Способ оценки всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке у крысы в эксперименте

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ ВСАСЫВАНИЯ ГЛЮКОЗЫ В ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКЕ У КРЫСЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чумак Анатолий Георгиевич Люзина Ксения Михайловна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ оценки всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке у крысы в эксперименте, заключающийся в том, что осуществляют лапаротомический доступ к двенадцатиперстной кишке и поддиафрагмальному стволу блуждающего нерва, проводят регистрацию электрофизиологическим методом исходной частоты нервных импульсов в блуждающем нерве, вводят в просвет двенадцатиперстной кишки 0,5-1 мл 40 -ного подогретого до 37 С раствора глюкозы, продолжают регистрацию в течение 50-60 мин и оценивают всасывание глюкозы в двенадцатиперстной кишке как нормальное при частоте нервных импульсов в блуждающем нерве спустя 50-60 мин после введения раствора глюкозы, превышающей исходную частоту в 1,5-2 раза. Изобретение относится к физиологии, в данном случае к разделу физиологии кишечника и физиологии пищеварения. Заявителю не известен способ электрофизиологического определения в эксперименте нормального состояния процесса всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке лабораторного животного, в силу чего не может быть указан ближайший аналог. Задачей заявляемого изобретения является создание способа электрофизиологического определения в эксперименте нормального состояния процесса всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке лабораторного животного, позволяющего точно определить функционирование клеток, ответственных за всасывание углеводов. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ оценки всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке у крысы в эксперименте, заключающийся в том, что осуществляют лапаротомический доступ к двенадцатиперстной кишке и поддиафрагмальному стволу 17908 1 2014.02.28 блуждающего нерва, проводят регистрацию электрофизиологическим методом исходной частоты нервных импульсов в блуждающем нерве, вводят в просвет двенадцатиперстной кишки 0,5-1 мл 40 -ного подогретого до 37 С раствора глюкозы, продолжают регистрацию в течение 50-60 мин и оценивают всасывание глюкозы в двенадцатиперстной кишке как нормальное при частоте нервных импульсов в блуждающем нерве спустя 50-60 мин после введения раствора глюкозы, превышающей исходную частоту в 1,5-2 раза. Данное решение обусловлено тем, что всасывание углеводов пищи в желудочнокишечном тракте - это транспорт углеводов из полости желудочно-кишечного тракта во внеклеточную (межклеточную жидкость, кровь) и внутриклеточную жидкости организма. Большинство рецепторов желудочно-кишечного тракта являются терминалями волокон блуждающего нерва. Сенсорные волокна иннервируют слизистую оболочку, подслизистую основу, мышечные элементы, относящиеся к мышечной оболочке кишечника сплетения, и серозную оболочку. Имея такие проекции, афференты могут реагировать на изменения химической среды в полости, внутритканевом пространстве и сосудистой сети. Чувствительные окончания блуждающего нерва воспринимают широкий диапазон стимулов. Они отвечают на изменения химического состава внутрикишечного содержимого,включая углеводы. Таким образом, процесс всасывания глюкозы сопряжен с раздражением глюкорецепторов нервных волокон блуждающего нерва, расположенных в стенке кишки, что приводит к росту частоты импульсации в нерве. Поскольку глюкоза возбуждает соответствующие сенсорные рецепторы только после всасывания ее в ворсинки кишки,факт и степень усиления частоты нервных импульсов в вагусе точно свидетельствует о состоявшемся акте всасывания глюкозы. Пример. У животного (лабораторная крыса) для открытия доступа к нервам и органам брюшной полости производят лапаротомию. Петли двенадцатиперстной кишки аккуратно извлекают и располагают в термостабилизированной камере. Сверху открытые части внутренностей покрывают эластичной пленкой. Животное обогревают грелкой и укутывают ватой. Производят освобождение поддиафрагмального ствола блуждающего нерва от соединительных тканей. Нерв помещают на биполярные подвесные хлорсеребряные электроды с расстоянием между полюсами 2-3 мм. В кишку вводят силиконовый катетер. Применяют длительную (50-60 мин) регистрацию нервной активности, поэтому нервы на электродах покрывают смесью вазелинового масла с парафином. После установки электродов и датчиков брюшную полость покрывают слоем ваты. Контролируют глубокую температуру тела с помощью электронного термометра и состояние животных (частота и глубина дыхания, ЭКГ, регистрируемая во втором стандартном отведении с помощью игольчатых электродов). 40 -ный раствор глюкозы подогревают до 37 С и медленно вводят объемом 0,5-1 мл 2. Электрофизиологическая установкасостоит из экранирующей камеры, термостата,осциллографа, усилителя переменного тока с полосой пропускания от 10 Гц до 1 кГц, соединенного с помощью аналого-цифрового преобразователя с компьютером. Эксперименты выполняют с использованием компьютеров в режиме работы на линии. Сигналы регистрируют на жестком диске, анализируют и затем воспроизводят для иллюстраций при помощи программы . При наличии роста частоты импульсации в блуждающем нерве в ответ на внутрикишечное введение 0,5 мл раствора 40 -ной глюкозы в 1,5-2 раза от исходного уровня судят о нормальном состоянии всасывательной способности двенадцатиперстной кишки. Кроме этого, заявляемый способ по сравнению с биохимическими способами оценки всасывания глюкозы двенадцатиперстной кишкой менее травматичен, поскольку они основаны на изоляции петель кишки 1, 3. Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого способа позволяет точно определить нормальное функциональное состояние процесса всасывания глюкозы в двенадцатиперстной кишке у лабораторного 2 17908 1 2014.02.28 животного, по своей точности он соответствует биохимическим методам определения, но менее трудоемок и в меньшей степени является травматичным. Способ может быть использован в качестве экспресс-метода оценки процесса всасывания глюкозы в условиях острого опыта без дополнительных биохимических процедур оценить всасывательную способность кишки в норме и, благодаря этому, может быть использован при моделировании разнообразных экстремальных состояний у лабораторных животных. Источники информации 1. . . .. - 1997. - . 59. - .4. - . 245-251. 2. Чумак А.Г. и др. Новости медико-биологических наук. - 2008. -1-2. - С. 55-61. 3.. . . . - 2001. -98. - . 20. - . 11330-11335. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3