Способ оценки созревания эмбрионов у коров-доноров

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ СОЗРЕВАНИЯ ЭМБРИОНОВ У КОРОВ-ДОНОРОВ(71) Заявитель Совместное общество с ограниченной ответственностью БелСимекс(72) Авторы Кысса Иван Степанович Казаровец Николай Владимирович Голубец Леонид Викторович Попов Максим Витальевич Заневская Елена Казимировна(73) Патентообладатель Совместное общество с ограниченной ответственностью Бел-Симекс(56) Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. М., 1987. - С. 29-36. Технология трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве. Жодино, 1996. - С. 14-16. Биотехнология получения и трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота Методические рекомендации. Жодино, 2004. - С. 19-21.1872 1, 1997.7422 1, 2005.(57) Способ оценки созревания эмбрионов у коровы-донора эмбрионов, отличающийся тем, что корове в лютеиновой фазе полового цикла вводят фолликулостимулирующий гормон в дозе 40 мг восьмикратно через 12 часов, осуществляют ее искусственное осеменение, на 5 день после искусственного осеменения вводят препарат рецептал в дозе 25 мкг/кг живой массы животного одноразово и на 6-8 день определяют уровень фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови коровы-донора эмбрионов, причем, если уровень фолликулостимулирующего гормона в сыворотке крови составляет 0,44-0,57 /л,эмбрионы считают созревшими и пригодными для пересадки. Изобретение относится к животноводству, в частности к биотехнологии воспроизводства сельскохозяйственных животных. Известен способ использования фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), применяемый для вызывания суперовуляции у коров-доноров в лютейновую фазу полового цикла путем восьмикратных внутримышечных инъекций 1. Известен способ обработки коров-доноров эмбрионов, включающий введение гонадотропного гормона графоллона для повышения оплодотворяемости яйцеклеток и полноценного созревания эмбрионов 2. Известен также способ прогнозирования репродуктивных качеств животных, позволяющий оценить полноценность половой охоты и качество яйцеклеток самок крупного рогатого скота. В сыворотке крови животных определяют содержание жирных кислот и по величине коэффициента метаболизма судят о полноценности половой охоты животного 3. 14061 1 2011.02.28 Однако данные способы малоэффективны в определении оптимальных сроков извлечения зрелых эмбрионов у коров-доноров при трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота коровам-реципиентам. Задача изобретения - повышение достоверности определения сроков созревания эмбрионов у коров-доноров. Сущность изобретения. Способ оценки созревания эмбрионов у коров-доноров, включающий внутримышечное введение в лютеиновую фазу полового цикла самок крупного рогатого скота фолликулостимулирующего гормона, искусственное осеменение, взятие крови и определение в ней физиологического показателя, по которому судят о степени созревания эмбрионов, извлечение эмбрионов и определение пригодности их к эмбрионопересадке коровам-реципиентам, причем он дополнительно включает обработку коровдоноров, за 1-2 дня до извлечения эмбрионов, стимулятором оплодотворяемости яйцеклеток - аналогом ганадотропного гормона рецепталом, а о степени созревания и пригодности к пересадкам полноценных эмбрионов коров-доноров судят по количественному содержанию в сыворотке крови фолликулостимулирующего гормона в пределах 0,440,57 МЕ/л на 6-й или 7-й день полового цикла животного, при этом обработку рецепталом животных осуществляют одноразово на 5-6-е сутки полового цикла в дозе 25 мкг/кг живой массы коровы-донора. Гонадотропный гормон гипофиза рецептал используется для искусственного стимулированного размножения рыб при заводском способе инкубации оплодотворенной икры в специальных инкубационных аппаратах, обладает узкой зоной воздействия на организм. Он действует не прямо на ооциты, а на фолликулярные клетки яичника, побуждая их к выработке веществ, стимулирующих созревание, оплодотворяемость и овуляцию ооцитов. Рецептал используют в дозе 25 мкг/кг живой массы. Способ осуществляют следующим образом. Пример. Эффективность предлагаемого способа изучали в научно-производственном опыте на 50 аналогичных клинически здоровых коровах-донорах черно-пестрой породы 4-6-летнего возраста в период с 60 до 90 дней после отела. Контролем служили аналогичные животные, суперовуляцию и нехирургическое извлечение эмбрионов осуществляли без оценки сроков созревания их эмбрионов на 7 день после первого искусственного осеменения. Животные находились в равных условиях кормления и содержания. Стимуляцию суперовуляции проводили на 10 день полового цикла. В первой группе коров-доноров (контроль) обрабатывали в лютеиновой фазе полового цикла натуральным ФСГ американского производства восьмикратно через 12 ч по базовой методике стимулирования суперовуляции в дозе 40 мг/гол. Донорам второй группы внутримышечно инъекцировали в той же фазе полового цикла вышеназванный ФСГ в тех же объемах. На 5-й день после искусственного осеменения, за 1-3 дня до извлечения эмбрионов им вводили подкожно стимулятор оплодотворяемости яйцеклеток - аналог ганадотропного гормона рецептал в дозе 25 мкг/кг живой массы коровы-донора. Извлечение эмбрионов и их оценка были те же, что и у животных 1-й группы. У животных третьей группы, обработанных также как и коровы 2-й группы, эмбрионы извлекали тем же способом, но при количественном показателе содержания в сыворотке их крови на 6-8 сутки полового цикла животного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) 0,58 МГ/л и более. Животные четвертой и пятой групп подвергались тем же обработкам, что и животные третьей группы, но извлечение у доноров эмбрионов и оценку их качества проводили при уровне ФСГ в их крови на 6-8 сутки полового цикла в пределах 0,44-0,57 МЕ/л (4-я группа) и 0,43 МЕ/л и менее (5-я группа). Усредненные результаты опыта приведены в таблице. 14061 1 2011.02.28 Показатели Количество животных, голов Уровень ФСГ в сыворотке крови на 6-8 сутки полового цикла,МЕ/л Овуляций, штук/донора Получено эмбрионов всего,штук/донора то же,в том числе пригодных к пересадке, штук/донора то же,Данные опыта свидетельствуют, что у коров-доноров после обработки ганадотропным гормоном рецепталом в дозе 25 мкг/кг живой массы коровы-донора повышается выход полноценных эмбрионов на 15,1 , а если вымывание эмбрионов осуществлять при наличии в крови животных ФСГ в пределах 0,44-0,57 /л, то данный показатель увеличивается на 78,8 по сравнению с контролем. Таким образом, использование способа оценки созревания эмбрионов у коров-доноров позволяет повысить достоверность определения сроков созревания эмбрионов у животных. Источники информации 1. Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. - М., 1987. 2. Патент РФ 2156117 1, 2000. 3. А.с. СССР 1569004 1, 1990. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3