Способ оценки устойчивости томатов к фузариозному увяданию

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СПОСОБ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ ТОМАТОВ К ФУЗАРИОЗНОМУ УВЯДАНИЮ(71) Заявитель Белорусский государственный университет(73) Патентообладатель Белорусский государственный университет(57) Способ оценки устойчивости томатов к фузариозному увяданию, включающий воздействие на пыльцу токсическим агентом - фузариевой кислотой и оценку устойчивости по длине пыльцевых трубок, отличающийся тем, что используют фузариевую кислоту, специфичную для патосистемы томат -.в концентрации в питательной среде 0,15-0,30 г/л и по снижению длины пыльцевых трубок, не превышающей 50 по отношению к контролю, оценивают фузариозоустойчивость томатов.(56) 1. Методические указания по селекции сортов и гибридов томата для открытого и защищенного грунта. М., 1986. - С. 54-57. 2. Нгуен Хонг Минь. Селекцияна устойчивость к. .у томатов. Автореф. Дис. Канд. Биол. Наук. - Мн., 1991. - С.21. 3.2037287 1, 1995. 4.2012199 1, 1994. 5.2037288 1, 1995. Изобретение Способ оценки устойчивости томатов к фузариозному увяданию по мужскому гаметофиту(пыльце) относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений на болезнеустойчивость. Оно может быть использовано для экспресс-диагностики устойчивости томатов к патогену-. .(.)- по реакции пыльцы к его токсину - фузариевой кислоте. В настоящее время оценку устойчивости томатов к увяданию, вызываемому грибом.. .(.), проводят методами искусственного заражения сеянцев, отделенных побегов или взрослых растений, выращиваемых на инфекционном фоне. Степень поражения растений болезнью учитывают спустя 30 и 60 дней, используя 9-балльную шкалу оценки 1. Кроме того, оценка фузариозоустойчивости томатов может быть проведена и в лабораторных условиях на основе реакции протопластов и культуры тканей на воздействие фитотоксинов, содержащихся в культуральном фильтрате 2. Недостатком способа оценки на инфекционном фоне является выращивание большого объема инфекционного материала для внесения в грунт теплицы, длительный период появления симптомов заболевания и полного развития болезни, риск потери генотипов, восприимчивых к фузариозу, но имеющих другие ценные признаки. Недостатком лабораторных способов оценки является сложность, трудоемкость при выделении культуры протопластов и тканей и необходимость наличия специального оборудования. В обоих случаях процесс оценки генотипов трудоемкий, растянутый во времени и не позволяет проанализировать большой объем селекционного материала. Сущность предлагаемого способа заключается в том, что уровень устойчивости томатов к фузариозному увяданию определяется по росту пыльцевых трубок (как более информативного показателя) на среде с фузариевой кислотой. В предлагаемом способе используют в качестве селектирующего фактора токсин гриба фу 3848 1 зариума, что позволяет ускорить процесс отбора при селекции на фузариозоустойчивость, так как реакция на токсический агент проявляется быстро результат может быть получен в течение 24 часов. Кроме того, отпадает необходимость применения живого патогена в полевых условиях, что устраняет опасность распространения болезни. Вместе с тем, токсичные метаболиты можно выделить, накопить в любых количествах, а также хранить продолжительное время. Этот способ оценки прост, не требует сложных лабораторных манипуляций. Он позволяет за относительно короткое время провести оценку большого количества селекционного материала. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Пыльцу одной цветочной кисти делят на две части и одну из них проращивают на среде с токсическим агентом (опыт), а другую - на оптимальной среде(контроль). Измеряют длину пыльцевых трубок у проросших пыльцевых зерен в опыте и контроле отношение этих величин - относительный процент роста пыльцевых трубок - является показателем уровня устойчивости сорта. У устойчивых форм он в 1,5-2 раза, а у восприимчивой - в 4-4,5 раза ниже по сравнению с контролем. Разработка среды для диагностики устойчивости к фузариозу достигается тем, что в известную среду для проращивания пыльцы томатов, включающую 20 сахарозы, 0,006 борной кислоты в дистиллированной воде, вводят токсин гриба - фузариевую кислоту (5 бутилпиколиновую кислоту). Препарат фузариевой кислоты был получен из 30-дневной культуры стабильно вирулентного штамма Т 6 путем экстрагирования этилацетатом с последующей очисткой эфиром. Для выявления оптимального состава среды, обеспечивающей наиболее четкие различия по длине пыльцевых трубок устойчивых и восприимчивых к фузариозу образцов томатов, готовят 4 смеси ингредиентов, отличающихся содержанием фузариевой кислоты, г/л соответственно 0,05 0,15 0,30 и 0,50. В таблице приведены сравнительные данные по воздействию сред с различным содержанием фузариевой кислоты на длину пыльцевых трубок устойчивых (Л 8559/79 Л 2661/80) и восприимчивого (Перамога 165) к фузариозу образцов томатов.(восприимчивый) Длина пыльцек вых трубок,контролю мкм 17,173,03 100,00 13,132,02 76,47 4,143,03 24,11 4,542,02 26,44 3,123,03 18,70- разница достоверна на 5-ном уровне значимости На этих средах проращивают пыльцу томатов указанных форм и с помощью окуляр-микрометра измеряют длину пыльцевых трубок у 100 проросших пыльцевых зерен в каждом варианте опыта. Как видно из таблицы, максимально достоверные различия между контрастными по устойчивости образцами по длине пыльцевых трубок у проросших пыльцевых зерен на среде с фузариевой кислотой достигаются при концентрации ее в пределах 0,15-0,30 г/л. Именно эти концентрации рекомендуется использовать для дифференциации образцов томатов по степени устойчивости к фузариозному увяданию. При этом устойчивыми следует считать образцы, анализируемый показатель которых отличается от контроля не более чем на 50 . Предлагаемый способ благодаря быстроте (часы) и простоте исполнения превосходит не только традиционные методы полевой оценки на инфекционных фонах, но и лабораторные (по чувствительности вегетативных органов к живому патогену или его токсину). Кроме того, этот способ эффективен, позволяет оценить большие объемы селекционного материала и, следовательно, способствует ускорению процесса отбора фузариозоустойчивых генотипов томатов. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.