Ген, придающий устойчивость к возбудителям фитофторы (фитофторозу) растениям семейства пасленовых

5. Растение семейства 5 о 1 апасеае, устойчивое к патогену из группы Оошусога рода Рпугорьшога, полученное из клетки по п. 4.6. Часть, произведенная из растения по п. 5, содержащая нуклеиновую кислоту по п. 1 или 2.7. Часть по п. 6, отличающаяся тем, что представляет собой клубень или плод, предпочтительно кпубень картофеля или плод томата.8. Белок, содержащий аминокислотную последовательность, представленную на фигуре 8 описания, или ее функциональный эквивалент, кодируемый нуклеиновой кислотой по п. 1 или 2, продуцируемый в растении по п. 5, при этом белок обеспечивает устойчивость растения к патогену из группы Оошусота рода РЬуторЬтЬога.9. Применение нуклеиновой кислоты по п. 1 или 2 для получения растения семейства о 1 апасеае, устойчивого к патогену из группы Оошусоъа рода РЬуторЬгЬога.10. Применение по п. 9, отличающееся тем, что получают растение семейства о 1 апасеае, устойчивое к патогену из группы Оошусота вида РЬугорЬтЬога йпгезтапз.11. Применение по п. 9 или 10, отличающееся тем, что получают растение 5. гиЬегоэиш.12. Способ получения растения семейства 8 о 1 апасеае обладающего устойгшвостью к патогену из группы Оотусота рода РЬуторЬгЬога, включающий регенерацию растения изФитофтороз, вызываемый относящимся к классу оомицетов патогеном РЬуторЬЪЬога йпгезтапз, является распространенной по всему свету наиболее деструктивной болезнью для культивирования картофеля. Эта болезнь является также угрозой культуре томата. Настоятельность получения устойчивых сортов(культиваров) интенсифицировалась по мере быстрого возникновения вирулентных, специализированных в отношении определенных культур иУСТОЙЧИВЫХ К пестицидам штаммов ЭТОГО ПЗТОГСНЗ.Способом предупреждения неурожаев или уменьшенных урожаев является Применение фунгицидов, которые предотвращают или излечивают инфекцию Р. шгезтапз. Однако считается, что применение этих защищающих посев агентов является нагрузкой для окружающей среды. Так в нескольких западных странах законодательство становится более ограничивающим и частично запрещающим применение специфических фунгицидов, делая более трудной химическую борьбу с данной болезнью. Альтернативным подходом является применение сортов, которые несут частичную или полную устойчивость к фитофторозу. Два типа устойчивости к фитофторозу были описаны и использованы в селекции картофеля. ОДИН ТИП придается НССКОЛЬКИМИ ОСНОВНЫМИ доминантными ГСНЕХМИ,которые делают хозяина несовместимым со специфическими расами этого патогена (раса-специфическая устойчивость). Одиннадцать таких К-генов (К 11111) были идентифицированы, и считается, что они происходят из дикого вида картофеля 8 о 1 апит бешйззиш, который является природным в Мексике, где обнаружена наибольшая генетическая изменчивость этого патогена. Некоторые из этих К-генов были картированы на генетической карте картофеля (обзор ОеЬЬагт апс 1 Уашопеп, 2001 Ашш. Кеу. РЬуторатЬоЪ 39 79-102). 111 и К 2 локализованы на хромосомах 5 и 4 соответственно. КЗ, Кб и 117 локализованы на хромосоме 11. Неизвестные К-гены, придающие раса-специфическую устойчивость к фитофторозу, были описаны также в 8. шЬегозцш ззр. апатдепа и 8. ЬепЬаиПйУСТОЙЧИВОСТИ И ЛСГКОСТИ переноса МНОГИЕ СОрТЗ содержат ПрОИСХОДЯЩуЮ ИЗешйвзиш устойчивость. К сожалению, происходящая из 8. аешйззит расаспецифическая устойчивость, хотя и является почти полной, не является продолжительной. Как только заново выведенные сорта выращивают в крупном масштабе в коммерческих полях, возникают новые вирулентности в Р. йнгезтапз,которые делают этот патоген способным преодолевать приобретенную интрогрессией устойчивость. Второй тип устойчивости, называемый полевой устойчивостью и часто встречающийся в природе, считается не специфическим в отношении расы и более продолжительным. Полевая устойчивость к фитофторозуможет быть обнаружена в