав животных(, принятой Международной Лигой Прав Животных в 23 сентября 1977 года в Лондоне и объявленной 15 октября 1978 года в штабе ЮНЕСКО в г. Париже). Указанный пример, а также схожие результаты, полученные в экспериментальных условиях на всех лабораторных животных, свидетельствуют о создании простого и эффективного способа моделирования низкой обтурационной толстокишечной непроходимости без вскрытия брюшной полости подопытного животного, а также без предшествующих манипуляций на кишечнике, с воспроизводимостью на различных видах лабораторных животных. Техническим результатом изобретения является упрощение способа моделирования тяжелой интраабдоминальной патологии, повышение удобства работы оперирующего экспериментатора, приближение модели к существующей патологии у человека, высокая воспроизводимость модели. Способ прост и легок для выполнения, гуманен, исключает подготовительные манипуляции и предварительные хирургические вмешательства, достоверно воспроизводим на различных видах лабораторных животных. Источники информации 1. Уголев А.М. Энтериновая (кишечная гормональная) система. - Л. Наука, 1978. С. 315. 2. Сурлевич И.Е. Выбор метода хирургического лечения при острой толстокишечной непроходимости Автореф.дис.канд. мед. наук. - Бишкек, 2008. - 160 с. 3. Мустафина А.Р. Морфофункциональное состояние ободочной кишки и толстокишечных анастомозов при обтурационной кишечной непроходимости и ее коррекции (анатомо-экспериментальное исследование) Автореф. дис.д-ра мед. наук. - Алматы,2010. - 289 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3