Способ моделирования гнойно-некротического парапанкреатита в эксперименте

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(72) Авторы Гарелик Петр Васильевич Жандаров Константин Николаевич Ушкевич Андрей Леонидович Белюк Константин Сергеевич Ославский Андрей Иванович Безмен Инна Александровна(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(57) Способ моделирования гнойно-некротического парапанкреатита у млекопитающего в эксперименте, при котором через хирургический доступ мобилизуют часть поджелудочной железы, локально травмируют ее путем раздавливания, инъекцией вводят в паренхиму железы гнойное отделяемое из дренажа парапанкреатической клетчатки больного деструктивным панкреатитом, формируют карман в забрюшинной клетчатке, погружают в сформированный карман мобилизованную часть поджелудочной железы и ушивают рану. Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к экспериментальной хирургии, и может использоваться для изучения патологических процессов в забрюшинной клетчатке, определения эффективности воздействия различных методов лечения при развитие острого гнойно-некротического парапанкреатита. Необходимость в создании такого изобретения вызвана ростом заболеваемости панкреатитом, особенно его деструктивных форм. Известно, что основным патоморфологическим субстратом гнойных осложнений острого деструктивного панкреатита служит гнойно-некротический парапанкреатит. Поражение забрюшинной клетчатки при деструктивном панкреатите является компонентом местного патологического процесса, и если панкреатит и парапанкреатит начинаются практически одновременно, то в дальнейшем деструктивные процессы в самой железе затихают в течение нескольких суток, а экстрапанкреатическое поражение (парапанкреатит) может прогрессировать в течение нескольких недель. Это доказывают результаты аутопсии пациентов, умерших в более поздние сроки деструктивные изменения в поджелудочной железе минимальны, а обнаруживаются в забрюшинной клетчатке в трудно доступных для санации местах. Изучить и обосновать методики эффективного лечения этой тяжелой патологии можно только в экспериментах 15016 1 2011.10.30 на животных. Данная модель поможет экспериментальным путем обосновать возможности коррекции развивающейся патологии. В экспериментальной практике известен ряд способов моделирования острого панкреатита. Один из них связан с травматизацией паренхимы поджелудочной железы. Под интраплевральным наркозом краниальным срединным доступом послойно вскрывается брюшная полость. В рану выводятся двенадцатиперстная кишка и правая доля поджелудочной железы, на которую в области ее середины в поперечном направлении наносится дозированная травма специальным аппаратом, занимающая 2,0 см ширины паренхимы органа 1. Недостатками этого метода являются предложенный способ не отражает процессы,протекающие в парапанкреатической клетчатке, не дает возможности оценить влияние парапанкреатита на состояние лабораторного животного, требует наличия специального устройства для нанесения травмы. Известен способ моделирования острого панкреатита, основанный на перевязке панкреатического протока и инфицировании железы. У лабораторных животных перевязывают выводные протоки поджелудочной железы, а вслед за этим в шейную вену вводят 1 мл микробной взвеси, содержащей 2 млрд. микробных тел из суточной культуры стафилококк, обладающий гемолитическими свойствами, или патогенные штаммы кишечной палочки 2. Недостатками этого метода являются не происходит развития воспалительных изменений в парапанкреатической клетчатке, вследствие этого оценка влияния деструктивных изменений в забрюшинной клетчатке на состояние лабораторного животного невозможна. При анализе доступной литературы нам не удалось найти способ, который мог бы являться прототипом заявляемого изобретения. Задача изобретения - создание модели острого гнойно-некротического парапанкреатита, наиболее полно отражающей процессы, происходящие у больных с данной патологией в клинических условиях. Поставленная задача решается путем мобилизации части поджелудочной железы через хирургический доступ, после чего ее локально травмируют путем раздавливания, инъекцией вводят в паренхиму железы гнойное отделяемое из дренажа парапанкреатической клетчатки больного деструктивным панкреатитом, формируют карман в забрюшинной клетчатке, погружают в сформированный карман мобилизованную часть поджелудочной железы и ушивают рану. Способ осуществляют следующим образом. Под внутривенным наркозом после асептической обработки операционного поля производят послойное вскрытие брюшной полости косым доступом в правом подреберье. Мобилизуют правую долю поджелудочной железы на протяжении 4-5 см. В дистальной части правой доли в поперечном направлении на протяжении 3 см приводят раздавливание паренхимы железы зажимом 3 раза в разных местах. В травмированную паренхиму железы вводят 1 мл микробной взвеси(гнойное отделяемое из дренажей, стоящих в парапанкреатическом пространстве, взятое накануне моделирования у больных с острым деструктивным панкреатитом, парапанкреатитом). Двенадцатиперстную кишку отводят медиально. Рассекают париетальную брюшину в области верхнего полюса правой почки, тупо формируют карман размером 4-31,5-2,5 см в забрюшинной клетчатке. Дистальную часть правой доли поджелудочной железы протяженностью 4 см с травмированным участком и введенной микробной взвесью помещают в сформированный карман в забрюшинной клетчатке. Париетальную брюшину над участком железы, помещенной в клетчатку забрюшинного пространства, сопоставляют путем ушивания. Брюшную полость послойно ушивают. 