Среда для криоконсервирования эмбрионов

01 1/02 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СРЕДА ДЛЯ КРИОКОНСЕРВИРОВАНИЯ ЭМБРИОНОВ(71) Заявитель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Будевич Александр Иванович Павленя Александр Константинович Козел Александр Анатольевич(73) Патентообладатель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(57) Среда для криоконсервирования эмбрионов, включающая криопротектор, фосфатносолевой буфер, сыворотку крови теленка и пенициллин, отличающаяся тем, что в качестве криопротектора содержит этиленгликоль и дополнительно - пиридоксин при следующем соотношении компонентов на 1 мл этиленгликоль, мл 0,083-0,085 сыворотка крови теленка, мл 0,03-0,05 пенициллин, ед. 100-120 пиридоксин, мг 0,00015-0,00018 фосфатно-солевой буфер, мл остальное.(56) Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. - М., 1987. - С. 38-41.19990903 , 2000. Трансплантация и культивирование эмбрионов крупного рогатого скота. Л., 1989. С. 26-27.5504002 А, 1996.5985538 А, 1999.00/30441 1.2142701 , 1990.91/03935 1.22409 , 1998. Изобретение относится к биотехнологии эмбриопересадок у крупного рогатого скота. Известна среда для криоконсервирования эмбрионов крупного рогатого скота, включающая криопротектор - раствор глицерина, который готовят на фосфатно-солевом буфере, содержащем пенициллин и сыворотку крови. (Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. - М., 1987. - С. 40-41). Однако эффективность использования среды невысокая, при этом глицерин медленно выводится из эмбриона после размораживания, что снижает качество и жизнеспособность имплантируемых реципиентам эмбрионов. 6145 1 Задача изобретения - повышение жизнеспособности и приживляемости эмбрионов крупного рогатого скота. Сущность изобретения. Среда для криоконсервирования эмбрионов, включающая криопротектор, фосфатно-солевой буфер, сыворотку крови теленка и пенициллин, причем в качестве криопротектора берут этиленгликоль и дополнительно вводят пиридоксин (витамин В 6) при следующем соотношении компонентов на 1 мл этиленгликоль, мл 0,083-0,085 сыворотка крови теленка, мл 0,03-0,05 пенициллин, ед. 100-120 пиридоксин, мг 0,00015-0,00018 фосфатно-солевой буфер, мл остальное. Среду для криоконсервирования эмбрионов готовят следующим образом. Отмеряют 0,5-0,6 мл фосфатно-солевого буфера и добавляют в него 0,03-0,05 мл стандартной сыворотки крови теленка, 0,083-0,085 мл химически чистого этиленгликоля (ГОСТ-10164-62),0,00015-0,00018 мг пиридоксина и 100-120 ед. пенициллина. Раствор доводят до 1 мл фосфатно-солевым буфером и тщательно перемешивают. Для определения эффективности использования предложенной среды был проведен научно-производственный опыт, в котором были изучены сохранность и приживляемость 40 замороженных и оттаянных эмбрионов крупного рогатого скота, полученных от высокопродуктивных коров-доноров черно-пестрой породы. Извлечение эмбрионов, их оценку и пересадку реципиентам - телкам черно-пестрой породы случного возраста с живой массой 360-380 кг проводили согласно общепринятой Инструкции по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. Эмбрионы опытной группы насыщались одноступенчато криозащитной средой 1,5 М-м раствором этиленгликоля с введенным в его состав витамином В 6 (пиридоксин). Контролем служила базовая среда, где криопротектором был глицерин без добавления пиридоксина. Замораживание всех групп зародышей проводили на программном замораживателе ЭМБИ-К со скоростью 0,3 С/мин с переносом биоматериала после окончания цикла в жидкий азот. Оттаивание эмбрионов осуществлялось в водяной бане при температуре 36 С в течение 10-12 с. Удаление защитных сред и отмывание эмбрионов проводились по общепринятой методике. Результаты эксперимента приведены в таблице. Контроль Опыт Показатели Заморожено и оттаяно эмбрионов 32 40 95,0 Сохранность эмбрионов после оттаивания 29 90,6 38 95,0 Количество эмбриопересадок 26 37 Приживляемость эмбрионов у реципиентов 12 46,2 20 54,1 Таким образом, сохранность эмбрионов и их приживляемость в половых путях животных-реципиентов значительно выше, чем при использовании базовой среды для криоконсервирования эмбрионов с использованием криопротектора - глицерина и без добавления в среду активатора - пиридоксина. Источники информации 1. Инструкция по трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота. - М., 1987. С. 40-41. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.