некоторых видах 5 о 1 апиш в Мексике и Средней иДиплоидный 5. Ьитосазканиш из Мексики И Гватемалы является одним из имеющих клубни видов, который известен изза его высоких уровней полевой устойчивости к фитофторозу (Меаегйаизег апс 1 М 1115 1953 Рйуторатйоюву 43 456457). Несмотря на различия в балансовых числах в эндосперме интрогрессия признака устойчивости 5. Ьи 1 Ьосазтапит была успешной. Манипуляции с плоидностью и ряд трудоемких Ьгйаде-скрещиваний привели к полученной из 8. Ьшьосазтапшп, Р. йпгезгапз-устойчивой зародышевой плазме (Негтзеп апс 1 Кашаппа, 1969 Еирнуйса 182735 1973 Епрнуйса 22457-466 Кашаппа агк 1 Нетшзен, 1971 ЕирЬутйса 2 О 470-481 Негтзеп апс 1 Пе Воет, 1971 ЕирЬуйса 2017180). Однако спустя почти 40 лет после получения первых гибридов И интенсивной и непрерывной селекционной работы селекционеров, занимающихся селекцией картофеля в Нидерландах с этой зародышевой плазмой, устойчивые к фитофторозу сорта все еще не были выведены на рынок. Успешное получение соматических гибридов 5. Ьи 1 Ьоса 5 танит и 5. шЬетозиш также сообщалось(ТЫеше ет а 1. 1997 Епрнутйса 97(2)189200 Не 13 е 5 оп е а 1. 1988 ТЬеог Арр 1. берет 96738-742). Было обнаружено, что некоторые из этих гибридов и полученная обратным скрещиванием зародышевая плазма являются высокоустойчивьтми к фитофторозу, даже при экстремальной нагрузке этой болезни. Несмотря на сообщения о супрессии рекомбинации устойчивость в полученном обратным скрещиванием материале находится, по-видимому, на хромосоме 8 в интервале приблизительно 6 сМ между маркерами КРЬР СР 53 и СТ 64 (Маезз е а 1. 2000 ТЬеог. Арр 1 берет 101697-704). Маркер САРБ, полученный из КРЬР-зонда СТ 88хромосомами 8. Ьи 1 Ьоса 5 тапин 1 и 5. тиЬегозит образует потенциальное препятствие для успешного восстановления повторно культивируемой зародышевой плазмы картофеля до уровня, который мог бы удовлетворять стандартам для новых селекционированных сортов картофеля. Выделение генов,которые кодируют устойчивость, обнаруженную в 5. Ьшьосазтапит, и последующая трансформация существующих сортов этими генами были бы гораздо более прямым и более быстрым подходом в сравнении использующейКлонирование и молекулярная характеристика многочисленных генов К растений, придающих устойчивость к болезням, вызываемым бактериями,грибами, вирусами, нематодами и насекомыми, идентифицировали несколько структурных признаков, характерных для генов К растений (обзор Папе апс 1 Зопез, 2001 Машге 411, 826-833). Большинство из них являются членами тесно связанных мультигенных семейств, и все гены К, охарактеризованные до сих пор,за исключением Рто, кодируют богатые лейцином повторы (ЬКК), структуры,которые, как было показано, участвуют в межбелковых взаимодействиях. ЬККсодержащие гены К могут быть подразделены на два класса на основе присутствия предположительного состоящего из трех частей нуклеотидсвязывающего сайта (МВЗ). Гены К класса ЫВЗ-ЬКК содержат мотивы,которые являются общими с регуляторными белками апоптоза животных (уап с 1 ег В 1 е 2 ен е а 1., 1998 Сигг. В 1 о 1. 8, 226-227 Атак/Зло е а 1., 1999 Тгепоз Вйоснет. 501. 24, 47-53) и могут быть подразделены на две подгруппы на основе М-концевого домена, который либо проявляет сходство последовательности с белком То 11 Вго 5 ор 1111 а и доменом рецептора интерлейкина-1 млекопитающего (ПК-МВЗЬКК), либо содержит потенциальную лейциновую молнию или домен скрученной спирали (СС-ЫВБ-ЬКК Ран е а 1., 2000 Оепейсз, 1552309-22). Гены ЬКК-К без ЫВЗ кодируют трансмембранные белки, внеклеточный М-концевой район которых состоит из ЬКК (довез ет а 1., 1994 Аду. Вот. Кез. 24, 89-167). Эти гены могут быть подразделены на две подгруппы на основе присутствия цитозольного домена серин/треонинкиназы (011 е а 1., 1995 5 с 1 ег 1 се, 270, 1804-1806). В настоящее время были клонированы четыре гена К из картофеля. Все четыре, в том числе полученный из 5, дешйвзит ген К 1, придающий раса-специфическую