Способ отбора скота красной белорусской породной группы

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОТБОРА СКОТА КРАСНОЙ БЕЛОРУССКОЙ ПОРОДНОЙ ГРУППЫ(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный аграрный университет(72) Авторы Пестис Витольд Казимирович Шейко Иван Павлович Танана Людмила Александровна Епишко Татьяна Ивановна Курак Ольга Павловна Коронец Иван Николаевич Пешко Валентин Валентинович(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный аграрный университет(56) СУЛИМОВА Г.Е. и др. Генетика, 2007. Т. 43. -1. - С. 88-95. ПЕШКО В.В. и др. Весц Нацыянальнай акадэм навук Беларус. Серыя аграрных навук. - 2006. -5. - С. 174-176.1825298 3, 1993.(57) Способ отбора скота красной белорусской породной группы с высокой селекционной ценностью и повышенным уровнем белковомолочности, заключающийся в том, что методом полимеразной цепной реакции по полиморфизму длин рестрикционных фрагментов проводят ДНК-тестирование генотипа скота по локусу гена каппа-казеина и отбирают животных, имеющих в генотипе аллель 3 гена каппа-казеина. Изобретение относится к животноводству, в частности к методам селекции в скотоводстве. Известен метод селекции крупного рогатого скота, в частности, для повышения уровня белка в молоке, с использованием селекционных индексов 1. Недостатком данного метода является то, что использование селекционного индекса оправдано только тогда,когда отбор животных по его величине не предполагает возможное значительное снижение уровня одного или нескольких признаков, составляющих индекс. Сложность при использовании метода индексов состоит также в определении не только генетической, но и экономической значимости отдельных селекционируемых признаков. Кроме того, наиболее сложным является применение селекционных индексов при оценке животных различного возраста, пола, направления продуктивности конкретного стада. Наиболее близким по сущности к способу применения ДНК-тестирования по локусу гена каппа-казеина является метод селекции крупного рогатого скота с применением иммуногенетических маркеров 2. Однако недостатком данного метода является то, что иммуногенетические маркеры не связаны непосредственно с генами, контролирующими хозяйственно-полезные признаки, а только входят в единый коадаптированный комплекс генов, формирующийся при направленном отборе, а также относительная сложность про 12886 1 2010.02.28 ведения анализов. Все это затрудняет оценку племенной ценности животных и снижает эффективность селекции. Заявляемое изобретение направлено на отбор скота красной белорусской породной группы с применением ДНК-тестирования по локусу гена каппа-казеина. Указанная задача достигается посредством применения способа отбора скота красной белорусской породной группы с высокой селекционной ценностью и повышенным уровнем белковомолочности при использовании метода полимеразной цепной реакции и полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ), с помощью которого проводят ДНК-тестирование генотипов скота красной белорусской породной группы по локусу гена каппа-казеина и отбирают животных, имеющих в генотипе аллель 3 гена каппа-казеина. Поставленная задача решается следующим образом. Берутся пробы ткани (ушной выщип) у подопытных животных, и проводится ПЦРПДРФ анализ в такой последовательности ядерная ДНК выделяется из пробы ткани перхлоратным методом. Основные растворы для выделения ДНК, амплификации и рестрикции готовятся по Маниатису, Фрич Э., Сэмбруку Дж. 3. Для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР) используются олигонуклеотидные праймеры 1 5-ААА ТАТ АТСТ-3 и 2 5-ТТТТСС АТС ААТ СТТ -3. Концентрация ДНК, специфичность амплификата и результаты рестрикции оцениваются электрофоретическим методом в агарозном геле, окрашенном бромистым этидием, с помощью трансиллюминатора в проходящем УФ-свете с длиной волны 260 нм. В качестве маркера используются ДНК-плазмиды 322, расщепленные рестриктазой . 10 мкл амплификата расщепляется рестриктазойпри температуре 37 С в течение 4-х часов. Продукты рестрикции разделяются электрофоретически в 4 агарозном геле при напряжении 100 В в течение 1 часа. Для анализа распределения рестрикционных фрагментов ДНК в агарозном геле после электрофореза используется компьютерная видеосистема и программа . На основании полученных данных проводится отбор животных,имеющих в генотипе аллель 3. Процесс сохранения генофонда скота красной белорусской породной группы предполагает отбор животных с высокой племенной ценностью и повышенным уровнем белковомолочности. Использование ДНК-тестирования по локусу гена каппа-казеина, определяющего уровень белка в молоке при отборе скота красной белорусской породной группы, по сравнению с существующими способами имеет следующие преимущества повышает точность определения племенной ценности животных, так как базируется на анализе наследственной информации, то есть непосредственно генотипа возможность проведения тестирования в раннем возрасте, независимо от пола животных и условий внешней среды повышает эффективность селекции и ускоряет процесс сохранения генофонда скота красной белорусской породной группы. Пример конкретного выполнения. Исследования проводились с использованием шестидесяти шести коров красной белорусской породной группы, содержащихся в ЧУП Новый Двор - Агро Свислочского района Гродненской области. Оценку животных осуществляли по результатам проведенного анализа ПЦР-ПДРФ. Для дальнейшей селекции отбирали животных, имеющих в генотипе аллель 3. В результате исследований установлено, что содержание белка в молоке находилось в зависимости от генотипа животных по гену каппа-казеина. Выявлено повышение уровня белка в молоке животных, несущих в своем генотипе аллель 3. Выявлено превосходство животных генотипа 3 над генотипами 3 и 3 по данному признаку на 0,51 и 0,43 соответственно. 2 12886 1 2010.02.28 Результаты ДНК-тестирования коров красной белорусской породной группы по локусу гена каппа-казеина Показатели Количество голов Удой, кг Содержание жира,Содержание белка,Полученные результаты свидетельствуют о том, что отбор животных с учетом генетических факторов, оказывающих существенное влияние на уровень белковомолочности (в частности, генотипов по гену каппа-казеина), позволит не только сохранить генофонд скота красной белорусской породной группы, но и проводить дальнейшую работу по созданию белорусской красной породы. В селекционных программах следует использовать животных-носителей желательного аллеля 3 гена каппа-казеина. Таким образом, способ отбора скота красной белорусской породной группы позволяет проводить ДНК-тестирование животных в раннем возрасте, что повышает интенсивность и качество селекционного процесса для сохранения генофонда скота красной белорусской породной группы. Источники информации 1. Рахматулина Н.Р., Егиазарян А.В., Сервак Б.А. Комплексный индекс оценки племенной ценно сти коров и быков-производителей // Селекционно-генетические методы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных б. науч. тр. - СПб., 2004. С. 50-61. 2. Чернушенко В.К. Повышение эффекта селекции молочного скота при использовании иммуногенетических маркеров Автореф. дис д-ра с. х. наук / ВИЖ. Дубровицы,Моск. обл., 1992. 3. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. - М. Мир, 1984. С. 480. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3