Способ получения антител к ткани мозга крупного рогатого скота

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛ К ТКАНИ МОЗГА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА(71) Заявитель Республиканское научноисследовательское дочернее унитарное предприятие Институт экспериментальной ветеринарии имени С.Н. Вышелесского(72) Авторы Красочко Петр Альбинович Бойчук Сергей Викторович Полещук Николай Николаевич Капуцкий Федор Николаевич Герт Евгений Владимирович Торгашов Вадим Иванович Зубец Олег Владимирович(73) Патентообладатель Республиканское научно-исследовательское дочернее унитарное предприятие Институт экспериментальной ветеринарии имени С.Н. Вышелесского(56) Иммунологические методы. - М. Медицина, 1987. - С. 9-19, 442-443. Красочко П.А. и др. Международная научно-практическая конференция Современные вопросы патологии сельскохозяйственных животных. - Мн.,2003. - С. 157-159.2145227 1, 2000.(57) Способ получения антител к ткани мозга крупного рогатого скота, включающий иммунизацию мыши путем внутрибрюшинного введения антигена и адъюванта с последующим отбором у иммунизируемой мыши асцитической жидкости, отличающийся тем, что иммунизацию проводят с интервалом в 7 дней путем 6-кратного введения в качестве антигена суспензии ткани мозга крупного рогатого скота с концентрацией белка 1 мг/мл, содержащей 20-25 мг/мл окисленной микрокристаллической целлюлозы, при этом одновременно с последним введением антигена вводят 0,5 мл асцитической жидкости,взятой от мыши с перевиваемой саркомой 180/, после чего через 10-12 дней отбирают асцитическую жидкость у иммунизируемой мыши, центрифугируют 20 мин при 8000 об/мин и используют надосадочную жидкость в качестве источника антител. Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, в частности к способам гипериммунизации животных. Известен способ получения моноспецифических антител путем гипериммунизации животных-продуцентов антигеном внутрибрюшинно с дальнейшим заражением их асцитной карциномой и с последующим отделением и очисткой получаемых антител 1. Однако недостатком данного способа является недостаточный иммунный ответ у животных-продуцентов на введение одних антигенов. Известна способность некоторых веществ, называемых адъювантами, при совместном с антигеном парентеральном введении стимулировать выработку иммунного ответа. 10456 1 2008.04.30 Наиболее близким к заявляемому является способ получения антител к тканям крупного рогатого скота, включающий иммунизацию мыши путем внутрибрюшинного введения антигена и адьюванта с последующим отбором у иммунизируемой мыши асцитической жидкости 2. Однако данный адъювант обладает рядом недостатков вызывает нерассасывающиеся инфильтраты, абсцессы и поражения периферической нервной системы. Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности способа получения антител против тканей мозга крупного рогатого скота. Поставленная задача достигается тем, что в способе получения антител к ткани мозга крупного рогатого скота, включающем иммунизацию мыши путем внутрибрюшинного введения антигена и адьюванта с последующим отбором у иммунизируемой мыши асцитической жидкости, иммунизацию проводят с интервалом в 7 дней путем 6-кратного введения в качестве антигена суспензии ткани мозга крупного рогатого скота с концентрацией белка 1 мг/мл, содержащей 20-25 мг/мл окисленной микрокристаллической целлюлозы, при этом одновременно с последним введением антигена вводят 0,5 мл асцитической жидкости, взятой от мыши с прививаемой саркомой 180/, после чего через 10-12 дней отбирают асцитическую жидкость у иммунизируемой мыши, центрифугируют 20 мин при 8000 об/мин и используют надосадочную жидкость в качестве источника антител. Пример 1. Суспензия окисленной целлюлозы представляет собой тонкодисперсный белый порошок с содержанием карбоксильных групп 2,0-5,0 , карбонильных групп 1,5-1,7 , альдегидных групп 0,1-0,2 , связанного нитроэфирного азота 0,2 , зольностью 0,2 ,растворимостью в 0,1 растворе щелочи до 100 , растворимостью в воде при 20 С до 10 , температурой начала разложения от 165 С. Пример 2. При получении сыворотки для проведения исследований сформированы 2 группы по 7 белых мышей в каждой. Животным опытной группы 1 6-кратно внутрибрюшинно вводили ткани мозга крупного рогатого скота в дозе 0,1 мл при концентрации белка в антигене 1 мг/мл с добавлением целлюлозы 20-25 мг/мл. Интервал между иммунизациями 7 дней. Одновременно с последним введением антигена вводят 0,5 мл асцитной жидкости,взятой от мышей с перевиваемой саркомой 180. Через 10-12 дней у мышей отбирают асцитную жидкость, центрифугируют 20 мин при 8000 об/мин и используют надосадочную жидкость как источник антител. В результате исследования уровня антител в асцитной жидкости в реакции агглютинации с суспензией тканей мозга титр антител составлял 116-132. Животных второй опытной группы иммунизировали по вышеуказаной схеме, но антигеном без адьюванта. В результате исследований установлено, что титр антител к тканям мозга крупного рогатого скота в асцитной жидкости, полученной от мышей после иммунизации чистым антигеном без целлюлозы в реакции агглютинации, составляет 12 - 14. Источники информации 1. Финогенов А.Ю., Лях Ю.Г. Получение иммунного асцита от белых мышей к токсинокомплексу АВ// Ветеринарная медицина Беларуси. -1. - 2004. С. 12-14. 2. Иммунологические методы / Под ред. А. Фримеля. - М. Медицина, 1987. - С. 472. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.