2 15016 1 2011.10.30 Таким образом, травмированная и инфицированная часть поджелудочной железы располагается забрюшинно, как у человека, в которой непременно происходит развитие острого гнойного панкреатита с распространением процесса на клетчатку забрюшинного пространства и развитием парапанкреатита. Приводим пример, доказывающий возможность осуществления способа. Пример 1. Кролик А. Самка массой около 3500 г (Протокол 170 от 27.02.08). Под внутримышечным и внутривенным калипсоловым наркозом, после обработки передней брюшной стенки, косым доступом в правом подреберье послойно вскрыта брюшная полость. Дистальная часть правой доли поджелудочной железы мобилизована на протяжении 4 см. Двенадцатиперстная кишка отводится медиально. Рассекается париетальная брюшина, в клетчатке забрюшинного пространства тупо сформирован карман размером 3,51,5 см. На мобилизованную часть поджелудочной железы наносится травма зажимом трехкратно в разных местах на протяжении 3 см, в паренхиму железы вводится с помощью шприца 1,0 мл гнойного отделяемого из дренажей, стоящих в парапанкреатической клетчатке(Больной Чупрета В Диагноз Острый деструктивный панкреатит. Парапанкреатит. Дата забора 27.02.2008. Микробиологическое исследование выделенная микрофлора, примерно в 1 мл содержится 105 КОЕ). Травмированная и инфицированная часть железы погружается в сформированный карман в забрюшинной клетчатке. Париетальная брюшина над травмированной железой сопоставляется путем ушивания. Контроль на гемостаз. Брюшная полость послойно ушивается, кролик помещается в отдельную клетку. Подтверждением развития гнойно-некротического парапанкреатита является состояние лабораторного животного, лабораторные данные, данные аутопсии, гистологические исследование. Ухудшение состояния лабораторного животного наблюдалось с первых суток и проявлялось отказом от пищи, вялостью, адинамией, вялой реакцией на прикосновение,нарастающими с каждым днем. Изменения в общем анализе крови нарастание лейкоцитоза с 4,9 до 12,9, палочкоядерных нейтрофилов с 6 до 16, появление нормобластов 7. Изменения в биохимическом анализе крови нарастание амилазы с 418 до 801. Гибель животного наступила на 3-е сутки после моделирования острого гнойно-некротического,парапанкреатита. При аутопсии в брюшной полости геморрагический выпот, рыхлый спаечный процесс в верхнем этаже. Забрюшинная клетчатка в области сформированного кармана отечна, багрового цвета. Полость размером 3,53,0 см с деструкцией окружающей клетчатки без четкого отграничения от окружающей клетчатки. В полости гной, секвестры, очаги некроза жировой клетчатки. Поджелудочная железа в сформированной полости увеличена за счет отека, темно-багрового цвета, с множественными очагами некроза и кровоизлияниями на поверхности, секвестрами в местах раздавливания. Железа в брюшной полости розового цвета, отек незначительно выражен. При гистологическом исследовании в железе из сформированной полости отмечается резкий отек, венозное полнокровие с обширными кровоизлияниями, выраженная лейкоцитарная инфильтрация в области ацинусов. В жировой клетчатке выраженная лейкоцитарная инфильтрация, очаги некроза наиболее выражены в области сформированной полости. Преимущества способа 1. Моделируется не только острый деструктивный панкреатит, но и парапанкреатит с образованием гнойно-жировой полости в забрюшинной клетчатке. 2. Создание модели острого деструктивного панкреатита с парапанкреатитом в сравнении с другими способами наиболее полно отражает процессы происходящие у больных с острым деструктивным панкреатитом в клинических условиях. 3 15016 1 2011.10.30 Используя данное техническое решение, появляется возможность моделирования такого грозного осложнения деструктивного панкреатита, как острый гнойно-некротический парапанкреатит. Важным моментом предлагаемого способа является использование идентичной микрофлоры, как и при данной патологи в клинике. Предлагаемое изобретение является доступным для выполнения и может использоваться в научно-исследовательских лабораториях для экспериментальной оценки вопросов патогенеза, диагностики и способов коррекции острого гнойно-некротического парапанкреатита, заболеваемость которым в последнее время неуклонно возрастает. Источники информации 1. Жук И.Г. Органосохраняющие операции при острой патологии поджелудочной железы. - Гродно, 2006. - С. 16-18. 2. Величенко В.М. Острый панкреатит в эксперименте и клинике. - Минск.- 1971. С. 29-31. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4